Test di gruppo sanguigno RapidVet-H. Gruppo sanguigno universale nei cani. Cosa può sostituire il sangue donato per gli animali

Nella pratica quotidiana delle moderne cliniche veterinarie, la procedura della trasfusione di sangue - emotrasfusione - è entrata saldamente ed è diventata un luogo comune. infortunio, ferite da arma da fuoco, operativo e emorragia postpartum, grave sanguinamento gastrointestinale, avvelenamento, conseguenze di piroplasmosi gravemente sopportata e molte altre malattie accompagnate da anemia (anemia): tutte queste sono condizioni che possono essere fatali senza trasfusioni di sangue. E fino a poco tempo fa era così. Diventata una routine quotidiana, la trasfusione di sangue ha salvato la vita a centinaia di animali. Ma affinché, se necessario, la trasfusione di sangue venga eseguita correttamente, senza complicazioni associate alla trasfusione di sangue incompatibile, ogni proprietario di cane deve conoscere il gruppo sanguigno del proprio animale domestico.

Non è un segreto che la prima trasfusione di sangue nella vita di un cane sia facilmente tollerata nella stragrande maggioranza dei casi e non porti a reazioni anafilattiche. Ma, a partire dalla seconda trasfusione, è già necessario utilizzare sangue donato, coincidenti nei principali fattori più critici. Dato l'uso abbastanza diffuso oggi della trasfusione di sangue, sempre più spesso entrano in clinica animali che hanno già una trasfusione di sangue nell'anamnesi. E i proprietari dovrebbero assolutamente ricordare che la seconda e tutte le successive trasfusioni di sangue nella vita del tuo animale domestico saranno già pericolose senza determinare il gruppo sanguigno.

Qual è il gruppo sanguigno di un cane?

Cominciamo con cos'è un antigene di gruppo? Questa sostanza, o meglio, una proteina presente nel sangue dato organismo(sulla superficie di ciascun eritrocita) e che, quando entra in un altro organismo, viene da esso percepito come “estraneo”. In questo caso si verifica una risposta immunitaria con la produzione di anticorpi. Quando il sangue "estraneo" entra di nuovo, la risposta immunitaria è così forte che c'è una minaccia diretta per la salute e persino la vita del paziente.

I gruppi sanguigni umani e i gruppi sanguigni del cane non sono esattamente la stessa cosa. Nell'uomo si distinguono due antigeni di gruppo principali (e diversi rari aggiuntivi): A e B. Inoltre, le persone determinano anche il fattore Rh, che ha anche proprietà antigeniche e che è presente o meno nel sangue umano. Pertanto, le persone hanno quattro gruppi sanguigni principali: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV), ognuno dei quali può essere Rh-positivo o Rh-negativo.

I cani non hanno il fattore Rh e sono già noti più di una dozzina di antigeni di gruppo. Il loro effettivo numero e ruolo nel corpo del cane, potenziale antigenico e proprietà biologiche rimarrà oggetto di studio da parte di esperti per molto tempo a venire.

Ad oggi è stata adottata la designazione internazionale per gli antigeni di gruppo noti dei cani: DEA - Dog Erythrocyte Antigen. I singoli antigeni (o fattori di gruppo) sono designati da numeri: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5, ecc.

PER UNA TRASFUSIONE HEMO DI SUCCESSO, È IMPORTANTE CONOSCERE IL FATTORE DEA 1.1!

È DEA 1.1 che ha le proprietà antigeniche più forti, in quanto è in grado di causare potenti reazioni immunitarie. I restanti fattori di gruppo dei cani in pratica non portano, in caso di incompatibilità, a tale grave complicanze cliniche.

Il nostro laboratorio ha la capacità di determinare il fattore DEA 1.1. È presente nel sangue del cane (cane DEA 1.1 positivo) o non presente (DEA 1.1 negativo). Secondo le statistiche europee, circa il 45% dei cani è DEA 1.1 positivo, il resto è negativo.

I cani positivi per DEA 1.1 sono destinatari universali, cioè possono essere trasfusi con il sangue di qualsiasi altro cane, ma idealmente, da un cane DEA 1.1+ (chiariamo che il cane donatore deve essere assolutamente sano e non avere precedenti di trasfusioni di sangue). Un cane DEA 1.1+ può essere donatore solo per lo stesso cane DEA 1.1 positivo.

I cani negativi per DEA 1.1 sono donatori universali, cioè il loro sangue può essere trasfuso ad altri cani, ea loro solo lo stesso, DEA 1.1 - sangue negativo. Ma ancora una volta, idealmente, è meglio trasfondere sangue da un cane positivo - positivo e da uno negativo - negativo.

Cosa succede se un cane negativo viene trasfuso sangue positivo? Inizialmente, non ci sono anticorpi contro il fattore DEA 1.1 nel sangue di un tale cane, quindi la prima trasfusione ha quasi sempre successo, senza reazioni immunitarie clinicamente pronunciate. Ma un tale cane rimane sensibile a questa sostanza, che gli è estranea, per il resto della sua vita, poiché nel suo sangue si è formato un “esercito” di corrispondenti anticorpi. Ripetute trasfusioni di sangue, se eseguite a caso, indipendentemente dal gruppo sanguigno, possono essere fatali per questo cane. Inoltre, se un tale cane è una femmina, i proprietari dovrebbero evitare di accoppiarsi con DEA ​​1.1 - maschi positivi, perché parte della sua prole sarà positiva. E poiché gli anticorpi materni attraversano facilmente la barriera placentare fino ai feti e si trovano anche nel colostro, i cuccioli appena nati soffriranno di anemia emolitica e potrebbero morire, ed è anche possibile la morte fetale intrauterina.

Quindi, ogni cane deve determinare il gruppo sanguigno! E se ha un fattore DEA di 1,1: positivo o negativo, dovrebbe essere indicato passaporto veterinario. I proprietari di cani responsabili si preoccupano in anticipo delle esigenze future del loro animale domestico!

Proprietari di cani negativi DEA 1.1, ricordate: il vostro cane può essere un vero eroe salvavita per l'animale domestico di qualcuno, perché è un donatore universale!

George Lubas DVM Università di Pisa, Italia

George Lubas è Professore Associato di Ematologia Clinica Comparata presso l'Istituto di Patologia Speciale e Medicina Clinica Veterinaria dell'Università di Pisa, Italia.

Riepilogo

• I cani raramente hanno titoli elevati di anticorpi naturali contro i globuli rossi.
• Le reazioni alla prima trasfusione di sangue di un cane sono rare.
• I donatori di sangue per i cani devono almeno avere contraccolpo per l'antigene DEA 1.
• I gatti con gruppo sanguigno B sono rari, ma molto spesso li hanno livelli alti anticorpi naturali contro l'antigene A.
• Le trasfusioni incompatibili nei gatti possono causare reazioni acute.
• Quando si trasfondono gatti, è molto importante determinare i gruppi sanguigni ed eseguire test di compatibilità incrociata.

introduzione

La terapia trasfusionale in medicina veterinaria ha registrato negli ultimi anni una rapida crescita, soprattutto negli animali domestici, e alcuni studi ne hanno documentato l'utilità in numerose patologie ematologiche. Molte recensioni sono state pubblicate su argomenti correlati come i gruppi sanguigni nel cane e nel gatto, le caratteristiche immunoematologiche sia nel cane che nel gatto: indicazioni alla trasfusione di sangue; etico e ricerche cliniche relative ai donatori di animali; produzione e conservazione di emoderivati (1,3, 4, 6, 7) .

Caratteristiche immunoematologiche nel cane

Da quando sono stati pubblicati i primi studi in questo campo negli anni '50, nei cani sono stati identificati diversi gruppi sanguigni. La nomenclatura dei gruppi sanguigni riflette la divergenza di opinioni di diversi autori che hanno partecipato a questi studi e attualmente vengono applicate allo stesso modo due diverse classificazioni:

• DEA = Antigene canino dei globuli rossi (es. DEA 1).
• Lettera maiuscola per sistemi e singola lettera minuscola per fattore A(es. Sa). A volte viene aggiunto un numero per sottotipo(es. Aa1).

Antigeni vari gruppi sangue sono riconosciuti da anticorpi specifici come risultato di reazioni dirette o indirette (cioè test dell'antiglobulina) di agglutinazione ed emolisi. Alcune di queste reazioni possono avvenire solo a determinate temperature (ad es. 4°C, 25°C o 37°C). La distribuzione dei diversi gruppi sanguigni tra le razze non è stata studiata in dettaglio, anche se è stato riportato che i levrieri hanno frequenze molto basse di antigeni DEA 1.1 e 1.2 (2, 6, 9). (Tabella 1).

