Наследственные и характерные болезни доберманов. Болезнь фон Виллебранда

Симптомы заболевания схожи с гемофилией, в связи с чем болезнь Виллебранда иногда называют псевдогемофилией.

Наиболее характерным и специфическим симптомом vWD являются кровотечения из слизистых полости рта, носа, внутренних органов. Проявление vWD может иметь разные степени тяжести в зависимости от индивидуальных особенностей собаки. В легкой форме заболевание характеризуется умеренно выраженными кровотечениями, в более серьезных случаях – обширными и крайне тяжелыми.

Причина кровотечений - нарушение свертываемости крови из-за недостаточной активности фактора Виллебранда.

В результате дефекта гена, ответственного за синтез фактора Виллебранда, нарушается секреция, функция или стабильность последнего. Вследствие этого возникают геморрагические расстройства, которые являются наиболее распространенными среди наследственных заболеваний крови у собак.

>Молекулярная причина vWD I-го типа – мутация c.7437G>A гена фактора Виллебранда vWF. Данная мутация приводит к снижению количества нормального фактора до 10-20% от нормы, хотя, как оказывается, для некоторых собак, в связи с индивидуальными особенностями, этого количества бывает достаточно для практически бессимптомного протекания vWD.

Заболевание описано для 54 пород собак. Наиболее часто встречается у эрдельтерьеров, бассет-хаундов, доберманов, пинчеров, немецких овчарок, золотистых ретриверов, манчестерских терьеров, цвергшнауцеров, ротвейлеров, шотландских терьеров, пуделей и т.д. Распространенность болезни колеблется в зависимости от породы (61-73% среди доберман-пинчеров, 16-30% среди шотландских терьеров, 28% среди шелти) .

Выделяют три типа болезни Виллебранда.

Чаще всего встречается тип I (особенно характерен для доберман-пинчеров и эрдельтерьеров). В плазме снижена концентрация фактора Виллебранда при наличии мультимеров всех размеров. Тип II встречается реже и характеризуется избирательным дефицитом крупных мультимеров. Тип III представляет собой выраженную недостаточность фактора Виллебранда, практически полное отсутствие мультимеров. Этот тип заболевания наиболее часто встречается среди шотландских терьеров, ретриверов.

В нашей стране также проводятся генетические исследования, выявляющие у собак некоторых пород генетические отклонения, ответственные за развитие болезни фон Виллебранда. В данных тестах диагностируются точечные мутации в гене vWf, приводящие к нарушению синтеза или функции фактора Виллебранда.

I - Выявление мутации, ответственной за развитие болезни фон Виллебранда 1-го типа у собак пород Доберман Пинчер, бернского зенненхунда, дрентской куропаточной собаки, немецкого пинчера, керри-блютерьера, манчестерского терьера, папильона, пемброк-вельшкорги и пуделя.

В данном тесте выявляется мутация в области сплайсинг сайта на границе экзона 43 и интрона 43 в гене vWf фактора фон Виллебранда. Данная мутация - нуклеотидная замена G на А в 7536 положении гена vWf приводит к уменьшению эффективности сплайсинга РНК. Присутствие данной мутации приводит к развитию наследственной болезни с частичным количественным дефицитом фактора фон Виллебранда с сохранением его мультимерной структуры.

Данная мутация может вызывать болезнь фон Виллебранда 1-го типа у собак других пород, в частности, ирландский рыже-белый сеттер, но для этих пород были выявлены и другие мутации, способные вызывать ту же самую болезнь.

Результаты исследования:

vWD-NN не является носителем данной мутации

vWD-NM является носителем данной мутации

vWD-MM является больным

Мы стараемся не использовать производителей с выявленным носительством той или иной болезни, а болезнь фон Виллебранда - именно болезнь!
Собаки питомника, допущенные в разведение, чисты по данному заболеванию и не являются носителями данной мутации!

