Immunologia. Fattori protettivi aspecifici del corpo. Protezione dalle infezioni

Reazioni di agglutinazione
A queste reazioni prendono parte gli antigeni sotto forma di particelle (cellule microbiche, eritrociti e altri antigeni corpuscolari), che si uniscono agli anticorpi e precipitano.
Per avviare una reazione di agglutinazione (RA) sono necessari tre componenti: 1) antigene(agglutinogeno); 2) anticorpo(agglutinina) e 3) elettrolita(soluzione isotonica di cloruro di sodio).
Ag + AT + elettrolita = agglutinato

1. Impostazione di un valore approssimativo reazioni di agglutinazione (RA) su vetro per identificare i batteri del gruppo intestinale.

Riso. 2. RA su vetro.

Le gocce vengono applicate a un vetrino:

1 -esima goccia: - siero agglutinante ai patogeni della dissenteria;
2 -esima goccia: - siero agglutinante agli agenti causali della febbre tifoide;
3 -esima goccia: - soluzione fisiologica (controllo).
Aggiungi a ogni goccia coltura pura testata di batteri . Mescolata.

Nota: risultato positivo- la presenza di fiocchi agglutinati,
negativo - mancanza di scaglie agglutinare
Conclusione: I batteri studiati sono gli agenti causali della febbre tifoide.

2. Contabilizzazione dei risultati RNG impostato per rilevare la tossina botulinica.

L'agente eziologico del botulismo Clostridium botulinum produce tossine di sette sierotipi (A, B, C, D, E, F, G), tuttavia, i sierotipi A, B, E sono più comuni di altri.Tutte le tossine differiscono nelle proprietà antigeniche e possono essere differenziate nelle reazioni sieri tipo-specifici. A tale scopo si può eseguire una reazione di emoagglutinazione passiva (indiretta) con il siero del paziente, in cui si prevede la presenza di una tossina, e con eritrociti carichi di anticorpi di sieri antitossici antibotulinici di tipo A, B, E. Normale il siero funge da controllo.

Riso. 3. Dichiarazione e risultato di RNGA.

Contabilità ombrello pulsanti o ricciolo.

Conclusione: La tossina botulinica di tipo E è stata trovata nel siero del paziente.

Reazione di precipitazione -è la formazione e la precipitazione di un complesso di un antigene molecolare solubile con anticorpi sotto forma di una nuvola chiamata precipitato. Si forma mescolando antigeni e anticorpi in quantità equivalenti. La reazione di precipitazione viene messa in provette (reazione di precipitazione ad anello), in gel, mezzi nutritivi, ecc.

3. Impostazione e contabilizzazione della reazione precipitazione ad anello per determinare il tipo di macchia di sangue.

messa in scena . In una provetta stretta n. 1 con un diametro di 0,5 cm con precipitazione non diluita siero contro le proteine ​​del sangue umano in una quantità di 0,3-0,5 ml, tenendolo in posizione inclinata, lo stesso volume di antigene viene lentamente stratificato lungo la parete con una pipetta Pasteur ( estratto di macchie di sangue). Il siero di precipitazione contro le proteine ​​\u200b\u200bdi pecora viene versato nella provetta n. 2, nella provetta n. 3 - salino(controllo) e aggiungere l'antigene come nella prima provetta. Le provette sono accuratamente posizionate verticalmente in modo da non mescolare i liquidi. Con la corretta stratificazione del precipitinogeno sul siero, il confine tra i due strati di liquido è chiaramente segnato. La reazione è necessariamente accompagnata da controlli del siero e dell'antigene.
Contabilità . I risultati della reazione vengono presi in considerazione a seconda del tipo di antigene e di anticorpi dopo 5-10 minuti, 1-2 ore o dopo 20-24 ore. positivo reazione in una provetta, un precipitato appare sotto forma di un anello bianco al confine tra il siero e l'estratto in esame.

Riso. 4. Reazione di precipitazione dell'anello.

4. Determinazione della tossigenicità di Corynebacterium diphtheria in reazioni di precipitazione dell'agar.

Questa reazione di precipitazione a lungo utilizzata, proposta per determinare la tossicità del Corynebacterium diphtheria, viene posta su agar fosfato-peptone in una capsula di Petri. Una striscia di carta da filtro sterile inumidita con siero antitossico . Dopo l'essiccazione, ad una distanza di 1 cm dal bordo della striscia, le colture isolate vengono inoculate con placche di 10 mm di diametro. In una tazza possono essere seminate da 3 a 10 colture, una delle quali, quella di controllo, deve essere nota tossigena. Le colture vengono poste in un termostato.

Contabilità le reazioni si effettuano dopo 24-48-72 ore Se la coltura è tossigena, a una certa distanza dalla striscia di carta compaiono delle righe di precipitato, che coincidono con le righe del precipitato della coltura di controllo. Loro sembrano " frecce a viticcio”, che sono chiaramente visibili alla luce trasmessa.

Riso. 5. Reazione di precipitazione in agar.

REAZIONI IMMUNOLOGICHE PER RILEVARE ANTICORPI SPECIFICI

5. Messa in scena reazione di emoagglutinazione indiretta (RNG) rilevamento del titolo di anticorpi specifici nel paziente.

In reazione emoagglutinazione passiva(RPGA) gli eritrociti sono usati come carrier. Gli eritrociti carichi di antigene si uniscono in presenza di anticorpi specifici contro questo antigene e precipitano. Gli eritrociti sensibilizzati all'antigene sono usati in RPHA come diagnostica eritrocitaria per la rilevazione degli anticorpi (serodiagnosi).
messa in scena . Nei pozzetti delle compresse di polistirene preparare una serie di diluizioni seriali di siero. Nel penultimo pozzetto si aggiungono 0,5 ml di siero positivo noto e nell'ultimo 0,5 ml salino fisiologico(controlli). Quindi, 0,1 ml di erythrocyte diagnosticum diluito vengono aggiunti a tutti i pozzetti, agitati e posti in un termostato per 2 ore.
Contabilità . In caso positivo, i globuli rossi si depositano sul fondo del pozzetto come uno strato uniforme di cellule con un bordo piegato o seghettato (invertito ombrello), in negativo - stabilirsi nella forma pulsanti o ricciolo.

Riso. 6. Risultato RNGA. Titolo anticorpale - 1:100.

6. Messa in scena reazione di agglutinazione prolungata per identificare il titolo di anticorpi specifici in un paziente.