TABELLA 1. Caratteristiche dei gruppi sanguigni nei cani

Metodo scelto; (+)= metodo alternativo; - = nessuna reazione.

Pochissimi gruppi sanguigni sono stati identificati come rilevanti per il trattamento trasfusionale, sebbene i gruppi DEA 1.1, 1.2 e 7 siano i fattori antigenici più comuni. Nei cani, è riconosciuto che gli anticorpi presenti in natura sono molto rari e, se presenti nel siero, sono a basso titolo o reagiscono a temperature diverse da quella corporea. Infatti, solo il 15% circa dei cani mostra anticorpi naturali contro DEA 3, 4, 5 e 7. La presenza di tali anticorpi naturali non deve essere confusa con gli anticorpi del gruppo sanguigno acquisiti. I primi ns non sono associati ad alcuna manifestazione di immunostimolazione, mentre i secondi hanno una potente reazione immunitaria, causata, ad esempio, da trasfusioni di sangue incompatibile (2,6,9).

È proprio per queste caratteristiche immunoematologiche che una reazione alla prima trasfusione è estremamente rara quando si trasfonde sangue incompatibile in un cane. (2,3,6,9).

Caratteristiche immunoematologiche nei gatti

Il principale gruppo sanguigno nei gatti è designato come AB e consiste di tre tipi di sangue. Le sue caratteristiche sierologiche e antigeniche sono mostrate in Tavolo 2. Recentemente è stata determinata la struttura biochimica degli antigeni dei gruppi sanguigni felini. Sono glicolipidi e glicoproteine ​​che si differenziano per la componente di acido neuraminico (6-8).

TABELLA 2. Caratteristiche del sistema dei gruppi sanguigni AB nel gatto (2, 3, 7, 8)

Il gruppo sanguigno (fenotipo) A-B- non è mai stato trovato.
pavimento. = positivo; neg. = negativo

Il gruppo sanguigno A è rappresentato principalmente nelle popolazioni di gatti domestici a pelo corto e duro. Questi gatti hanno molto raramente alti livelli di anticorpi naturali nel loro siero. Al contrario, i gatti con gruppo sanguigno B sono rari, ma molto spesso hanno alti livelli sierici di anticorpi naturali contro l'antigene A. Nelle popolazioni possono verificarsi marcate differenze nella frequenza di questi gruppi sanguigni gatti di razza, dove la distribuzione dei gruppi sanguigni era influenzata dai metodi di allevamento selettivo delle razze (Tabelle 3 e 4) (6-8).

TABELLA 3. Sistema dei gruppi sanguigni AB nei gatti domestici a pelo corto e lungo (8)

* Includi la percentuale di gatti A+ B+: Olanda =1%, Australia =0,4% Giappone =9,7%.

Ci sono implicazioni pratiche di queste caratteristiche immunoematologiche nei gatti: se viene trasfuso sangue incrociato, la durata della vita dei globuli rossi del ricevente è di circa 4-5 settimane. Se viene utilizzato sangue incompatibile, la durata della vita dei globuli rossi può diminuire da poche ore a diversi giorni. Inoltre, le trasfusioni incompatibili possono causare una reazione acuta, particolarmente grave se i globuli rossi di gruppo sanguigno A vengono somministrati a gatti di gruppo sanguigno B, anche per la prima volta. (6-8).

Indicazioni generali per la trasfusione di sangue

La trasfusione di sangue può essere utile in alcuni disturbi ematologici. Indicazioni chiave, in ordine di importanza e applicazione moderna, il seguente (3,4, 6-8):

• Sanguinamento acuto.
• Anemia emolitica acuta.
• Anemia non reversibile con ematocrito (PCV) tra il 12 e il 15%.
• Coagulopatia ereditaria o acquisita
• Trombocitopenia/patia
• Leucopenia
• Ipoproteinemia (con restrizioni per l'uso del plasma).

Parametri che confermano la necessità di una trasfusione urgente (3,4,6-8):

• Rapida diminuzione del volume circolante (< 30%)
• PCV inferiore al 20% o al 15% (rispettivamente cane e gatto)
• Sanguinamento continuo o emolisi
• Scarsa risposta al trattamento tradizionale
• Mucose pallide
• Aumento del tempo di ricarica capillare (> 2 secondi).
• Tachicardia
• Tachipnea

Nel valutare la necessità di trasfusioni, il medico deve tenere conto di diversi altri fattori. (3,4,6-8):

• Il grado di anemia e il tasso di perdita di sangue.
• reazione midollo osseo determinato contando i reticolociti negli strisci sangue periferico o aspirati midollari.
• La causa dell'anemia, che fornirebbe una preziosa guida prognostica.

La medicina veterinaria deve tenere conto anche dell'etica e della legge sulla tutela del donatore, dotandosi di adeguati strumenti per la raccolta e la somministrazione del sangue. Infine, non vanno trascurate le considerazioni economiche relative alle sostanze utilizzate e la supervisione professionale della loro somministrazione (3, 6-S).

Più recentemente, è stata prestata maggiore attenzione alla trasfusione autologa. Questa procedura elimina qualsiasi rischio di reazione immunoematologica avversa o trasmissione di malattie e può essere utilizzata durante un corso di laurea chirurgia addominale. Il sangue viene prelevato dalle cavità del corpo e reintrodotto sistema circolatorio con opportuni dispositivi di filtraggio. È anche possibile prelevare il sangue 2-3 settimane prima dell'intervento previsto, conservarlo in modo appropriato e, se necessario, iniettarlo durante l'intervento (3, 6,7).

Selezione del donatore e prelievo del sangue

Il cane donatore deve soddisfare i seguenti requisiti (1,3, 5-7):

• Peso oltre 25 kg.
• Età da 2 a 8 anni.
• Carattere calmo.
• PCV superiore al 40%.
• Regolare vaccinazione contro le principali malattie infettive come peste, epatite infettiva, leptospirosi, infezione da parvovirus e rabbia.
• Clinicamente sano (conteggio completo consigliato) elementi sagomati sangue e lo studio del suo profilo biochimico).
• Controllo di alcune malattie infettive a seconda dell'area geografica (babesiosi, leishmaniosi, ehrlichiosi, borreliosi, brucellosi e dirofilariosi).
• Sono esclusi i gruppi sanguigni DEA 1.1,1.2 (A) o DEA 7 (Tr), anche se è dubbio che DEA 7 sia significativo nelle reazioni trasfusionali.
• Non dovrebbero esserci isoanticorpi naturali contro gli eritrociti nel siero.
• Il cane dovrebbe sottoporsi a un test di coagulazione di routine perché il sangue donato può diventare una fonte di piastrine e fattori della coagulazione.

Il sangue viene solitamente prelevato dalla vena giugulare in modo asettico (il sito del prelievo di sangue deve essere tagliato e sbrigliato chirurgicamente). La quantità assunta non deve superare i 20 ml/kg con una frequenza massima di 1 ogni tre settimane. Ai donatori abituali dovrebbe essere somministrato un supplemento di ferro di 10 mg/kg di solfato ferroso al giorno. Si consiglia di utilizzare kit commerciali per la raccolta del sangue come sacche di plastica in polivinilcloruro (PVC) preriempite con destrosio fosfato citrato e adenina (CPDA-1) in un rapporto di 14 ml di anticoagulante per 100 ml di sangue. Il sangue può essere conservato fino a 35 giorni se conservato a 4-6°C, oppure è possibile prepararne alcuni emoderivati. La raccolta del sangue viene solitamente effettuata riempiendo direttamente la sacca del donatore. Allo stesso tempo, viene monitorata la miscelazione uniforme con l'anticoagulante. Il riempimento accelerato può essere ottenuto posizionando il sacchetto in una camera a vuoto (1, 3, 5-7).

Il gatto donatore deve avere le seguenti caratteristiche (3, 6-8):

• Peso compreso tra 5 e 7 kg.
• Età da 2 a 8 anni.
• Sterilizzato e calmo.
• PCV superiore al 35%.
• Regolarmente vaccinato (calcivirosi, panleucopenia herpes virus, clamidia e rabbia).
• Clinicamente sano e testato Haemobartonellafelis e virus della leucemia (FeLV), del virus dell'immunodeficienza (FIV) e della peritonite infettiva (FIP).