У собак было установлено большое количество наследственных нарушений, связанных с кровотечениями. Для некоторых из наиболее известных нарушений известны наследственные факторы, в то время как для других влияние наследственности остается неясным. Чтобы уменьшить частоту заболеваний, данную информацию необходимо иметь, прежде чем давать рекомендации к разведению животных.

Коагулопатия виллебранда

Болезнь Виллебранда (vWD) является наиболее распространенным наследственным заболеванием крови у собак. Причиной его является недостаток фактора Виллебранда (vWF). Фактор Виллебранда является связующим гликопротеином, который образуется эндотелиальными клетками и мегакариоцитами. В отличие от тромбоцитов у других видов животных, тромбоциты у собак не содержат большого количества vWFв своих альфа-гранулах. Внеклеточный vWF содержится в субэндотелиальном слое и плазме крови в многомерной форме. Мультимеры варьируются в размерах от 0,5 до 20 миллионов D(дальтоны), при этом мультимеры больших размеров являются гемостатически более активными. Мультимеры состоят из идентичных подгрупп 270,000 D, соединенных дисульфидными связями.

Основная функция vWF состоит в том, чтобы способствовать адгезии тромбоцитов к незащищенному субэндотелию, особенно на участках передвижения высокой нагрузки. vWF может поступать из плазмы крови, эндотелиальных клеток или из субэндотелия. Фактор Виллебранда также имеет значение в соединении друг с другом тромбоцитов в сочетании с рецепторами тромбоцитов и фибриногеном. При активации тромбоцитов они производят экспрессию рецептора, который может осуществлять связь нескольких связующих молекул, включая vWF. Эта связь затем позволяет другим тромбоцитам соединяться с vWF-молекулой, образуя совокупность молекул. Другой важной функцией vWF является формирование крепко связанного комплекса с фактором VIII, продлевая, таким образом, период полураспада фактора VII I.

У собак встречаются три основные формы vWD. В vWDтипа I присутствуют все мультимеры, но в достаточно сокращенных количествах. Данная форма vWD является наиболее распространенной. Она была установлена более чем у 50 пород собак. vWD типа I и тенденция к кровотечениям характерны для добермана, пуделя, шетландской и немецкой овчарки. Склонность к кровотечениям часто проявляется как усиленное кровотечение во время операции или после травмы. Периодически может наблюдаться самопроизвольное слизистое кровотечение (носовое, мочеполовое). Другие стресс-факторы, которые подавляют гемостаз, могут останавливать кровотечение - например, временная тромбоцитопения, которая отмечается после вакцинации с использованием модифицированной живой вакцины или введения несте-роидных противовоспалительных препаратов, которые подавляют активность тромбоцитов. У тяжелобольных животных спонтанное кровотечение может быть затяжным. У некоторых пород было документально установлено понижение vWF, но тенденция к кровотечению отсутствовала. vWD типа I, вероятно, представляет собой гетерогенную группу заболеваний с заметными различиями у разных пород. У vWD типа II более эффективные мультимеры больших размеров отсутствуют, и кровотечение может быть очень сильным. Такая форма заболевания установлена у немецкой жесткошерстной и немецкой гладкошерстной легавой. Наиболее тяжелой формой vWD является тип III, при котором все мультимеры отсутствуют. Данная форма заболевания вызывается кровотечением, которое может угрожать жизни. Согласно имеющимся данным, она встречается у шотландского терьера, чесапик бей ретривера и шетландской овчарки.
Принцип наследования vWD во многом неизвестен. Должен иметь место аутосомальный способ наследования, так как самцы и самки болеют одинаково часто. Было высказано предположение об аутосомальном доминантном способе наследования с неполной проницаемостью. Другой автор предполагает, что у добермана данное заболевание может возникнуть в результате дефекта одного гена, при этом каждый аллель отвечает за 50% уровня vWF, который имеется у собаки. Дефектный аллель приводит к образованию менее 15% нормального vWF. У немецких жесткошерстных пойнтеров vWD типа II, вероятно, наследуется как аутосомальный рецессивный признак. Существуют колебания и перекрывания в уровнях vWF; поэтому иногда бывает трудно точно установить генотип на основании измерения vWF. Поскольку проявление заболевания является гетерогенным, существует вероятность, что меняется генетическая основа данного заболевания.