L'AR espanso per la sierodiagnosi viene inserito nel siero dei pazienti. Viene diluito in una soluzione isotonica di cloruro di sodio da 1:50 - 1:100 a 1:800 o 1:1600.Poiché titoli sierici inferiori possono contenere normali agglutinine presenti in persone sane o pazienti con altre diagnosi ( titolo diagnostico). Come antigene in questa reazione, vengono utilizzati i diagnostici, sospensioni note, di regola, di batteri uccisi, con cui è sicuro lavorare.
Loro mettono reazione come segue. 1 ml di soluzione isotonica di cloruro di sodio viene versato preliminarmente nei tubi di agglutinazione. Al primo di essi si aggiunge 1 ml di siero diluito 1:100 e, dopo averlo miscelato, si trasferisce 1 ml al secondo, dal secondo al terzo, ecc. Nelle risultanti diluizioni doppie di sieri (da 1:100 a 1:1600 o più), vengono aggiunte 1-2 gocce di una sospensione di batteri contenenti 3 miliardi di corpi microbici per 1 ml. Le provette vengono agitate e poste in termostato a 37°C per 2 ore, quindi mantenute a temperatura ambiente per un giorno.

Contabilità le reazioni di agglutinazione espansa vengono eseguite valutando ciascuna provetta in sequenza, a partire da quelle di controllo, con un leggero scuotimento. Non ci dovrebbe essere agglutinazione nelle provette di controllo. Si nota l'intensità della reazione di agglutinazione seguendo i segni:++++ - agglutinazione completa ( fiocchi agglutinati in assoluto liquido chiaro); +++ - agglutinazione incompleta (scaglie in un liquido leggermente opalescente); ++ - agglutinazione parziale(i fiocchi sono chiaramente visibili, il liquido è leggermente torbido); + - agglutinazione debole e dubbia - il liquido è molto torbido, i fiocchi in esso contenuti sono poco distinguibili; - - mancanza di agglutinazione (il liquido è uniformemente torbido).
Dietro titolo si prelevano i sieri il suo ultimo allevamento, in cui l'intensità dell'agglutinazione è stimata almeno due più (++)

Riso. 7. Reazione di agglutinazione prolungata.

Le basi teoriche dell'analisi immunochimica (ICA) si basano sull'immunochimica moderna, sulla conoscenza delle leggi fisico-chimiche delle reazioni immunitarie, nonché sui principi di base della chimica analitica.
L'analisi immunochimica è un metodo per la determinazione di sostanze basato sull'uso di una reazione altamente specifica e altamente sensibile di legame reversibile di un antigene (Ag) con anticorpi specifici(A):
(2.41)
(2.42)
dove gli Ab (anticorpi) sono proteine ​​protettive prodotte dall'organismo in risposta all'introduzione sostanze estranee con gruppi chimici caratteristici; Chi Kl - costanti di velocità di formazione e dissociazione del complesso immunitario Ag-Ab composizione 1:1.
Gli anticorpi sono specifiche proteine ​​del sangue (immunoglobuline) prodotte dal corpo di un animale o di una persona vertebrata in risposta all'introduzione di sostanze estranee. Questa reazione è una reazione protettiva del corpo (una manifestazione di immunità). Sono i reagenti biologici più versatili in grado di fornire un'elevata selettività di azione. Gli anticorpi sono glicoproteine ​​nella composizione. Il corpo produce anticorpi contro antigeni estranei, che si legano all'antigene e vengono espulsi dal corpo sotto forma di complessi immunitari.
Gli antigeni sono sostanze che inducono la formazione di anticorpi. Pertanto, il corpo è protetto dalle sostanze che entrano nel corpo e portano segni di estraneità genetica. Gli antigeni includono sia composti ad alto peso molecolare, come proteine, polisaccaridi, liposaccaridi, acidi nucleici (sia in forma purificata che come componenti di varie strutture biologiche - cellule, tessuti, virus, ecc.), sia vari composti a basso peso molecolare, molti dei quali che si riferiscono solo a composti tossici (ad esempio, pesticidi).