Figura 1 Una serie di strumenti per la raccolta e la conservazione del sangue umano, adattabili anche ai cani. Include (1) un tubo di ingresso con un ago (di solito 18G) che porta a (2) Sacca da 250 ml per sangue intero trattato con 35 ml di CPDA-1 come anticoagulante. Questa borsa ha 2 uscite (3), (4) diversi anelli di tenuta in alluminio per chiudere il sistema conduttivo; (5) un morsetto multifunzionale che consente la rimozione del sangue dal sistema donatore, un sigillante per crimpare gli anelli di alluminio e uno strumento di taglio per tagliare il sistema tra i sigillanti; (6) set standard per infusione di sangue con punta per facilitare la penetrazione nella sacca di sangue, filtro per coaguli (di solito 170-230 um di diametro), contagocce, sistema di guida del recipiente con adattatore per ago e morsetto di controllo del flusso.

Determinare il gruppo sanguigno dei gatti donatori consente, quando è necessario il sangue, di selezionare rapidamente e correttamente un donatore se il gruppo sanguigno del paziente è noto.

Per garantire la necessaria fissazione, il gatto donatore viene anestetizzato o sedato prima di prelevare il sangue. Durante la raccolta del sangue, il PCV deve essere costantemente monitorato e il gatto deve ricevere soluzione salina in quantità 2-3 volte il volume di sangue raccolto, sia per via endovenosa che intraperitoneale. Ogni 3 settimane possono essere prelevati fino a 11 ml di sangue per chilogrammo di peso corporeo del gatto donatore. Se il sangue raccolto deve essere immediatamente trasfuso al paziente, si consiglia di utilizzare grandi siringhe contenenti una parte di soluzione di citrato di sodio al 3,8% in 9 parti di sangue. La coagulazione del sangue può essere evitata trattando la siringa da 15 UI/ml con eparina. Tuttavia, l'eparina provoca l'aggregazione piastrinica e inibisce i fattori della coagulazione. (immagine 2). Quando conservazione a lungo termine il miglior anticoagulante, come descritto sopra, è il CPDA-1 (3,6-8).

Figura 2 Prelievo di sangue con una siringa da 50 ml intrisa di un anticoagulante (in questo caso CPDA-1) attraverso un ago a farfalla 21G dalla vena giugulare di un gatto sedato.

Opportunità di ricevere il sangue donato

Ce ne sono almeno tre diversi modi ottenere donatori e, di conseguenza, sangue donato. L'approccio adottato dipenderà dalle esigenze individuali di ciascuno pratica veterinaria(5,6,7). Va ricordato, tuttavia, che l'uso di animali come donatori è associato a problemi etici sia per il medico che per il proprietario dell'animale, ed è infatti illegale in molti paesi.

Donatori in una colonia chiusa

Vantaggi:

• Clinico. È facile scegliere un donatore in quanto ha un gruppo sanguigno noto.
• Malattia. Gli animali sono completamente privi dell'opportunità di ammalarsi malattie infettive trasmesso con il sangue.
• Mancanza di stress. Gli animali sperimentano uno stress e un'ansia minimi durante la procedura di prelievo del sangue poiché sono abituati al processo.

Screpolatura:

• Etico. Gli animali vengono utilizzati esclusivamente allo scopo di prelevare il sangue. La cura dell'animale può essere finalizzata solo al mantenimento della sua salute ed è limitata al periodo in cui può essere utilizzato come donatore. Dopo questo periodo, ogni tentativo deve essere fatto per metterlo in un ricovero per animali.
• Finanziario. Importi significativi vengono spesi per il mantenimento e la cura dei donatori.

Donatori pubblici

I proprietari di animali domestici locali offrono i loro animali domestici per la donazione su base volontaria.

Vantaggi:

• I proprietari di animali domestici sono direttamente coinvolti nel programma.
• Il gruppo sanguigno viene determinato negli animali, viene effettuato il controllo veterinario, compresi gli esami per le malattie trasmesse con il sangue.
• Il prelievo di sangue è meno frequente (ogni 2-3 mesi).

Screpolatura:

• Aumento del rischio di malattie infettive trasmissibili per via ematica se il sangue non viene controllato ad ogni donazione.
• Costi notevolmente più elevati e ritardi nella ricezione sangue adatto. Il prodotto finale ha una durata di conservazione più breve ed è più costoso.
• I donatori possono potenzialmente provare disagio o stress a causa della procedura di donazione del sangue.

Donatori della clinica veterinaria

Molti professionisti hanno scelto di tenere gli animali donatori, spesso di proprietà del personale della clinica, dentro o vicino alla clinica. I vantaggi e gli svantaggi di questo approccio sono simili a quelli già evidenziati in precedenza per i donatori pubblici. Inoltre, gli animali sono permanentemente nella clinica rischio aumentato acquisizioni infezioni ospedaliere. Tuttavia, il sangue raccolto da questi donatori viene quasi sempre utilizzato come sangue intero fresco o in scatola piuttosto che come componenti del sangue trasformati.

Preparazione e somministrazione di sangue intero ed emoderivati

Nella medicina veterinaria, a differenza della medicina umana, i metodi di trasfusione e la preparazione dei prodotti sanguigni non si sono sviluppati in modo così intensivo e la trasfusione di sangue intero è ancora il metodo principale accettato ovunque. Tuttavia, mentre i prodotti sanguigni sono spesso utilizzati nei cani, nei gatti ci sono limitazioni a causa della piccola quantità di sangue che può essere raccolta. (1, 3-7). La produzione di emocomponenti è limitata dalla necessità di lavorare in condizioni asettiche e dalla disponibilità di attrezzature specializzate:

• Centrifuga refrigerata.
• Estrattore al plasma.
• Frigorifero con temperatura costante 4-6C.
• Camera di stoccaggio a bassa temperatura con una temperatura inferiore a -20C.
• Altri ricambi come sacche per il trasporto del plasma (secco), tubi di estrazione, fascette e sigillanti.

Sangue intero

Il sangue intero fresco è il massimo modo semplice ottenere materiale idoneo alla trasfusione. Pertanto, ha di più vasta gamma uso clinico ed è indicato per tutti i tipi di anemia, coagulopatia ereditaria o acquisita e disfunzione piastrinica. Poiché il sangue intero è la fonte primaria di trasfusione con pochissima pratica nei cani ed è preferito nei gatti, non è necessario produrre altri preparati dal sangue raccolto.

L'uso di sangue intero conservato (fino a 30-35 giorni), se raccolto con CPDA-1, è limitato a tutti i tipi di anemia e non è adatto per la malattia emostatica (1,3-7).

Eritrociti conservati

I globuli rossi conservati (PRBC) contengono un gran numero di fluido cellulare rimanente nella sacca di sangue primaria dopo che circa l'80% di plasma e CPDA-1 è stato introdotto asetticamente nella sacca di trasporto. Si preparano ponendo la busta in una centrifuga refrigerata per 15 minuti, ad una velocità di 5.000 ge una temperatura di circa 3-6°C. I PRBC insaccati vengono conservati refrigerati a 3-6° C. e utilizzati fino alla data di scadenza (circa 30 giorni), scolorimento o qualsiasi anomalia. Prima della trasfusione, la sacca deve essere riscaldata. Se è necessario diluire il contenuto per facilitare la trasfusione, aggiungere solo cloruro di sodio. I PRBC sono indicati per il reintegro dei globuli rossi (come, ad esempio, in condizioni di anemia cronica) e soprattutto in situazioni in cui il paziente è a rischio di essere sovraccaricato di volume di liquidi aggiuntivo. I PRBC possono essere usati in combinazione con i cristalloidi per trattare la perdita ematica acuta.

Plasma

Il plasma è il supernatante e, come i PRBC, viene preparato mediante centrifugazione del sangue intero canino. Se il plasma viene preparato utilizzando una centrifuga refrigerata, separato entro 6 ore dalla raccolta e immediatamente congelato (-18°C o meno), viene chiamato Plasma fresco congelato(FFP) e viene utilizzato per ripristinare i fattori della coagulazione, inclusi i componenti instabili. La validità è di 1 anno a -40°C senza perdita di attività del fattore di coagulazione. Il plasma deve essere scongelato a 30-37°C e somministrato appena possibile dopo lo scongelamento. Plasma ottenuto più di 6 ore dopo il prelievo del sangue o Plasma fresco congelato, inutilizzato entro 24 ore dopo lo scongelamento o 1 anno di conservazione, è contrassegnato come Plasma congelato(FP). Ha ancora alcuni fattori di coagulazione (es. Fattore IX) ma è utilizzato principalmente come fonte di albumina. crioprecipitato(CP) può essere preparato da FPP. La procedura consiste in uno scongelamento prolungato, dopo il quale il supernatante viene rimosso in un sacchetto separato. CP è un componente del sangue ricco di fibrinogeno e FVIII, molto utile nel trattamento dell'emofilia A e della malattia di von Willebrand. Il plasma residuo viene utilizzato anche in altre coagulopatie, ad eccezione di quelle sopra menzionate, e come fonte di albumina. (1,3-7) . In generale, il plasma può essere ottenuto da sangue intero con CPDA-1 prima della data di scadenza, ma questo prodotto ha un uso molto limitato ed è adatto solo come fonte di albumina.

piastrine

Il plasma ricco di piastrine (PRP) viene preparato entro 6 ore dalla raccolta del sangue mediante centrifugazione delicata (ovvero 2.000 g per 3 minuti) di un serbatoio di sangue intero raccolto con CPDA-1. Il supernatante viene trasferito in una sacca aggiuntiva utilizzando un estrattore di plasma. Periodo di validità - fino a 3 giorni a 3-6°C e agitazione costante (1,3-7).