Диагностическое тестирование

В настоящее время диагностика vWD в основном проводится путем определения уровней vWF и нужно отметить прогресс в определении генетических нарушений, лежащих в основе vWD. Сейчас для некоторых пород собак доступен ДНК-анализ, обоснованные данные которого на момент издания книги анализа еще не были опубликованы. При анализе у пациента VWFон берется как процент от контрольного кровяного депо собаки. Кровяное депо принимается за 100% и часто выражается как 100 единиц. Кровь на анализ должна быть антикоагулирована 3,2%-ной солью лимонной кислоты в соотношении 9/1 крови к антикоагулянту или 15%-ной EDTA(этилендиаминтетрауксусной кислотой) в соотношении 1/100. Не следует использовать гемолизированные образцы, так как гемолиз вызывает значительное понижение уровня vWF. Кровь мгновенно центрифугируется, а затем перед анализом замораживается для хранения. Образец должен перевозиться в замороженном виде на сухом льду во избежание оттаивания. В процессе оттаивания может произойти протеолиз. Такое разрушение протеинов приведет к искусственному увеличению vWFпри использовании антигенного анализа, поскольку распадание больших мультимеров на малые делает уязвимыми более антигенные участки.

Измерение vWF обычно производится либо путем электроиммуноанализа, либо с помощью ELISA с концентрацией, выраженной в виде vWF:Ag(антиген). Используя твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), сотрудники Сравнительной лаборатории Корнелльского университета установили следующие диапазоны: нормальный диапазон - от 70 до 180% vWF:Ag; пограничный диапазон - от 50 до 69% vWF:Ag; аномальный диапазон - от 0 до 49% vWF:Ag. В данном анализе не определяется биологическая активность или многомерное распределение. При использовании данной системы собаки в нормальном диапазоне считаются свободными от vWD и едва ли могут быть переносчиками данного заболевания. Собаки в аномальном диапазоне диагностируются как носители vWD и могут передавать этот признак потомству. Собаки в пограничном диапазоне не подходят под определенную классификацию. Ежедневные колебания в vWF:Ag концентрации бывают высокими, поэтому могут понадобиться многочисленные измерения, чтобы установить у собаки vWD.

Многомерное распределение может быть установлено с помощью электрофореза, хотя обычно он имеется в наличии лишь для исследований. Данный способ имеет ценность в больших мультимерах, которые считаются гемостатически более активными. Также можно измерять способность некоторых веществ образовывать совокупность тромбоцитов, которые при некоторых обстоятельствах зависят от присутствия vWF. Анализ кофактора ботроцетина (змеиный яд) (BCf) оценивает способность vWFвызывать агглютинацию тромбоцитов с большими мультимерами, имеющими более высокую активность. Обычно величина BCFточно соответствует величинам vWF:Ag. Исключение составляет vWDтипа II, при котором BCFниже, чем ожидалось по сравнению с vWF:Ag, возможно, из-за того, что эти собаки испытывают дефицит в более активных мультимерах больших размеров. В продажу поступил комплект агглютинированных тромбоцитов, основанный на BCF, но его клиническое применение ограничено из-за методологических трудностей.