Gli anticorpi possono essere ottenuti per quasi tutte le sostanze. Le sostanze a basso peso molecolare (peso molecolare inferiore a 1000 Da) non hanno proprietà antigeniche, cioè quando ingeriti, non provocano una risposta immunitaria e la formazione di anticorpi. Per stimolare una risposta immunitaria, tali composti devono essere legati in modo covalente a grandi molecole (solitamente proteine) per formare coniugati che vengono utilizzati per immunizzare gli animali. Le sostanze che da sole non provocano una risposta immunitaria, ma essendo coniugate con un vettore, hanno la capacità di stimolare la sintesi di anticorpi contro di essi, sono chiamate apteni.
Vari tipi di apteni possono fungere da apteni. composti organici. Da un punto di vista pratico, sono importanti gli ormoni steroidei e peptidici, un'ampia gamma di composti medicinali, pesticidi, prodotti di sintesi organica industriale con effetti tossici e allergenici.
Attualmente sono stati sintetizzati composti ad alto peso molecolare che non hanno analoghi in natura e sono in grado di indurre la formazione di At (ad esempio polimeri di polivinilpiridina con gruppi funzionali laterali). Tali sostanze sono chiamate antigeni artificiali.
In linea di principio, la reazione immunitaria è reversibile ed è descritta dagli stessi parametri cinetici e termodinamici di qualsiasi processo di formazione complessa, in particolare dalla costante corrispondente - la costante di formazione complessa (C):
(2.43)
sia negli organismi viventi che al di fuori dei suoi Ab sono in grado di formare immunocomplessi Ag-Ab principalmente con Ag complementari, nonostante la presenza un largo numero altri componenti del campione analizzato.
Il primo stadio [equazione (2.41)] della risposta immunitaria caratterizza l'interazione del centro attivo degli anticorpi con il determinante antigenico - l'epitopo (cioè il sito dell'antigene con determinati gruppi funzionali), il secondo [equazione (2.42)] - la formazione di complessi composizione complessa, costituito da un diverso numero di molecole di Ag e At. Il riconoscimento di sostanze estranee e una risposta specifica ad esse si esprime nella neutralizzazione, distruzione ed escrezione di antigeni a causa della formazione di complessi proteici: questa è l'essenza reazioni immunologiche.
Inizialmente, i metodi di analisi immunochimica erano basati sull'uso principalmente del secondo stadio, associato alla formazione di un precipitato visibile (precipitato) o, ad esempio, con l'ag-
glutinazione eritrocitaria. Per la registrazione visiva del processo di precipitazione, è necessario alte concentrazioni componenti e a lungo svolgendo la reazione. Il processo è di natura qualitativa e non consente di raggiungere la necessaria sensibilità delle definizioni. Inoltre, la precipitazione non è adatta per la determinazione di molti composti (ad es. ormoni, composti farmaceutici, pesticidi).
È diventato possibile utilizzare la prima fase per l'analisi quando un marcatore (etichetta) è stato introdotto in uno dei componenti del sistema, che è facilmente rilevabile da qualsiasi metodo fisico. Quindi la reazione è descritta come segue:
(2.44a)
dove Am* è un anticorpo marcato.
Separando i prodotti di reazione (2.44a) dai componenti di partenza, si può trovare la concentrazione di Ar-Am* e, utilizzando l'apposita curva di calibrazione, calcolare il contenuto, ad esempio, di Ar. A una concentrazione fissa di anticorpi, il rapporto di equilibrio delle concentrazioni di antigene libero e legato [Ag] / [Ag-At *] dipende dalla sua concentrazione totale ([Ag] + [Ag-At]). Questo rapporto è alla base di qualsiasi variante dell'analisi immunochimica e consente di determinare la concentrazione sconosciuta dell'antigene.
Molto convenienti per questi scopi erano agenti di "marcatura" come radionuclidi, enzimi, composti fluorescenti o chemiluminescenti, composti paramagnetici, ioni metallici, batteriofagi, il cui uso ha permesso di aumentare la sensibilità dei metodi immunochimici di milioni di volte e ridurre il tempo per la determinazione di Ag a diverse ore.
La varietà di etichette determinava anche la differenza tra i metodi per rilevare i complessi formati, nonché i metodi per separare i complessi e le sostanze di partenza. Per identificare e quantificazione sostanze biologicamente attive di diversa natura nelle varianti di analisi considerate, vengono utilizzati principi immunologici.
Gli indubbi vantaggi dei metodi di analisi immunochimici sono l'elevata sensibilità e selettività, la semplicità e la rapidità delle determinazioni, la possibilità di utilizzarli al di fuori delle condizioni di laboratorio, la semplice preparazione del campione e la possibilità di automatizzare i processi utilizzati. La maggior parte dei metodi immunochimici non richiede apparecchiature costose, poiché il controllo della formazione di immunocomplessi si basa sul rilevamento fotometrico, fluorimetrico, luminescente o elettrochimico. Semi-quantitativo
la valutazione segreta può essere effettuata visivamente, il che rende possibile lo sviluppo di sistemi di test immunitari diagnostici per la determinazione espressa di composti biologicamente attivi.
Va notato che la ristretta specificità dell'ICA in alcuni casi può essere uno svantaggio di tali metodi. Gli svantaggi includono la possibilità dell'influenza dei componenti della matrice in alcuni casi.
specificità immunologica. Gli anticorpi formati in risposta all'introduzione di sostanze geneticamente aliene negli organismi di animali superiori e umani - antigeni, interagiscono specificamente con questi antigeni, nonostante la presenza di molte altre molecole. La specificità unica e l'elevata sensibilità delle interazioni immunochimiche si realizzano non solo nel corpo (in vivo), ma anche, ad esempio, in una provetta (in vitro). Questa è stata la ragione per l'uso di anticorpi come bioreagenti selettivi. Anche le loro molecole più semplici hanno una struttura complessa. Schematicamente la struttura di anticorpi è presentata in fico. 2.12.
L'unità strutturale comune di tutti gli anticorpi è un complesso di quattro catene polipeptidiche - due gambe identiche


Riso. 2.12. Rappresentazione schematica della struttura degli anticorpi:
V - regione variabile situata nella regione N-terminale della catena polipeptidica; C - sito permanente situato nella regione C-terminale

catene con peso molecolare 20-25mila ciascuna e due catene pesanti identiche con un peso molecolare di 50-55mila Le catene leggere contengono circa 220 amminoacidi, pesanti - 440-700 residui di amminoacidi.
Ciascuna delle catene leggere è saldamente collegata alle regioni delle catene pesanti attraverso legami disolfuro intercatena e una varietà di deboli interazioni idrofobiche, elettrostatiche e altre interazioni interatomiche. Esistono legami simili tra le regioni libere delle catene pesanti. La struttura di un tale complesso ricorda la lettera latina "Y". In ogni molecola Ab, entrambe le catene leggere, come le catene pesanti, sono sempre identiche tra loro e sono costituite da due regioni: variabile (V), situata nella regione N-terminale della catena polipeptidica, e costante (C), situata in la regione C-terminale. Catene pesanti di diverse classi Am hanno differenze significative nella struttura, mentre i polmoni sono comuni a tutti gli anticorpi. Le caratteristiche distintive tra specifiche molecole Ab sono rivelate solo all'interno della regione variabile. Ciò è dovuto al fatto che è qui che sono localizzati i residui amminoacidici coinvolti nella formazione del centro attivo della molecola Ab (antideterminanti).
Dal 1964, gli Abs sono stati chiamati immunoglobuline. È stata rivelata l'eterogeneità delle immunoglobuline, che ha permesso di distinguere cinque delle loro classi principali: immunoglobuline G (IgG), M (IgM), A (IgA), D (IgD) ed E (IgE).
La parte principale di Ab è costituita da proteine ​​monomeriche con un peso molecolare di 150 mila Da, chiamate IgG. Sono attualmente la classe più studiata di Am. La concentrazione di IgG nel siero del sangue rispetto ad altre classi di anticorpi è particolarmente elevata e può raggiungere in media 12 g/ml.
La classe IgM comprende anticorpi ad alto peso molecolare (900 mila Da) e alto contenuto carboidrati. Le macromolecole IgM comprendono prevalentemente 5 subunità monomeriche legate tra loro da legami disolfuro. La concentrazione di At di questa classe è di circa il 10% di totale immunoglobuline.
Anche la successiva classe di immunoglobuline (IgA) è caratterizzata da un alto contenuto di carboidrati e si trova in grandi quantità nei fluidi secretori (saliva, lacrime, latte, ecc.). funzione biologica L'IgA è principalmente nella protezione locale delle mucose da varie infezioni.
La concentrazione di IgD, che sono monomeri, nel siero del sangue raggiunge una media di 30 mg / l, il 75% è presente nel plasma sanguigno. Il ruolo biologico delle IgD non è stato completamente chiarito, ma è stato stabilito che agiscono come recettori per i linfociti B.
Le immunoglobuline E sono termolabili, rappresentate da monomeri e prendono parte al corso delle reazioni allergiche. Normalmente, la concentrazione di IgE nel siero del sangue è in media di 0,25 mg / ml. Nelle malattie allergiche, il loro contenuto aumenta a 1,6 mg / ml.
La valenza della molecola At è determinata dal numero di antideterminanti. Nella molecola IgG, ad esempio, ci sono due siti di legame antigenico identici, quindi questi anticorpi sono bivalenti.
La formazione di uno specifico complesso Ag-Ab è fornita dai seguenti legami: legame non polare (idrofobo), che aumenta con
aumento della temperatura; interazioni ioniche (di Coulomb); interazioni di van der Waals che agiscono su un piccolo
distanza; legami di idrogeno; forze repulsive steriche.
Si ritiene che il ruolo più significativo sia svolto dalle forze dell'interazione idrofobica. Il legame non polare si verifica a causa della tendenza dei gruppi idrofobici a soluzione acquosa all'associazione reciproca, che è accompagnata dalla stabilizzazione dell'intero sistema (una diminuzione della sua energia libera con un simultaneo aumento dell'entropia).
L'idrogeno e le interazioni ioniche danno un contributo minore al legame di Ag al centro attivo di Ab. I legami idrogeno si formano quando un atomo di idrogeno, legato covalentemente a un atomo caricato negativamente, interagisce con la coppia solitaria di elettroni di un altro atomo caricato negativamente. Nella reazione di Ag con At, gruppi amminici e gruppi idrossilici. Le forze elettrostatiche derivano dall'interazione di gruppi ionizzati altamente carichi come un gruppo amminico ionizzato (-NH3+) e un gruppo carbossilico ionizzato (-COO).
Un punto importante nella formazione di forti complessi specifici è la presenza di più contatti, che consentono, nonostante la debolezza delle singole interazioni singole, di trattenere saldamente l'Ag nella regione legante l'antigene del centro attivo di Ab. Lo stesso Ag può essere riconosciuto da anticorpi che hanno strutture complementari ad esso, ma in qualche modo differenti nella composizione dei residui amminoacidici nel centro di legame dell'antigene. La complementarità chimica e spaziale di Am è dovuta, da un lato, all'interazione di nubi elettroniche di gruppi chimici reagenti e, dall'altro, a forze repulsive steriche. Inoltre, il centro di legame dell'antigene della molecola della regione At