Selezione di un donatore-ricevente per gruppo sanguigno (compatibilità)

La certezza finale che gli eritrociti del donatore siano realmente adatti al ricevente e che successivamente svolgeranno efficacemente la funzione di trasportatore di ossigeno nel corpo può essere data solo dai risultati di un test incrociato. Questa procedura si compone di due fasi (3, 4, 6-8).

Grande prova di crossover

Gli eritrociti del donatore (lavati tre volte e pesati in soluzione fisiologica al 3-5%) vengono messi in contatto con il plasma o il siero eparinizzato del ricevente (una o due gocce ciascuno). La versione più veloce del test che utilizza strisci di sangue è meno utile in quanto solo il siero o il plasma con un titolo elevato di anticorpi anti-RBC mostrerà agglutinazione o emolisi (visibile solo dopo pochi minuti) (Figura 3). Se eseguito in provette da laboratorio o su buone schede, il test richiede più tempo, ma consente di determinare il basso titolo di anticorpi anti-eritrociti durante l'agglutinazione o l'emolisi (Figura 4-6). Tali reazioni indicano l'incompatibilità dei gruppi sanguigni del donatore e del ricevente.

Figura 3 Metodo di preparazione del vetrino trasparente utilizzato per testare la compatibilità del sangue. Una goccia (50-100 µl) di siero o plasma eparinizzato e una goccia di sospensione di globuli rossi al 3-5% in soluzione fisiologica. la soluzione viene posta su ciascun vetrino. Sulla diapositiva 1 è possibile vedere l'emoagglutinazione, sulla diapositiva 2 la reazione negativa o di controllo e sulla diapositiva 3 l'emolisi.

Figura 4 Metodo in provetta per testare la compatibilità del sangue. Due gocce (100-200 ml) di siero o plasma eparinizzato e due gocce di sospensione di eritrociti al 3-5% in fisica. la soluzione verrà cambiata in ogni provetta. L'emoagglutinazione può essere osservata nella provetta 1, una reazione negativa o di controllo nella provetta 2 e l'emolisi nella provetta 3.

Figura 5 Metodo con micropiastra utilizzato per testare la compatibilità del sangue che illustra l'emoagglutinazione. la soluzione viene aggiunta a ciascun pozzetto. La micropiastra viene quindi posta in un termostato a 37°C ed il risultato della reazione è visibile dopo 15 e 30 minuti. La scheda si inclina leggermente, consentendo a una piccola massa di eritrociti depositati sul fondo del pozzetto di avvicinarsi alla "linea" che indica una reazione negativa (numeri pozzetto A2; B1, 2, 3, 4, 5; Cl, ​​​​2, 3 , 4. 5, 6, 7 ;D7). Si osservano reazioni positive in quei pozzetti in cui è visibile una piccola massa di sedimento eritrocitario in forma "a mezzaluna" (aggregato) sul lato inferiore del pozzetto (numeri pozzetto A), 3, 4, 5. 6, 7; SI6, 7; DI, 2, 3, 4, 5, 6).

Figura 6 Metodo della micropiastra utilizzato per testare la compatibilità del sangue che illustra l'emolisi. 25 limo di siero o plasma eparinizzato e 25 limo di una sospensione di eritrociti al 3% in condizioni fisiche. la soluzione viene aggiunta a ciascun pozzetto. Temperatura di incubazione e tempo di lettura della reazione come da Figura 5. Si osservano reazioni negative nei pozzetti in cui si possono ancora vedere i globuli rossi precipitati (numeri pozzetto A1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; C4, 5; D4, 5, 6, 7). Reazioni positive si osservano nei pozzetti con la stessa colorazione rosa, dove la massa eritrocitaria è scomparsa per emolisi (numeri pozzetto B1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; Cl, ​​​​2, 3, 6, 7; DI, 2, 3).

Piccolo controllo incrociato

È identico al test crossover di grandi dimensioni, ma il test utilizza i globuli rossi del ricevente e il siero o il plasma eparinizzato del donatore. In questo campione, la stessa reazione immunologica positiva indica l'incompatibilità dei gruppi sanguigni del donatore e del ricevente.

Un test incrociato per i cani, se il tempo lo consente, dovrebbe essere eseguito alle tre varie temperature 4°C, 25°C e 37°C o almeno a 25°C. Quando si esegue il test in provette da laboratorio, una leggera centrifugazione (cioè 1.000 g per 2 minuti) dopo il contatto dei globuli rossi lavati con il siero aiuterà a dimostrare l'emolisi (3, 4, 6, 7). Questo test crossover è obbligatorio per tutti i cani che hanno ricevuto in precedenza una trasfusione e per ogni gatto. Anche se il gruppo sanguigno del gatto ricevente e/o del donatore è già noto come AB, potrebbe esserci naturale o anticorpi immunitari associato ad altri fattori di gruppo sanguigno che non sono stati ancora ben definiti nei gatti (3,4,6-8).

procedura di trasfusione di sangue

L'introduzione di sangue intero o PRBC nel ricevente viene effettuata per via endovenosa attraverso la vena cerebrale o giugulare, utilizzando un ago a farfalla da 20 G o un catetere venoso. In precedenza, il sangue deve essere riscaldato a temperatura ambiente, che non deve superare i 37°C. (Disegno 7). L'uso di pompe peristaltiche non è raccomandato a causa del potenziale di emolisi eccessiva. Per evitare l'introduzione di piccoli coaguli, è necessario utilizzare un kit per la fornitura di sangue con un filtro. Se il ricevente è molto piccolo o mostra un'ipotensione significativa, il sangue può anche essere iniettato attraverso il midollo osseo nell'estremità prossimale del femore o dell'omero, dove viene assorbito a una velocità di circa una goccia al minuto. (1,3, 6-8) (Figura 8).

Figura 7 Cane che riceve una trasfusione di sangue attraverso una vena cerebrale.

Figura 8 Trasfusione di sangue intraosseo in un gatto sedato. Lo stesso sito viene utilizzato come in una biopsia del midollo osseo

Il tasso di trasfusione endovenosa di sangue intero o PRBC dovrebbe dipendere da condizione clinica destinatario. Nei primi 30 minuti la velocità di infusione deve essere di circa 0,25 ml/kg; Nei pazienti normovolemici, il sangue deve essere somministrato a una velocità non superiore a 5 ml di sangue per kg di peso corporeo (PC) ogni ora. Questo volume può essere aumentato con attenzione: nei soggetti ipovolemici - fino a 20 ml/kg peso corporeo/ora; mentre nei pazienti affetti da cardiopatie insufficienza vascolare, il deflusso dovrebbe essere ridotto a 0,5-1,0 ml / kg BT / ora (1,3, 4, 6-8).

La quantità di sangue (ml) che deve essere trasfusa al paziente può essere calcolata utilizzando la seguente formula:

dove K è il coefficiente associato al volume sanguigno per ciascuna specie (88 per il cane e 66 per il gatto), BT è il peso corporeo (in chilogrammi) del ricevente e il PCV del donatore è determinato dal volume dell'anticoagulante. Per i cani, il valore dell'emoglobina (Hgb) può essere inserito nella formula sopra invece del PCV applicato - in questo caso, il valore K viene ridotto a 70. In poche parole, la somministrazione di 2 ml di sangue intero o 1 ml di PRBC per kg di peso corporeo aumenta il PCV del ricevente dell'1% (1, 3,4, 6-8).

versato diversi tipi preparazioni di plasma preriscaldate a 37°C in un bagno d'acqua utilizzando un kit di filtri di flusso. In generale il dosaggio finale è di 6-10 ml/kg/ora. A sanguinamento attivo causato da insufficienza della coagulazione, si consigliano 6-10 ml/kg di BT FFP 2-3 volte al giorno per 3-5 giorni mentre il sanguinamento continua. La SR deve essere somministrata nell'arco di 6 ore a una velocità di 12-20 ml/kg di peso corporeo ogni 10-12 ore fino a quando l'emorragia non si arresta completamente (1, 3, 4, 6-8).