Для определения наличия нарушений в первичном гемостазе можно измерить у пациентов время кровотечения. При vWD как время кровотечения из кутикулы (СВТ; продолжительность кровотечения из ногтя пальца на нижней конечности, который подрезается достаточно коротко для того, чтобы началось кровотечение), так и время кровотечения из слизистых оболочек полости рта бывают продолжительными. Предпочтительнее анализ ВМВТ, так как СВТ также более продолжителен при наличии коагулоггатий, таких как гемофилия типов А и В. ВМВТ измеряется путем определения длительности кровотечения из небольших стандартных надрезов на верхней губе. Врач отгибает верхнюю губу пациента с помощью марли, обвязанной вокруг верхней челюсти. Благодаря этому открывается внутренняя поверхность верхней губы и происходит слабое переполнение сосудов кровью. С помощью устройства, снабженного пружиной (SimplateII, AmericanDiagnostics) , делаются два небольших стандартных разреза в слизистой оболочке. При выборе участка для разреза следует избегать видимых кровеносных сосудов. При появлении крови ее промокают фильтровальной бумагой через каждые 5 секунд ниже мест надрезов, чтобы предотвратить образование сгустка фибрина над раной. Такое впитывание не должно задевать раны, в противном случае будет нарушено образование макромолекулярного комплекса ферментов, образующего поры в клеточных мембранах тромбоцитов. Анализ заканчивается при прекращении кровотечения из надрезов. Берется усредненное значение данных, полученных из двух надрезов. У здоровых собак ВМВТ проходит менее четырех минут. При оценке результатов ВМВТ важно помнить, что ВМВТ является общим анализом первичного гемостаза. Не только vWD, но и тромбоцитопения, нарушения функции тромбоцитов и васкулит приводят к увеличению длительности ВМВТ.
Физиологические факторы, влияющие на vWF:Ag

Известны разнообразные факторы, оказывающие влияние на измерение уровней vWF:Ag. С течением времени они могут значительно меняться у различных особей, и из-за этого становится очень сложным отделить пораженных животных (переносчиков заболевания) от здоровых, основываясь на одном примере. Когда кровь берут из головной вены, уровень vWF:Ag выше, чем когда ее берут из яремной вены. vWF повышается из-за усиленной нагрузки, эпинефрина и беременности. Влияние щитовидной железы вызывает споры, однако недавние исследования показали отсутствие взаимосвязей между гипотиреозом и приобретенным vWD.

Лечение
Метод лечения, применяемый для vWD, зависит от сложившейся ситуации. Врачу многократно приходится учитывать возможность затянувшегося кровотечения во время хирургической операции у пациента с vWD. Реже у пациента возникает самопроизвольное кровотечение, которое трудно остановить. В любом случае бесспорной формой лечения являются продукты крови. При нетяжелой анемии рекомендуется использование свежезаготовленной плазмы, свежезамороженной плазмы или криопреципитата (СР). Криопреципитат является особенно ценным, поскольку врач может давать большие количества vWF, не заботясь об объеме перегрузки, что возможно с продуктами крови. У доберманов с vWDтипа I введение СР значительно повышало уровень vWF в течение 30 минут после введения, и действие его оставалось очевидным по крайней мере в течение четырех часов. ВМВТ аналогичным образом быстро улучшалось, но по прошествии четырех часов оно возвращалось на тот же уровень, что и до лечения. У животных, которым давали свежезаготовленную плазму, уровень vWFувеличивался аналогично тому, как у пациентов, которым давали СР, но улучшение ВМВТ отсутствовало. Значение данного наблюдения неясно, так как, основываясь на клинических экспериментах, свежезаготовленная плазма эффективна при лечении vWD.

DDAVP(десмопрессина ацетат) также может использоваться при лечении vWD, особенно в случаях, когда лечение начинают, чтобы предупредить или остановить кровотечение в связи с операцией. DDAVP широко используется у людей с vWD и оказывает разнообразное действие на развитие гемостаза, включая выделение запасенного vWFиз эндотелиальных клеток. Среди людей у многих пациентов с vWDимеет место значительное увеличение vWF. У собак это увеличение гораздо менее явно выражено, особенно у страдающих vWD. Несмотря на незначительное увеличение vWFу собак с vWD типа I, при заданном DDAVPВМВТ уменьшается. Такое понижение, возможно, является результатом преимущественного увеличения больших, гемостатически более активных мультимеров, которое происходит после введения DDAVP. Препарат начинает действовать через 30 минут, и продолжительность его действия составляет около двух часов. DDAVP приводит к выделению запаса vWF; следовательно, повторное введение DDAVP оказывает значительно меньшее действие, чем первоначальное. При использовании DDAVP перед операцией авторы рекомендуют вновь проверить ВМВТ за 20-30 минут до нее, чтобы убедиться, что препарат начал действовать. В случае несрочных операций авторы обычно вводили DDAVP за один-два дня до процедуры и измеряли ВМВТ. В случае отсутствия реакции животного должны иметься в наличии другие средства лечения во время операции. DDAVP можно давать собакам-донорам, чтобы увеличить до предела величину vWF перед флеботомией. Несмотря на наличие внутривенного продукта, из-за его высокой стоимости успешно применяется внутриносовой препарат, который вводится подкожно 1-4 мг/кг.