dà in una certa misura la capacità di legare antigeni che differiscono nella struttura da quello principale. In questo caso, anche alcuni dei comuni residui di amminoacidi nei centri di legame dell'antigene, che differiscono per localizzazione e natura, prendono parte al legame. La combinazione di queste interazioni, sovrapposte l'una all'altra, determina estremamente natura complessa processi che si verificano nel complesso Ag-At.
Dal punto di vista quantitativo, la forza dell'interazione Ag-Ab è caratterizzata dall'affinità, che è dovuta ai legami tra singoli antideterminanti e determinanti complementari di antigeni (o apteni).
La costante di equilibrio della formazione dell'immunocomplesso (Ka) riflette anche la specificità e la forza del legame Ag-Ab (variazione dell'energia libera del sistema durante la formazione del complesso):
(2.446)
(2.45)
Il valore della costante per la formazione di immunocomplessi è solitamente 106-1011 M*1, che corrisponde a una variazione dell'energia libera di legame nella regione di -(24+52) kJ/mol. Se la costante di equilibrio del processo di formazione del complesso è maggiore di 108, allora gli anticorpi sono considerati ad alta affinità.
Se la stessa popolazione anticorpale interagisce con due diversi antigeni Ag, e Ag2 con costanti di complessazione Kx e K2, e Kx »Kv, si dice che questi anticorpi sono altamente specifici per Ag e meno specifici per Ag2.
La combinazione di tutti questi fattori garantisce l'elevata stabilità dei complessi Ar-Ab formati e determina la capacità di Ab di interagire selettivamente solo con un certo tipo Ag (avidità). Sono queste proprietà che consentono agli anticorpi di partecipare solo a determinate reazioni e di agire in questi casi come reagenti analitici. Il loro legame con gli antigeni corrispondenti è più forte e più specifico del legame della maggior parte degli enzimi ai substrati. Spesso sono così selettivi da reagire in modo diverso a due ceppi dello stesso microrganismo.
Anticorpi poli e monoclonali. Gli anticorpi policlonali sono anticorpi prodotti dai linfociti B animali in risposta all'introduzione di sostanze estranee nel corpo. Tali anticorpi sono isolati dal siero del sangue di animali immunizzati (antisieri),
e sono proteine ​​​​della classe delle immunoglobuline, che sono eterogenee nelle loro proprietà fisico-chimiche: specificità e affinità. Gli antisieri policlonali sono ottenuti immunizzando conigli o pecore. L'antisiero così ottenuto è una miscela di diversi Abs in proporzioni arbitrarie. Ciò non consente la produzione di una preparazione Ab standard in grandi quantità.
Gli anticorpi monoclonali sono ottenuti usando sistema immunitario topi e ulteriore applicazione delle tecnologie dell'ibridoma. Gli anticorpi monoclonali sono identici nelle proprietà fisico-chimiche e nella specificità. Tali Abs forniscono specificità e sensibilità molto elevate grazie al fatto che i cloni cross-reattivi vengono scartati nelle prime fasi dello screening. Gli anticorpi monoclonali possono essere prodotti dalle cellule di ibridoma in quantità illimitate, che dipendono solo dalla durata della cellula.
Ottenere Abs policlonali è più facile, veloce ed economico, quindi gli Abs policlonali vengono solitamente utilizzati nella prima fase della ricerca. Gli antisieri risultanti sono caratterizzati da concentrazione di Ab, titolo, efficienza e specificità del legame con Ag.
Il titolo di Ab policlonale è definito come la diluizione finale dell'antisiero che consente ancora a una certa quantità di Ag marcato di legarsi all'Ab (solitamente il 50%). Il titolo può raggiungere valori di 1/10000-1/100000. Più alto è il titolo, meno antisiero è necessario per l'ICA.
Nell'ultimo decennio, c'è stato un crescente interesse per una nuova classe di materiali: i polimeri con impronte molecolari, che è associato alla presenza nella loro composizione di siti di legame altamente specifici complementari per dimensioni, forma, struttura e proprietà fisico-chimiche a determinate proprietà organiche molecole. Tali polimeri sono ottenuti mediante polimerizzazione di monomeri speciali in presenza di un analita. Questa connessione viene quindi rimossa. I polimeri risultanti contengono cavità in grado di incorporare in modo specifico la sostanza esatta che è stata utilizzata per produrre il polimero impresso a livello molecolare. Tali polimeri sono talvolta indicati come anticorpi sintetici.
Come risulta da quanto sopra, gli Abs sono abbastanza accessibili e possono fungere da strumento naturale per il riconoscimento e l'isolamento del composto analizzato. I test immunologici richiedono quantità così piccole di Abs che gli antisieri ottenuti da un coniglio sono sufficienti per più di 5 milioni di campioni.
Antigeni e apteni. Gli antigeni sono agenti estranei (cellule, sostanze) che, entrando nell'organismo degli animali superiori e dell'uomo, sono in grado, da un lato, di indurre una risposta immunitaria dovuta alla formazione di Abs specifici, e dall'altro di formare un complesso immunitario e viene escreto dal corpo.
Le molecole dell'antigene hanno numerosi determinanti epitopi, ed è per loro che vengono prodotti anticorpi specifici. Gli antigeni sono anche caratterizzati da una certa struttura del centro attivo. La capacità di reagire selettivamente con Ab determina la specificità dell'antigene e la capacità di suscitare una risposta immunitaria caratterizza la sua immunogenicità. La specificità di Ag è espressa nella precisione con cui il determinante antigenico si inserisce nel centro attivo di legame dell'antigene dell'anticorpo (antideminante) ed è determinata da un insieme di determinanti, il cui numero determina la valenza di Ag. Di solito, più grande è la molecola di Ag, maggiore è la sua valenza. La natura dei legami dipende dal numero di determinanti (centri attivi) di ciascun antigene specifico: possono essercene due, tre o sei. Di norma, gli antigeni con un peso molecolare elevato hanno un gran numero di determinanti, quindi sono polivalenti.
Le sostanze a basso peso molecolare (con un peso molecolare inferiore a 1000), di regola, non hanno proprietà antigeniche. Possono mostrare specificità, in quanto sono in grado di rappresentare un determinante antigenico separato, ma non hanno immunogenicità. Tuttavia, la maggior parte delle sostanze appartiene a questa classe. medicinali, ormoni, oligosaccaridi e oligonucleotidi, nonché vari ecotossici), quindi la necessità della loro determinazione è ovvia. Per stimolare la risposta immunitaria, tali sostanze - gli apteni - vengono legate in modo covalente a molecole proteiche (albumina sierica umana, ovoalbumina, tireoglobulina, albumina sierica bovina o un peptide sintetico come la polilisina) e il coniugato risultante è animali immunizzati. Tali composti (coniugati) hanno già la capacità di indurre una risposta immunitaria.
L'interazione di Ag (e apteni) che reagiscono in modo incrociato con Ab si basa sulla somiglianza strutturale o completa somiglianza con i determinanti di Ag specifico. La specificità complementare di Ag è solitamente superiore a quella della controparte strutturale cross-reattiva.
Molti degli apteni che compongono gli antigeni modificati sono anche più piccoli di un singolo determinante, ma rappresentano una parte immunodominante dell'intero determinante, che può includere anche una porzione della molecola proteica carrier o un frammento chimico, con l'aiuto del quale viene effettuata la trasformazione dell'aptene in Ar (ad esempio, l'attaccamento dell'aptene alla proteina).