Reazioni trasfusionali

Le complicanze trasfusionali possono essere classificate come acute o ritardate e immuni o non immuni, ma ci sono anche differenze tra le specie. (3, 4, 6, 7). Nei cani, poiché hanno bassi livelli di anticorpi naturali, le reazioni trasfusionali acute sono solitamente causate da sensibilizzazione dovuta a una precedente trasfusione incompatibile, specialmente quando l'antigene DEA 1 è coinvolto nella reazione. Infatti, in un ricevente sensibilizzato DBA 1, gli eritrociti DEA 1 positivi trasfusi hanno un tempo di circolazione molto breve, scomparendo dalla circolazione in circa 10 minuti. (3, 4, 6, 7).

Nel gatto, il sangue incompatibile con AB provoca gravi reazioni emolitiche dovute alla presenza naturale di alloanticorpi. A causa del più alto titolo di antigene anti-A nei gatti di tipo B rispetto all'antigene anti-B nei gatti di tipo A, le trasfusioni incompatibili per AB causano reazioni più gravi nei gatti di tipo B rispetto ai gatti di tipo A (3, 4, 6-8).

In entrambe le specie, una risposta immunitaria acuta alla trasfusione provoca emoglobinemia, emoglobinuria, leucocitosi a spostamento sinistro ed eritrofagocitosi. Manifestazioni cliniche della malattia: irrequietezza, ipotensione, salivazione, vomito, incontinenza fecale e urinaria e febbre. Shock, orticaria e morte sono molto meno comuni. Nei cani sani si sono verificati casi di nefropatia reversibile, ma nei cani malati la coagulazione intravascolare disseminata e l'insufficienza renale oligurica possono derivare dalla trasfusione. L'approccio alla gestione delle conseguenze della trasfusione è fondamentalmente simile al trattamento dello shock con grandi quantità di liquidi cristalloidi, glucocorticoidi e al mantenimento dell'escrezione urinaria. La risposta immunitaria ritardata alla trasfusione causata dalla somministrazione di globuli rossi incompatibili (eritrociti) induce una lenta emolisi che porta a bilirubinemia, bilirubinuria e una diminuzione inspiegabile del PCV dopo la trasfusione (3,4, 6, 7).

Le reazioni acute non immunologiche sono caratterizzate principalmente da febbre. Possono derivare dalla contaminazione batterica del sangue o da una reazione tra un antigene e un anticorpo che coinvolge linfociti, granulociti o piastrine. Questa reazione può essere autolimitante o può essere trattata semplicemente con farmaci antipiretici o antibatterici. Occasionalmente, si verifica una reazione di tipo orticaria con eritema, eruzione cutanea e prurito a causa di una reazione allergica a un fattore solubile nel sangue donato (p. es., IgE o ammine bioattive) (Figura 9). In questo caso, si consiglia di utilizzare antistaminici. Sono presenti agitazione, vomito, tosse, tachicardia, dispnea e cianosi Segni clinici carico aumentato sulla circolazione sanguigna, che può essere evitata seguendo le raccomandazioni del medico riguardo alla dose di sangue iniettato, alla sua lenta introduzione e all'uso di globuli rossi in scatola (3, 4, 6, 7).

Figura 9 Cane con sintomi di orticaria (labbra gonfie, edema palpebrale e placche edematose sulla pelle).

Tuttavia, occasionali complicazioni minori possono verificarsi durante la trasfusione. Ad esempio, l'intossicazione da citrato si verifica se grandi quantità il sangue in banca viene somministrato rapidamente o di solito, ma a un animale malato con funzionalità epatica compromessa. L'ipocalcemia si verifica occasionalmente a causa della chelazione del calcio e può essere trattata rallentando la velocità di infusione o, se necessario, rallentando somministrazione endovenosa gluconato di calcio. L'iperkaliemia, che è stata segnalata dopo trasfusioni di sangue nell'uomo, non compare nei cani e nei gatti; perché i loro globuli rossi hanno un contenuto di potassio inferiore (3, 4, 6, 7).

Gruppi sanguigni e isoeritrolisi dei neonati

Conoscenza dei gruppi sanguigni realizzati possibile diagnosi e prevenzione del fenomeno dell'isoeritrolisi neonatale - molto malattia importante neonati, specialmente nei gatti. Si ritiene che l'isoeritrolisi neonatale, insieme ad altre possibili cause, sia responsabile della "sindrome del gattino anemico", un grave problema in alcune colonie di gatti causato da un'elevata frequenza di sangue di gruppo B. L'isoeritrolisi neonatale si verifica quando i gattini di gruppo sanguigno A succhiano il colostro da un gatto di gruppo sanguigno B, che è stato accoppiato con un gatto di gruppo sanguigno A. Gli anticorpi naturali contro l'anigene A sono concentrati nel colostro dei gatti di gruppo sanguigno B e, se ingeriti dai gattini, vengono assorbiti e si legano ai loro globuli rossi . I sintomi clinici includono anoressia, crescita stentata, bilirubinuria, ittero, anemia e persino la morte, spesso entro pochi giorni. L'isoeritrolisi neonatale può ora essere diagnosticata nei gattini (è probabile che il test di Coombs sia positivo) e curata semplicemente somministrandoli a un altro gatto in allattamento entro le prime 24 ore dalla nascita senza anticorpi specifici diretti contro gli antigeni eritrocitari. Questa malattia può anche essere evitata emotipizzando i gatti prima dell'accoppiamento. (3, 4, 6-8).

L'isoeritrolisi neonatale si verifica anche nei cani, ma molto meno frequentemente che nei gatti a causa dell'assenza di isoanticorpi presenti in natura in titoli elevati. L'isoeritrolisi neonatale può verificarsi nei cuccioli nati da una cagna che ha ricevuto in precedenza sangue incompatibile contenente l'antigene DBA 1 mediante trasfusione. patogenesi, sintomi e misure preventive-come nei gatti (3, 4, 6, 7).

Conclusione

La relativa semplicità dei sistemi di gruppi sanguigni canini e la bassa frequenza di isoanticorpi naturali in questa specie hanno permesso ai veterinari di ignorare quasi le incompatibilità dei gruppi sanguigni nei pazienti, specialmente alla prima trasfusione. È auspicabile una scelta più attenta del donatore di sangue, che deve essere almeno DEA 1 negativo.La situazione è molto diversa nel gatto, e reazioni avverse può verificarsi anche con la prima trasfusione. Pertanto, nel trattamento dei gatti, è importante determinare i gruppi sanguigni e condurre test incrociati.

Un altro problema si pone nella scelta del donatore, soprattutto a causa del rischio di trasmettere varie malattie al ricevente. Gli sforzi dei ricercatori sono finalizzati alla produzione di prodotti sanguigni sicuri e dei suoi componenti. In futuro per veterinario altri farmaci e metodi, come l'autotrasfusione, il FVIII ricombinante, l'eritropoietina o altri fattori che stimolano le colonie del midollo osseo, così come i trasportatori di ossigeno sintetici, diventeranno più disponibili.

WALTHAM FOCUS VOL 6 N. 4 1996

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Il gruppo sanguigno è ereditato dai genitori. I gruppi sanguigni mostrano marcatori genetici sulla superficie dei globuli rossi (globuli rossi). marcatori eritrocitari estranei il sistema immunitario in grado di riconoscere e sviluppare anticorpi contro di loro. Di conseguenza, si sviluppa una reazione emolitica, cioè si verifica la distruzione dei globuli rossi. Questo, di regola, porta a conseguenze deludenti.

Nella normale pratica quotidiana, moderna clinica veterinaria la trasfusione di sangue è diventata una pratica comune. Sanguinamento operativo e postpartum, ferite da arma da fuoco, lesioni, avvelenamento, sanguinamento gastrointestinale complesso, conseguenze di grave piroplasmosi e altre varie malattie che sono accompagnate da anemia (anemia): queste sono tutte circostanze che possono persino portare alla morte se non viene eseguita una trasfusione sangue. Così era fino a poco tempo fa. Essendo diventata una procedura ordinaria e familiare, la trasfusione di sangue ha salvato la vita a più di cento animali. Ogni proprietario di cane è tenuto a conoscere il gruppo sanguigno del proprio animale domestico, in modo che, se necessario, l'emotrasfusione venga eseguita in modo qualificato, senza i problemi associati alla trasfusione di sangue incompatibile.