Гемофилия типа А

Гемофилия типа А является рецессивным наследственным заболеванием, связанным с Х-хромосомой, и вызывается дефицитом фактора VIII. Обычно носителем заболевания являются самки, а у самцов выражаются лишь признаки заболевания. Однако спаривание между самкой, которая является носителем заболевания, и больным самцом приведет к заражению самки. Данное заболевание установлено у многих пород собак, а также у собакметисов. Чаще всего оно встречается у немецкой овчарки. Клинические проявления различны, в зависимости от степени дефицита. Как и при многих коагулопатиях, наиболее часто возникают кровотечения из разных полостей тела (из брюшной, грудной полости и из суставов), а также распространены гематомы. У тяжелобольных детей после рождения может наступить смерть в результате кровотечения из пуповины. У других детей первые клинические проявления могут наблюдаться при прорезывании зубов. Поскольку фактор VIII участвует в путях обмена внутренней коагуляции, наблюдаются удлинение активированного времени свертывания крови (ACT) и активированного частичного тромбопластинового времени (АРТТ). Диагностика проводится путем специфического анализа фактора. Активность фактора VIII меняется у пораженных животных от 0 до 25%. Результаты ВМВТ обычно бывают нормальными, в то врюмя как СВТ бывает более прюдолжительным. У животных с vWDможет наблюдаться слабое понижение активности фактора VIII. Это понижение имеет место, поскольку фактор VIII циркулирует в пределах vWF, который удлиняет свой период полураспада. У собак с гемофилией типа А обычно бывает повышен урювень vWF.

Лечение при гемофилии типа А состоит в введении продуктов крюви. При необходимости эритроцитов вследствие анемии можно вводить цельную кровь. Свежезаморюженная плазма или криопреципитат предпочтительнее при отсутствии анемии. У людей было предложено лечение анаболическими стерюидными препаратами для увеличения фактор» VIII. К сожалению, анаболические стерюидиые прюпараты также увеличивают фибринолизис, приводя к более быстрому растворению тромба. В результате люди, больные гемофилией, которых лечили анаболическими стерюидными препаратами, обычно имеют повышенную активность фактора VIII, но нуждаются в дополнительных переливаниях крови, по-видимому, из-за ускорения растворения тромбов.

Гемофилия типа В

Гемофилия типа В (болезнь Кристмаса) вытекает из дефицита фактор» IX. Данное заболевание имеет Х-хромосомный рецессивный способ наследования и установлено у 15 порюд собак. Фактор IX представляет собой витамин К-зависимый нрхггеин, вырабатываемый в печени. Клинические признаки гемофилии типа В похожи на те, которые встречаются при гемофилии типа А. Клинические проявления различаются по тяжести от слабого до смертельного крювотечения. В отличие от собак с гемофилией типа А у собак с дефицитом фактора IX неизменно определяется менее 1% нормальной активности фактора. Как ACT, так и АРТТ прюдолжительны у собак с данным заболеванием, поскольку фактор IX является частью внутреннего обменного пути коагуляции. Конечный диагноз зависит от конкретного анализа данного фактора.