La base di qualsiasi metodo immunologico è la riproduzione artificiale della reazione Ag-Ab nel campione di prova. In questo caso sono possibili due modi di eseguire la reazione: in un campione presumibilmente contenente Abs, si introducono antigeni specifici per essi ottenuti artificialmente e quindi si determina la presenza di un immunocomplesso; in un campione presumibilmente contenente Ag, vengono introdotti anticorpi specifici per essi ottenuti artificialmente e quindi viene determinata la presenza di un complesso immunitario.
Quando si eseguono tali reazioni, viene eseguito il principio dell'interazione "key-lock", quindi è possibile determinare l'uno o l'altro componente delle corrispondenti reazioni immunologiche (Fig. 2.13). Pertanto, è possibile rilevare la presenza, ad esempio, di antigeni negli oggetti ambientali.

Riso. 2.13. Il principio di interazione di componenti di immunologico
reazioni a chiave di blocco

Metodi esistenti l'analisi immunochimica (ICA) può essere suddivisa in diversi gruppi.
Il primo gruppo comprende metodi di analisi basati sull'interazione di Ag e Ab, i cui risultati sono determinati direttamente - visivamente o mediante registrazione strumentale. Questi sono metodi di precipitazione e agglutinazione in varie versioni.
Il secondo gruppo comprende metodi indicatori che utilizzano molecole Ab o Ag etichettate appositamente preparate, che sono indicatori (marcatori) dei risultanti complessi immunitari.
Il terzo gruppo di metodi è costituito da metodi basati sull'uso di immunosensori, che sono un tipo di biosensori.

Le reazioni immunologiche possono essere classificate in quattro tipi, in base ai tipi di anticorpi coinvolti e alle cellule che modulano la reazione, alla natura degli antigeni e alla durata della reazione. La risposta immunitaria è molto complessa, con connessioni autoregolatorie intrasistemiche diversi livelli, Sebbene reazioni individuali solitamente classificato come funzionalmente disgiunto. Sì, è lo stesso medicinale(ad esempio, la penicillina) in diversi pazienti può causare reazioni immunologiche sia del primo che del secondo o terzo tipo. Qualche forza eccessiva risposte sono stati indicati come reazioni di ipersensibilità perché hanno provocato la distruzione o il danneggiamento dei tessuti dell'ospite. Nonostante ciò, la classificazione Gell e Coombs continua a servire come base per la comprensione fisiologia patologica e lo spettro delle reazioni immunologiche che il professionista vede nella clinica. A tavola. 2 mostra le caratteristiche di quattro tipi di reazioni immunologiche.
Tipo I. Le reazioni anafilattiche, chiamate anche reazioni di ipersensibilità di tipo immediato, sono un esempio di reazione di primo tipo. La reazione è causata da un anticorpo di tipo IgE che si attacca alla superficie dei mastociti e dei neutrofili basofili.

Tabella 2. Classificazione delle reazioni immunologiche e Coombis (1975)

Citotossico
reazione
complesso immunitario
Ipersensibilità di tipo ritardato, immunità cellulo-mediata
La reazione antigene-IgE avviene sulla superficie dei mastociti e dei basofili con rilascio di mediatori
La reazione di IgG, IgM con l'antigene avviene sulle membrane cellulari, il complemento viene attivato, le anafilatossine vengono rilasciate, le cellule vengono distrutte
IgE e IgM reagiscono con l'antigene indipendentemente dalla fissazione e si depositano nei microvasi, il complemento viene attivato, le cellule vengono distrutte
Non coinvolto I linfociti T specializzati reagiscono con gli antigeni, le linfochine vengono rilasciate
Anafilassi Vesciche ed eritema sulla pelle
Asma esogeno
Reazioni trasfusionali
Anemia emolitica
Conflitto Rhesus
Malattia da siero Glomerulonefrite
dermatite da contatto reazione alla tubercolina