Nella maggior parte dei casi, il cane tollera abbastanza facilmente la prima trasfusione di sangue in una vita e non si verifica una reazione anafilattica. Alla trasfusione successiva è importante utilizzare il sangue del donatore, che corrisponde ai fattori essenziali e più critici. Considerando che oggi le trasfusioni di sangue sono una procedura comune, i cani che hanno già subito trasfusioni di sangue finiscono spesso in clinica. I proprietari devono sapere che la seconda e le successive trasfusioni di sangue saranno già pericolose senza determinare il gruppo sanguigno del tuo cane.

Qual è il gruppo sanguigno di un cane?

Scopriamo cos'è un antigene di gruppo. Si tratta di una proteina presente nel sangue di un determinato organismo sulla superficie di ciascun globulo rosso, che viene percepita come "estranea" quando entra in un altro organismo. In questo caso si verifica un ritorno immunitario con la produttività degli anticorpi. Pericolo evidente La salute e persino la vita di un animale domestico appaiono con ripetute trasfusioni di sangue "estraneo".

Il gruppo sanguigno negli esseri umani e nei cani non è esattamente la stessa cosa. Nell'uomo si possono distinguere 2 antigeni del gruppo principale: A e B, e molti altri che si trovano raramente. Inoltre, le persone hanno anche il fattore Rh, anch'esso dotato di proprietà antigeniche, presente o assente nel sangue umano. Si scopre che le persone hanno quattro gruppi sanguigni principali: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV) e qualsiasi può essere Rh-positivo o Rh-negativo.

Nei cani ci sono più di una dozzina di antigeni di gruppo, ma non c'è il fattore Rh. Per molto tempo, gli esperti studieranno le possibilità e le proprietà biologiche degli antigeni, il loro numero effettivo e il ruolo nel corpo del cane.
Per gli antigeni di gruppo generalmente riconosciuti dei cani è stata ora approvata una definizione internazionale: DEA - Dog Erythrocyte Antigen. Ecco come i fattori di gruppo o i singoli antigeni sono contrassegnati con numeri: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5, 6, 7, ecc.
Per una trasfusione di sangue di successo, è necessario conoscere il fattore DEA 1.1!
DEA 1.1 è in grado di attivare risposte immunitarie impressionanti, in quanto possiede potenti proprietà antigeniche. Come dimostra la pratica, in caso di incompatibilità, altri fattori di gruppo non portano a gravi complicazioni cliniche.
Ci sono laboratori che hanno la capacità di determinare il fattore DEA 1.1. Se è nel sangue, allora il cane è DEA 1.1 - positivo, altrimenti DEA 1.1 - negativo. Secondo le statistiche europee, circa il 45% dei cani DEA 1.1 è positivo, il resto è negativo.

I cani che sono DEA 1.1 positivi lo sono destinatari universali, possono essere trasfusi con il sangue di qualsiasi altro cane, ma a condizione che il cane donatore sia assolutamente sano e non abbia precedenti di trasfusioni di sangue. Un animale DEA 1.1+ può essere donatore solo per lo stesso cane DEA 1.1 positivo.

I cani negativi per DEA 1.1 sono donatori universali. Ciò significa che altri cani possono essere trasfusi con il loro sangue, ma loro stessi possono essere trasfusi solo con lo stesso, DEA 1.1 negativo.

Ma la situazione ideale è quando cane positivo il sangue viene trasfuso da DEA 1.1 positivo e negativo secondo DEA 1.1 - da negativo.

Cosa succede se un cane DEA 1.1 negativo riceve una trasfusione di sangue positiva? Inizialmente nel sangue di un tale cane non ci sono anticorpi contro il fattore DEA 1.1, quindi, in pratica, la prima trasfusione va sempre bene. Ma la sensibilità di questo cane non alla sua sostanza, ma nel suo sangue si è formato un “esercito” di corrispondenti anticorpi, rimarrà per tutta la vita. E, se la seconda trasfusione di sangue viene eseguita a caso, cioè il gruppo sanguigno non viene preso in considerazione, può essere fatale per questo cane. Inoltre, se tale cane è una femmina, allora non vale la pena allevare il cane con maschi DEA 1.1 positivi, poiché alcuni dei cuccioli saranno DEA 1.1 positivi. In questo caso, la morte del feto è possibile anche all'interno dell'utero, poiché gli anticorpi della madre penetrano liberamente nel feto attraverso la barriera placentare. Inoltre, gli anticorpi si trovano nel colostro e i cuccioli appena nati soffriranno di anemia emolitica e potrebbero persino morire.

Somministrazione terapeutica di emocomponenti

L'introduzione di componenti del sangue è spesso necessaria come trattamento aggiuntivo per cuccioli e gattini. Generalmente

Vengono utilizzati sangue intero, globuli rossi concentrati e plasma. Le indicazioni per l'uso di sangue intero fresco sono shock emorragico, anemia, grave sanguinamento traumatico, patologia del sangue (trombocitopenia o scarsa coagulazione del sangue) e anemia emolitica non immunitaria. Ad eccezione del sanguinamento, in tutti gli altri casi il sangue intero correttamente conservato può essere sostituito con sangue intero fresco. Trattamento convenzionale la maggior parte delle anemie nei gattini e nei cuccioli può anche essere integrata con trasfusioni di globuli rossi concentrati. Il plasma viene utilizzato principalmente per migliorare la coagulazione del sangue e per gravi carenze proteiche.

Prelievo di sangue intero

Il sito più sicuro e accessibile per il prelievo di sangue intero è la vena giugulare. La quantità di sangue che può essere raccolta in modo sicuro attraverso la vena giugulare da un donatore di cane o gatto è superiore a 22 ml/kg di peso corporeo ogni 2 settimane. I donatori possono essere sedati e il sito di prelievo preparato chirurgicamente. Il contenitore del sangue deve essere posizionato sopra la macchina trasfusionale in plastica e può essere spostato solo dopo che l'ago è stato inserito nella vena. L'ago deve essere pulito per garantire un buon flusso sanguigno e ridurre al minimo l'attivazione piastrinica, la coagulazione e la contaminazione dei tessuti. Quando l'intero volume di sangue è stato raccolto, il tubo viene scollegato prima che l'ago venga estratto dalla vena. La pressione diretta deve essere applicata al sito di raccolta per altri 5-10 minuti per l'emostasi.

Il sangue viene raccolto meglio in sacchetti di plastica contenenti soluzioni di adenina citrato fosfato (CPA) o citrato acido di glucosio (ACG). Il rapporto tra il volume degli anticoagulanti (CFA e ACG) e il volume del sangue è 1:7 per preservare tutti i componenti (in CFA, il sangue di cane e gatto viene conservato per 28 giorni a una temperatura di 28 ° C e in ACG - 21 giorni alla stessa temperatura). Se il sangue viene trasfuso immediatamente dopo il prelievo, vengono aggiunti anticoagulanti diluiti 1:10. Se si utilizza l'eparina, vengono aggiunte 625 unità di eparina per ogni 50 ml di sangue raccolto. Per comodità delle procedure successive, il sangue viene raccolto in sacchetti di plastica nella quantità di 450 ml di CFA o anticoagulante ACH, con miscelazione obbligatoria. Il triplo equilibrio oi numeri decimali vengono utilizzati per controllare la quantità di sangue raccolto. saldo elettronico. 1 ml di sangue pesa circa 1 g, quindi 450 ml di sangue pesano circa 450 g più il peso della sacca e degli anticoagulanti. Dopo la raccolta, il tubo di collegamento viene rimosso e il contenuto della sacca viene miscelato. Il sangue raccolto viene quindi utilizzato immediatamente o conservato a una temperatura adeguata per un uso successivo.

Se è necessaria immediatamente una piccola quantità di sangue raccolto, vengono aspirati 7 ml di anticoagulante in una siringa di plastica da 50 ml e il resto del volume viene riempito di sangue. Il sangue proveniente da qualsiasi serbatoio aperto, sia esso una siringa o una busta di plastica con un ago già inserito, deve essere utilizzato entro 24 ore.

Raccolta di globuli rossi e plasma

La raccolta dei globuli rossi richiede un sistema a due o tre sacche, dove una serve per raccogliere il sangue intero e le altre due sono aggiuntive per i globuli rossi. Ciò consente di mantenere chiuso il sangue raccolto durante la separazione. Dopo la raccolta del sangue intero, gli eritrociti e il plasma devono essere separati da esso. Il sangue raccolto in un sacchetto di plastica con anticoagulanti in un dispositivo di raffreddamento pieno di ghiaccio viene inviato a una struttura locale per l'elaborazione. Il sangue non deve entrare in contatto con il ghiaccio. In una struttura per il trattamento del sangue, le sacche di sangue e anticoagulanti vengono poste in una centrifuga a 4°C e separate a 5.000 rpm per 10 minuti. Il plasma separato viene posto in una sacca aggiuntiva e gli eritrociti rimanenti vengono etichettati e conservati per 21 giorni.