pesca; Se un antigene è legato a tale anticorpo IgE attaccato, l'attivazione e la degranulazione della cellula porteranno al rilascio di varie sostanze farmacologicamente attive che causano la classica anafilassi (Capitolo 2). Tuttavia, non tutte le reazioni allergiche di tipo 1 sono anafilattiche. Il primo tipo comprende il classico quadro di allergia all'introduzione di penicillina, reazioni al veleno d'api, asma allergico esogeno e rinite allergica. In generale, tutte le reazioni allergiche appartengono al primo tipo.
Tipo II. Le reazioni del secondo tipo sono note come reazioni citotossiche. Coinvolgono anticorpi di tipo IgG o IgM, chiamati anticorpi citotossici. Reazioni di questo tipo si verificano quando gli anticorpi si combinano con antigeni immunospecifici. Gli antigeni possono essere componenti complessi delle membrane cellulari (antigeni del gruppo sanguigno) o componenti molecolari noti come apteni che aderiscono alla superficie dei globuli rossi (p. es., la penicillina). L'interazione dell'antigene con l'anticorpo attiva il sistema del complemento, che a sua volta lisa le cellule. Durante l'attivazione del complemento vengono rilasciati frammenti di peptidi, anafilatossine, che provocano reazioni sistemiche. Le reazioni del secondo tipo includono, ad esempio, reazioni post-trasfusionali basate su incompatibilità del sangue secondo il sistema ABO, malattia emolitica del neonato, autoimmune e anemia emolitica e la sindrome di Goodpasture.
Tipo III. Il terzo tipo di reazioni sono note come reazioni del complesso immunitario. Si formano anticorpi e antigeni solubili circolanti complessi insolubili, troppo piccolo per essere rimosso dai macrofagi del sistema reticoloendoteliale del fegato e della milza. Invece, i complessi si depositano nel letto microcircolatorio. Gli anticorpi della classe IgG o IgM sono coinvolti nella reazione. L'interazione dell'antigene con gli anticorpi attiva il complemento, determinando processo infiammatorio, localizzato attorno ai complessi depositati. Le anafilatossine rilasciate causano anche la migrazione di altre cellule infiammatorie e l'insorgenza di vasculite. Il meccanismo del danno tissutale consiste nel reclutamento mediato dal complemento di immunocomplessi di leucociti polimorfonucleati nel sito di fissazione. Un classico esempio di allergia
La reazione clinica di tipo III è la cosiddetta malattia da siero che si verifica dopo la somministrazione ripetuta di sieri immuni estranei nei morsi di serpente e nel botulismo o nella globulina antilinfocitaria. Esempi di reazioni del terzo tipo sono anche la vasculite che si verifica dopo la somministrazione di penicillina e il lupus eritematoso sistemico indotto da farmaci.
Tipo IV. Le reazioni del quarto tipo sono note come reazioni immunitarie cellulo-mediate o reazioni di ipersensibilità di tipo ritardato. Queste reazioni sono indipendenti dalla presenza di anticorpi. Invece di produrre anticorpi, gli antigeni cellulari o le proteine ​​intravascolari attivano le cellule linfoidi note come linfociti timo-dipendenti. Cellule T attivate può uccidere direttamente le cellule estranee o produrre sostanze speciali- linfochine che organizzano la risposta immunitaria. Le linfochine mediano l'insorgenza dell'infiammazione nella sede dell'antigene estraneo. Regolano le azioni di macrofagi, leucociti polimorfonucleati, linfociti e altre cellule che uccidono cellule e organismi estranei. Lo sviluppo delle reazioni è lento; compaiono solo dopo 18-24 ore, raggiungono un massimo entro 48 ore e scompaiono dopo 72-96 ore.
Esempi di risposte immunitarie cellulo-mediate includono la pelle test della tubercolina, rigetto del trapianto, allergia al sommacco radicale.
Le deviazioni nella funzione immunitaria cellulo-mediata causano un fallimento del normale sistema di sorveglianza immunitaria, a seguito del quale i pazienti sono a rischio di infezione causata da agenti patogeni opportunisti. La sindrome da immunodeficienza acquisita (AIDS) è una manifestazione di anomalie nel sistema delle risposte immunitarie cellulo-mediate. Le sottopopolazioni di linfociti T, note come cellule soppressori citotossiche, subiscono cambiamenti quando vengono infettate dal virus dell'immunodeficienza umana (HTVL-III), con conseguente sviluppo dell'AIDS. Sullo sfondo di tale immunodeficienza, possono verificarsi infezioni causate da patogeni opportunistici (ad esempio, Pneumocystis carinii) e sindromi linfoproliferative (ad esempio, il sarcoma di Kaposi).

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Il sistema immunitario umano è un meccanismo olistico interconnesso che ha una serie di caratteristiche biologiche e fisiche. Il sistema immunitario del corpo è costituito da organi, tessuti e cellule che forniscono condizioni specifiche protezione dagli effetti di corpi estranei. La risposta di difesa specifica è diversa alti tassi ed è in grado di identificare uno specifico patogeno. Pertanto, la difesa specifica del corpo si manifesta attraverso molteplici azioni volte a contrastare agenti estranei.

Componenti del sistema immunitario

Il sistema immunitario umano è costituito dagli organi centrali:

• Midollo osseo;
• timo.

Inoltre, organi periferici:

• milza;
• I linfonodi;
• follicoli linfatici del tratto gastrointestinale.

Questi organi producono tipi diversi cellule e fornire un monitoraggio stabile e costante dello stato degli effetti cellulari e antigenici sullo stato interno generale del corpo. Autorità centrali responsabile della produzione e maturazione dei linfociti.

Il concetto di risposta immunitaria cellulare

La risposta immunitaria cellulare agli agenti patogeni estranei è fornita dai linfociti T, che prendono parte alle reazioni di difesa dell'organismo in due modi. Da un lato, vengono in soccorso quando i linfociti B devono riconoscere un corpo estraneo e stimolarlo a produrre complesse molecole anticorpali. CON rovescio- I linfociti T nel processo di reazione antigenica hanno la capacità di dissolversi e uccidere autonomamente direttamente i corpi estranei. Durante la prima interazione di un linfocita T con un agente estraneo, intera linea reazioni complesse - sensibilizzazione. Nel corso di queste reazioni, i linfociti T acquisiscono la capacità di distinguere gli antigeni da vari altri corpi estranei e contribuiscono allo sviluppo di una risposta a questi agenti patogeni. Nel processo di interazione tra antigeni e linfociti compaiono due tipi di linfociti T: i linfociti killer, in grado di distruggere i corpi estranei, e i linfociti T della memoria, che immagazzinano la memoria degli attacchi nemici e “monitorano” l'organismo in caso di esposizione ripetuta.