Fresco congelato è il plasma che è stato refrigerato entro 8 ore dalla raccolta del sangue, viene utilizzato principalmente per mantenere la coagulazione del sangue (con emofilia A, malattia di von Willibrand, avvelenamento da rodenticidi, sindrome della coagulazione intravascolare disseminata). Deve essere congelato e conservato a -70°C per una ritenzione ottimale del fattore di coagulazione per 1 anno o in un frigorifero convenzionale per 3 mesi. Dopo 1 anno di conservazione, il plasma non viene utilizzato per il mantenimento del fattore di coagulazione, sebbene possa essere utilizzato per trattare l'emofilia B (richiede il fattore IX) o l'avvelenamento da rodenticidi (richiede i fattori II, VII, IX e X), o può essere conservato per altri 5 anni alla stessa temperatura.

Gruppi sanguigni

Il gruppo sanguigno dei cani non ha importanza. grande ruolo quando trasfuso con sangue di un animale con lo stesso gruppo, ma può verificarsi incompatibilità degli antigeni plasmatici. Il gruppo sanguigno aiuta a minimizzare in pericolo di vita reazione trasfusionale di sangue inappropriato (Tabelle 1 e 2). Questo è particolarmente importante per i gatti che, a differenza dei cani, hanno anticorpi naturali contro altri gruppi sanguigni. Gli animali donatori devono determinare il gruppo sanguigno. Conoscere il gruppo sanguigno può essere importante anche negli animali destinati all'allevamento per prevenire l'isoeritrolisi (particolarmente importante nei gatti).

Tavolo1 Gruppi sanguigni nei cani

* Antigene eritrocitario canino

Gli alloanticorpi passano attraverso il colostro nelle prime 16 ore dopo la nascita dei gattini, e tutti i gattini con gruppo B (in misura minore con gruppo A) hanno questi anticorpi già all'età di poche settimane. Pertanto, i gatti non hanno bisogno di essere sensibilizzati né alla prima trasfusione di sangue né durante la gravidanza per sviluppare alloanticorpi e una reazione negativa può verificarsi alla prima trasfusione o nei gattini della prima cucciolata di un dato gatto. È possibile far nascere gattini con gruppo A da una gatta con gruppo B e una gatta con gruppo A. Nei cani, da una femmina con antigene eritrocitario (SEA) 1.1 negativa e un maschio con SEA 1.1 positivo, cuccioli con SEA 1.1 positivo può nascere. Se ciò accade o la cagna ha ricevuto una trasfusione di globuli rossi ed è sensibile a SEA 1.1, gli anticorpi contro SEA 1.1 passano attraverso il colostro. I cuccioli normali alla nascita possono produrre immuno-intermedio anemia emolitica all'età di 3-10 giorni.

Tavolo 2 Gruppi sanguigni nei gatti (noGriot-Wenk e Giger, 1995)

Controlli incrociati per la compatibilità

Inoltre, quando è possibile determinare il gruppo sanguigno nei cani e nei gatti domestici, possono essere eseguiti test di compatibilità incrociata. La resistenza trasversale indica una sensibilità precoce del ricevente (nei cani) o la presenza naturale di isoanticorpi (particolarmente importante nei gatti). Cuccioli e gattini che richiedono una seconda trasfusione di sangue devono ricevere sangue da donatori con cui sono compatibili.

Vengono eseguiti test incrociati per determinare la compatibilità maggiore e minore. Nel Major Compatibility Test, l'interazione principale si verifica tra le cellule del donatore e il siero del ricevente quando si determina se il ricevente ha anticorpi contro le cellule del donatore. Nel test di compatibilità minore viene esaminata l'interazione delle cellule riceventi e del siero del donatore, evidenziando gli anticorpi nel siero del donatore contro le cellule del ricevente, che è di minore importanza. Entrambi i test vengono eseguiti su sangue fresco, poiché gli anticorpi anti-SEA sono inoltre fissati. La trasfusione di sangue viene eseguita con la compatibilità principale.

Vengono prelevati campioni di sangue di 5 ml dal donatore e dal ricevente e il sangue viene lasciato coagulare. Dopo la centrifugazione, il siero viene posto in provette separate e il coagulo di sangue viene accuratamente rotto e 0,3 ml di cellule vengono separati da ciascun campione e posti in provette, ciascuna contenente 9,7 ml di soluzione fisiologica. Le cellule devono essere immerse in soluzione salina per rimuovere il plasma e prevenire la formazione di coaguli di fibrina. Dopo la bagnatura, la massa galleggiante viene rimossa e le cellule rimanenti vengono poste in una soluzione di 0,3 ml di cellule per 9,7 ml di soluzione fisiologica. La compatibilità maggiore si manifesta aggiungendo 0,1 ml di siero del ricevente a 0,1 ml di sospensione con cellule del donatore, compatibilità minore - aggiungendo 0,1 ml di siero del donatore a 0,1 ml delle cellule del ricevente. Viene effettuata una reazione di controllo tra il siero del ricevente e le cellule bagnate. Ogni test viene eseguito tre volte e invecchiato (incubato) per 15 minuti: uno impostato a 37°C, un altro a temperatura ambiente e un terzo a 4°C. L'incubazione a temperature diverse è necessaria perché la reazione di incompatibilità può avvenire a temperature diverse.

Dopo l'incubazione, ogni provetta viene centrifugata per 1 minuto a 280 rpm e le masse galleggianti vengono controllate per l'emolisi. Le provette vengono agitate delicatamente per controllare l'agglutinazione dei globuli rossi. Il sangue dei gruppi compatibili non mostra né agglutinazione né emolisi. Se non si nota l'agglutinazione, una piccola quantità di materiale viene posta su un vetro di osservazione pulito per l'analisi microscopica. Qualsiasi grado di agglutinazione o emolisi con maggiore compatibilità è un indicatore di incompatibilità e la trasfusione non viene eseguita. Se si verifica una leggera agglutinazione o emolisi con minore compatibilità, la trasfusione è possibile in un caso critico.

Scopo dei componenti del sangue

Gli emocomponenti conservati devono essere riscaldati prima dell'uso! a temperatura ambiente per non provocare ipotermia nel ricevente. Per il riscaldamento viene utilizzato un tubo, avvolto a spirale e inserito bagnomaria con una temperatura dell'acqua di 37-38°C. In alternativa, il contenitore degli emocomponenti può essere posto in un bagno d'acqua a temperatura costante o in un'incubatrice a secco, oppure il plasma congelato può essere riscaldato lentamente in un forno convenzionale. forno a microonde. Il calore in eccesso non è necessario quando si riscaldano gli emocomponenti, poiché il fibrinogeno precipita a una temperatura di 50°C e l'autoagglutinazione inizia quando la temperatura supera i 45°C.

Se gli emocomponenti vengono aperti o un ago è già stato inserito nel contenitore, o se vengono riscaldati a 10°C o più, il contenuto del contenitore deve essere utilizzato entro 4 ore a causa della proliferazione batterica. Gli emocomponenti riscaldati non possono essere riposti in magazzino.

Lo scongelamento a microonde del plasma ha un certo effetto sulla proteina plasmatica, quindi è preferibile scongelarlo a bagnomaria.

Durante la trasfusione, devono essere utilizzati filtri e attrezzature adeguati. Filtri necessari per il ritardo coaguli di sangue e aggregati leucocitari-lamellari, in modo da non causare microcyfarctions nei polmoni come possibile complicazione durante la trasfusione di sangue. La maggior parte delle trasfusioni di sangue richiede un filtro con un diametro dei pori di 170 mm. Il sangue nella siringa deve passare anche attraverso un set standard con connettore Luer.

Per i cuccioli di taglia grande, i componenti del sangue vengono somministrati per via endovenosa attraverso la vena cefalica o giugulare utilizzando un catetere a permanenza da 20 G. Per i cuccioli piccoli e i gattini grandi viene utilizzato un catetere da 22 G, anch'esso inserito nella vena cefalica o giugulare esterna. Inoltre, piccoli cuccioli e gattini possono essere trasfusi nelle vene cefaliche e giugulari esterne utilizzando il kit per trasfusioni di sangue da 23 G. Per ridurre la viscosità quando si utilizzano piccoli aghi, i componenti del sangue possono essere miscelati con NaCI allo 0,9% prima o durante la trasfusione. L'uso di altre soluzioni non è raccomandato. Cuccioli e gattini ipotermici e disidratati di età inferiore a 3 mesi, che spesso non possono infusione endovenosa, la trasfusione di sangue può essere eseguita per via intraossea. L'assorbimento degli emocomponenti trasfusi è molto rapido - circa il 95% in 5 minuti.