Fattori specifici di difesa del corpo

La protezione specifica del corpo impedisce qualsiasi penetrazione estranea di anticorpi. Questo è un intero complesso, incluso varie forme e i fattori attraverso i quali il sistema immunitario sviluppa una risposta al patogeno. Questi includono:

• la formazione di anticorpi;
• fagocitosi immunitaria;
• capacità killer dei linfociti;
• reazione allergica;
• memoria immunologica;
• tolleranza immunologica.

Gli anticorpi svolgono un ruolo significativo nel processo di formazione immunità infettiva e protezione generale del corpo. Si formano nel corpo con l'aiuto di un agente patogeno di terze parti per infezione, nonché per vaccinazione con vaccini vivi. La fagocitosi immunitaria è l'assorbimento di sostanze estranee da parte delle cellule fagocitiche. Di per sé sono molto mobili, hanno la capacità di muoversi autonomamente verso l'agente patogeno. Questo processo in medicina è chiamato chemiotassi. Di norma, il processo di fagocitosi termina quando le cellule "informano" il corpo della fine della cattura e della digestione di corpi estranei.

I fattori specifici di difesa del corpo sono un numero enorme di complessi interconnessi che mirano a sbarazzarsi dei singoli antigeni. Dopo la penetrazione nel corpo, un organismo estraneo inizia il processo di riproduzione e attira l'attenzione delle cellule "native" del sistema immunitario. Questi tipi di cellule sono noti per essere in grado di riconoscere diversi tipi di antigeni e applicare i metodi più efficaci per affrontarli. In generale, l'intero processo che porta a una risposta immunitaria dura dai 7 ai 14 giorni. Dopo questo periodo, le plasmacellule iniziano a produrre attivamente anticorpi. A loro volta, penetrano nel sangue, nella linfa, nel fluido tissutale e continuano a divergere in tutto il corpo.

Anticorpi - tipi universali proteine ​​​​che sono dotate della capacità di interagire con determinati antigeni. Pertanto, tutti gli anticorpi hanno la capacità di distruggere i microrganismi estranei e sopprimere la loro attività, distruggere le cellule estranee e prevenire l'azione di sostanze tossiche.

Gli anticorpi possono essere prodotti specificamente contro l'antigene che entra nel corpo. Sebbene tutti gli anticorpi abbiano struttura complessiva, sono in grado di avere diversi effetti sulle lesioni:

• agglutinine: uniscono gli antigeni;
• precipitine: si depositano sugli antigeni;
• lisina: distruggi le cellule estranee.

Tuttavia, ci sono casi in medicina in cui non tutti gli agenti estranei e corpi estranei possono essere riconosciuti e, inoltre, distrutti nel processo di fagocitosi. In generale, tali metodi sono adatti per affrontare sostanze nocive e microbi, ma sono praticamente impotenti contro i virus. Ciò è dovuto al fatto che i virus penetrano direttamente nelle cellule del corpo, dove si sviluppano. Le cellule e gli anticorpi della fagocitosi non possono neutralizzare i virus che "si nascondono" all'interno delle cellule. Pertanto, per far fronte ai virus, è necessario distruggere le cellule stesse in cui si trovano. I linfociti T killer svolgono un ottimo lavoro con questa funzione. Possiedono abilità unica riconoscere e distruggere le cellule infette da virus, nonché uccidere contemporaneamente le cellule affette da un difetto (ad esempio tumori). SU questa fase c'è un processo azione generale cellula killer immunocompetente e antigene.

Processo di protezione

Pertanto, per un certo periodo di tempo, la risposta immunitaria del corpo si sviluppa e acquista forza. Nel momento in cui il "nemico" inizia a ritirarsi, la reazione della difesa immunitaria deve essere fermata con urgenza, poiché il corpo non deve sprecare energia invano. I soppressori T sono responsabili di questo processo. Se tali cellule fossero assenti nel corpo, il processo di risposta immunitaria e di difesa specifica del corpo sarebbe molto complicato.

Alcune delle cellule del corpo responsabili della protezione specifica hanno la capacità non solo di riconoscere, ma anche di immagazzinare nella memoria tipi specifici di antigeni. Tali componenti della memoria immunitaria hanno una durata di oltre 25 anni. Con il loro aiuto, la lotta contro corpi stranieri funziona molto più velocemente e in modo più efficiente. Succede che il corpo non abbia ancora avuto il tempo di farsi male e che i "nemici" siano già stati respinti. Questa reazione della risposta immunitaria è chiamata "secondaria".

Tipi di immunità

L'immunità umana, quindi, la protezione del suo corpo, può essere di due tipi: innata (non specifica) e acquisita (specifica). Delle due specie, solo una è in costante attività: innata. Grazie a lui, in caso di qualsiasi interferenza estranea, il corpo reagisce immediatamente e mostra una protezione specifica. Risposta immunitaria specifica - la seconda fase più lunga reazione difensiva. Pertanto, si sviluppa a un ritmo molto più lento.

L'attivazione dell'immunità acquisita si manifesta con un aumento della temperatura corporea e debolezza generale organismo, poiché tutte le forze che il corpo spende nella lotta contro agenti patogeni estranei. Esattamente febbre influisce negativamente sui patogeni di varie malattie, porta alla stimolazione di vari processi metabolici nel corpo e aumenta l'attività delle cellule del sistema immunitario umano. Proprio questi fattori influenzano il fatto che non è consigliabile abbattere vari farmaci temperatura durante la malattia, se è inferiore a 38 ° C.

Due tipi di immunità nella loro attività si basano su fattori cellulari e umorali, che a loro volta interagiscono strettamente e funzionano secondo uno schema ben consolidato.

Reazioni immunitarie

Le reazioni tra anticorpi e antigene che si verificano nel corpo sono chiamate sierologiche. Le caratteristiche degli anticorpi includono affinità e avidità. Tutte le risposte immunitarie che si verificano nel corpo umano hanno ampia applicazione v medicina moderna per studi diagnostici e immunologici. Studi sierologici sono anche usati per identificare antigeni microbici, identificare e determinare il gruppo sanguigno, studiare formazioni tumorali maligne e benigne.

Concetto di allergia

Come ogni meccanismo, il corpo umano a volte può fallire. Ad esempio, alcune persone possono sperimentare un'eccessiva ipersensibilità a determinati gruppi di sostanze. Di norma, tali sostanze non rappresentano una vera minaccia per il corpo umano, ma nel processo di penetrazione nel corpo umano si verifica una forte risposta immunitaria. Questo tipo di reazione è chiamato allergia e le sostanze che portano alla sua comparsa sono chiamate allergeni. Possono essere componenti polvere domestica, peli di animali, polline, coloranti alimentari e prodotti con un alto contenuto di sostanze inaccettabili per l'organismo, prodotti prodotti chimici domestici, cosmetici, ecc.