Prima della trasfusione, devono essere ottenuti tutti gli indicatori dello stato del corpo: peso corporeo, temperatura, polso, frequenza respiratoria, colore delle mucose, volume totale cellule del sangue e la concentrazione delle proteine ​​plasmatiche. La velocità di trasfusione iniziale deve essere di 0,25 ml/kg di peso corporeo per 30 minuti, quando il ricevente deve essere attentamente monitorato per la risposta alla trasfusione. A causa del basso tasso di trasfusione iniziale, importo minimo componenti incompatibili, ma saranno sufficienti per una chiara reazione al sangue di qualcun altro. Se durante i primi 30 minuti non si sono verificati problemi, la frequenza delle trasfusioni viene aumentata. Ma questa pratica non si applica ai gatti con sangue di tipo B, perché anche 1 ml di sangue di tipo A può causare la morte. Nei gatti le cui razze hanno il gruppo sanguigno B, il gruppo sanguigno deve essere determinato.

Il volume di sangue richiesto viene solitamente trasfuso entro 3-4 ore. Questa regola è abbastanza flessibile perché dipende dal tasso di trasfusione condizioni fisiche e lo stato di idratazione del ricevente. Per un ricevente ipovolemico, sono possibili tassi superiori a 22 ml/kg all'ora. Congestione sistema vascolare, un problema persistente anche nei riceventi sani, può essere complicato nei pazienti con problemi cardiaci e insufficienza renale. Cuccioli e gattini con insufficienza cardiaca potrebbero non essere in grado di tollerare tassi di trasfusione di sangue superiori a 4 ml/kg all'ora.

La quantità di sangue intero necessaria è semplicemente determinata: 2,2 ml/kg di sangue intero trasfuso aumentano il volume cellulare totale dell'1% se il volume di sangue trasfuso è del 40%. Gli eritrociti (con un ematocrito del 60-80%) vengono trasfusi allo stesso modo del sangue intero. I globuli rossi devono essere sciolti in NaCI allo 0,9% prima della trasfusione. Per fare ciò, gli eritrociti vengono aggiunti alla solita soluzione di NaCl allo 0,9% in una quantità di 0,5-1,0 ml / ml. Quantità salino fisiologico determinato dallo stato del sistema vascolare e dallo stato di idratazione del ricevente.

Se il plasma fresco, fresco congelato e congelato viene somministrato a un paziente con sanguinamento grave per migliorare la coagulazione del sangue, la sua dose è di 6-10 ml / kg di peso corporeo 2-3 volte al giorno per 3-5 giorni fino all'arresto dell'emorragia.

Complicazioni da trasfusione di sangue

Sebbene le complicazioni dovute alle trasfusioni di sangue nei cuccioli e nei gattini siano piuttosto rare, accadono. Potrebbe esserci una reazione emolitica agli eritrociti incompatibili trasfusi a un ricevente che ha già anticorpi inizialmente o dopo la prima trasfusione. I gatti con gruppo sanguigno B, che hanno già gli anticorpi per il tipo A, possono avere una reazione emolitica molto forte già alla prima trasfusione. La maggior parte delle reazioni emolitiche nei cuccioli sono lente e si manifestano come un accorciamento della vita dei globuli rossi dopo la trasfusione e lo sviluppo reazione positiva per il test di Coombs. L'emolisi può verificarsi anche con trasfusione di componenti del sangue surriscaldati o freddi, somministrazione concomitante soluzioni ipotoniche, danni meccanici agli eritrociti causati da attrezzature inadeguate durante il prelievo, la conservazione e la trasfusione del sangue o quando trasfusi sotto pressione attraverso un piccolo ago o catetere o filtro.

Risultati indesiderati dell'incompatibilità leucocitaria e piastrinica, così come delle proteine ​​plasmatiche, sono convulsioni, sintomi neurologici, vomito e orticaria. Per ridurre queste reazioni viene utilizzata la preparazione terapeutica di difenidramide cloridrato nella quantità di 2 mg/kg di peso corporeo. La reazione febbrile è abbastanza rara e piuttosto debole. Reazione settica durante la raccolta del sangue sterile e corretta conservazione succede abbastanza raramente.

Poche persone sanno che la trasfusione di sangue viene eseguita non solo sulle persone. Questa importante procedura a volte salva vite e animali. Se tu e il tuo animale domestico decidete di donare il sangue, o viceversa, il vostro animale domestico ha bisogno di una trasfusione, probabilmente avrete molte domande. In questo articolo cercheremo di rispondere.

La procedura è pericolosa?

Possiamo sicuramente rispondere: no! La donazione è sicura. Prima della manipolazione, il medico calcola il volume di sangue richiesto, il cui prelievo non influirà sulla salute del donatore.

In alcuni animali, questa procedura presenta ancora un piccolo rischio, poiché è necessaria anche l'introduzione di sedativi per la raccolta (l'animale deve rimanere fermo durante la procedura). Tuttavia, non preoccuparti: i farmaci hanno un effetto a breve termine, quindi il rischio è minimo!

Razze di gatti a rischio di malattie del sistema cardiovascolareè necessario sottoporsi (esame cardiologico).

Preso da un donatore. Se i risultati sono normali, viene eseguito un test di compatibilità del sangue tra il donatore e il ricevente. Se il sangue è compatibile, il sangue viene prelevato da un donatore per la trasfusione. Il volume di sangue prelevato da un donatore è circa il 10% del volume totale di sangue circolante.

Il sangue viene prelevato da una vena del torace, dell'arto pelvico o dalla vena giugulare. Il sito di prelievo del sangue è appositamente preparato: i capelli vengono rasati e la pelle viene trattata con un antisettico. Il prelievo di sangue avviene entro 1-2 ore. La durata della procedura dipende dal volume di sangue calcolato e dalla tolleranza di questa procedura da parte del donatore. Il sangue viene raccolto in un contenitore speciale attraverso un catetere endovenoso.

Se necessario, l'animale viene sedato (vengono somministrati sedativi).

Gli animali domestici hanno gruppi sanguigni?

Sì, cani e gatti hanno gruppi sanguigni. Nei gatti si chiamano: A, B e AB. Il gruppo sanguigno è determinato dal test.

E nei cani controllano principalmente la presenza o l'assenza di un antigene importante per monitorare le complicanze nelle trasfusioni di sangue.

Inoltre, prima della procedura, viene eseguito un test di compatibilità del sangue. Questo viene fatto per assicurarsi finalmente che il sangue degli animali domestici sia compatibile tra loro.

Ho bisogno di cure speciali a casa dopo la procedura?

NO. Il donatore ha solo bisogno di essere nutrito e riposato. Senza restrizioni attività fisica non ne ha bisogno.

Quanto spesso puoi donare il sangue a cani e gatti?

La risposta a questa domanda non può essere univoca. Viene fissato solo l'intervallo di tempo minimo tra il prelievo di sangue per la donazione. Questo intervallo è di 3 mesi. In media, donare il sangue 1-2 volte all'anno non arrecherà danni. Naturalmente, quando buona salute"coda".

Cosa serve per donare il sangue?

Prima di tutto, ovviamente, un desiderio e un animale domestico sano che soddisfi i requisiti per i donatori. Hai anche bisogno di:

1. Fornire documenti attestanti la presenza di una vaccinazione annuale eseguita in una clinica pubblica o privata.
2. Porta con te cibo, acqua e una ciotola.
3. Prendi guinzaglio, collare e museruola (per cani).

Qual è l'importo della remunerazione del donatore?

Il costo dei servizi del donatore è negoziato individualmente. La ricompensa consigliata è di 1500-2000 rubli, a seconda delle dimensioni dell'animale.

Cosa può sostituire il sangue donato per gli animali?

Sfortunatamente, nella moderna medicina veterinaria, a differenza della medicina umana, non sono ancora stati creati sostituti sintetici del sangue. La maggior parte dei farmaci per reintegrare i componenti del sangue non sono adatti agli animali a causa della loro specificità e possono causare una grave reazione allergica in essi. Ecco perché è così importante per noi che ci siano sempre più donatori di sangue animale. Ecco perché la tua decisione di prendere parte al programma di donazioni e salvare la vita di qualcuno è così preziosa.