Le allergie sono spesso accompagnate ipersensibilità, che si manifesta sotto forma di tosse, naso che cola, lacrimazione, eruzioni cutanee. IN singoli casi le allergie possono essere particolarmente pericolose per il corpo e persino portare alla morte. Alcuni sintomi di allergia sono molto simili ai segni di malattie infettive, quindi l'esatto quadro clinico può essere descritto solo da un medico professionista.

Protezione dalle infezioni

Il modo più semplice per prevenire l'infezione e stimolare specifici fattori di difesa del corpo è impedire all'irritante di entrare nel corpo umano. La barriera principale in questo caso è la pelle. Essendo in un normale stato intatto, diventa impermeabile alla stragrande maggioranza dei patogeni infettivi. Oltre a tutto questo, la maggior parte dei batteri non può farlo per molto tempo esistere su pelle. Ciò è dovuto al fatto che l'acido lattico e le sostanze grasse prodotte insieme al sudore e alla secrezione delle ghiandole sebacee vengono regolarmente rilasciate sulla pelle. In una tale atmosfera, i batteri non possono sopravvivere a lungo.

Per quanto riguarda gli organi interni di una persona, la penetrazione di batteri e corpi estranei avviene secondo uno schema alternativo. SU pareti interne gli organi secernono muco specifico, che agisce come una certa barriera per proteggere l'agente infettivo. Pertanto, i batteri non possono aderire alle cellule epiteliali. Se i microbi entrano comunque nel corpo, opera un processo naturale: le ciglia dell'epitelio vengono messe in moto tossendo o starnutendo ei microbi attaccati vengono rimossi da soli. Esistono anche numerosi altri fattori che possono proteggere la superficie dell'epitelio dall'esposizione ai microbi, ad esempio il regolare rilascio di urina, saliva o lacrime.

I fattori specifici di protezione dell'immunità umana sono un perfetto meccanismo di protezione contro l'aggressione causata da agenti patogeni biologici estranei, che si è sviluppato nel corso dell'evoluzione e implica il riconoscimento delle differenze più invisibili tra agenti estranei. Viste moderne sulla struttura, l'attività e le funzioni di un sistema specifico sono direttamente correlate al concetto di difesa immunitaria del corpo umano.

Conclusione

Pertanto, viene considerata la difesa specifica del corpo organizzata in modo complesso, costituita da centinaia di fattori individuali strettamente interconnessi. In generale, il processo di protezione del corpo viene eseguito combinando due pietre miliari– riconoscimento e distruzione di corpi estranei e molecole. Ciò si ottiene attraverso dinamica e lavoro ben coordinato immunociti per vari scopi. La violazione di almeno una fase componente di questi processi porta a diverso tipo patologie che possono essere pericolose per il corpo.

REAZIONI IMMUNOBIOLOGICHE, si basano sull'interazione di un antigene e un anticorpo situato nel siero immunitario (secondo le idee di Ehrlich) o un antigene e un siero specificatamente modificato sotto l'influenza della stimolazione dell'immunizzazione (secondo le ultime opinioni). Le reazioni I. più importanti sono l'agglutinazione, la precipitazione, la batteriolisi, la reazione di rigetto del complemento e una reazione basata sull'azione delle opsonine. L'agglutinazione e la precipitazione si verificano quando l'antigene e l'anticorpo corrispondente si incontrano; per l'attuazione della batteriolisi, delle reazioni di rigetto del complemento, ecc., oltre all'antigene e all'anticorpo, è richiesta anche la partecipazione del complemento. Il significato di I. reazioni è duplice. Con il loro aiuto è possibile formulare una diagnosi di una particolare malattia infettiva, portando il siero del paziente a contatto con un microbo, agente eziologico della presunta infezione (reazione di Vidal nella febbre tifoide e paratifoide, reazione di rigetto del complemento nella varie infezioni). D'altra parte, avendo il siero immune a una certa infezione, è possibile identificare un microbo, la cui natura to-rogo è sconosciuta. Le precipitazioni contano anche in dignità - gigabyte. e corte.-med. pratica, consentendo di determinare la specie dell'animale a cui appartiene il materiale di prova.

Reazioni immunologiche(IR) sono ampiamente utilizzati in diagnostica di laboratorio infezioni. Sono usati:
1) per rilevare gli anticorpi nel siero del sangue, ad es. nella diagnostica sierologica malattia infettiva;
2) determinare il tipo o sierotipo di un microrganismo, ad es. sua identificazione antigenica.

IR rivelare la formazione del complesso AG-AT. In questo caso, il componente sconosciuto è determinato da quello noto. Gli IR sono diversi alta sensibilità(AT legame ad AG a quantità trascurabilmente piccole) e specificità (determinata dalle caratteristiche strutturali del centro attivo AT e dai determinanti AG). Sono caratterizzati da fasi di sviluppo. Il primo stadio è specifico, invisibile all'occhio, caratterizzato dalla combinazione del gruppo determinante di AG con il centro attivo di AT. Di conseguenza, si forma un complesso AGAT, che ha perso la sua solubilità in soluzioni isotoniche. Il secondo stadio è aspecifico, visibile all'occhio, e la natura della manifestazione dipende dallo stato di AG, AT e dalle condizioni ambientali in cui AG e AT interagiscono.

Quando gli anticorpi interagiscono con antigeni corpuscolari (batteri, cellule animali, altre cellule), si verificano cambiamenti visibili ad occhio nudo (ad esempio scaglie di agglutinato, lisi cellulare). Se l'AG solubile (finemente disperso) è combinato con AT, la formazione di complessi viene rilevata come risultato dell'adsorbimento preliminare di AG (AT) su sostanze corpuscolari (eritrociti, particelle di carbone, ecc.)

La velocità di reazione dipende da:
- rapporto ottimale AG e AT;
- grado di specificità di AG e AT; -pH del terreno (7,2-7,4);
- concentrazione di elettroliti (cloruro di sodio 0,85%).

A seconda dello stato di AG, AT e delle caratteristiche dell'ambiente in cui AG e AT interagiscono, si hanno reazioni di agglutinazione, precipitazione, lisi, complemento, neutralizzazione, ecc.

Gli IR sono divisi in semplici (due componenti, sono coinvolti solo AG, AT) e complessi (sono coinvolti tre componenti e multicomponenti, AG, AT e il sistema di reazione: eritrociti sensibilizzati, coltura cellulare, pelle di un animale sensibile, ecc. ).