Лечение при дефиците фактора IX состоит во введении прюдуктов крюви. При отсутствии анемии показаны свежезаморюженная плазма или холодная надосадочная жидкость. Фактор IX содержится и в сыворотке крюви, поэтому ее также можно вводить.

Другие наследственные коагулопатии

У собак были установлены и другие разнообразные коагулопатии (FogfiJMFoghIT., 1998). У некоторых животных единственным клиническим прюявлением является изменение обычных гемостатических анализов при отсутствии связанной с этим тенденции к кровотечениям. Точная диагностика требует прюведения анализов в справочных лабораториях, участвующих в изучении коагуляционных нарушений у животных. Гипофибриногенемия (дефицит фактора р) была установлена у собак породы сенбернар. У тяжелобольных животных это заболевание связано с увеличением прюдолжительности одноступенчатого прютрюмбинового времени (OSPT; внешний путь обмена коагуляции) и заметным диатезом с крювотечениями. Дефицит аутосомального рецессивного фактор» II нрютрюмбин установлен у собак порюды боксер с прюдлением OSPT. Крювотечение бывает сильным у некоторых щенков, но, как правило, слабым - у взрослых животных. Дефицит фактора VII установлен как аутосомальное доминантное заболевание у собак породы бигль. У них редко бывают кровотечения, несмотря на увеличение OSPT. У кокер спаниелей повышен фактор X в качестве аутосомального доминантного признака с различным проявлением тенденции к кровотечениям. При данном заболевании увеличены как АРТТ, так и о OSPT. Тяжелобольные собаки обычно не выживают. Дефицит фактора XI наблюдался у керри блю терьеров, большой пиринейской собаки и у английского спрингер спаниеля как аутосомальный рецессивный признак. Данное заболевание проявляется в удлинении АРТТ и переменной тенденции к кровотечениям. Дефицит фактора XII (фактор Хейджмана) установлен у карликового пуделя, но чаще всего он встречается у кошек.

Данный дефицит вызывает удлинение АРТТ, но это не связано с тенденцией к кровотечениям. Дефицит прекалликреина (фактор Флетчера) наблюдается у разных пород. Он вызывает удлинение АРТТ, очевидно, без тенденции к кровотечениям.

Гемотерапия

Цельная кровь
В случае, когда анемия является серьезной проблемой, альтернативным методом лечения является введение цельной свежезаготовленной крови (менее чем через 6 часов после ее взятия). При хранении крови факторы VIII vWF и фактор V становятся неактивными, но витамин К-зависимые факторы (факторы II, VII, IX и X) сохраняют свою активность. Доноры должны быть отрицательными для антигенов эритроцитов собаки DEA 1.1, 1.2 и 7. Объем перелитой крови зависит от тяжести анемии, но в основном он составляет от 12 до 24 мл/кг, что позволяет увеличить гематокритное число (PCV) на 5-10%. Главным недостатком при лечении коагулопатии продуктами крови является превышение объема, что может произойти, несмотря на невысокое число факторов коагуляции. Продукты крови, содержащие эритроциты, нужно переливать животным с сильной анемией, так как переливание крови может привести к активизации антигенов эритроцитов. Такая активизация может препятствовать безопасному введению эритроцитов в более поздние сроки, когда в них может возникнуть жизненная потребность.

Свежезаготовленная и свежезамороженная плазма
Плазма, собранная из цельной крови в течение шести часов после ее взятия, называется свежезаготовленной плазмой. Если эта плазма переливается в течение шести часов, вся жизненно важная коагуляционная активность протеинов сохраняется. Быстрое выделение из цельной крови сохраняет активность факторов V, VIII и vWE Свежезаготовленная плазма также содержит альбумин, протеины комплемента, антитромбин III и иммуноглобулины. Плазма, замороженная в течение шести часов после взятия крови, называется свежезамороженной плазмой, может храниться в замороженном виде (желательно при -70°С) и сохраняет свою коагуляционную активность в течение одного года. Обычно переливается от 6 до 10 мл/кг, и это количество вводится через каждые 8 часов по мере необходимости. При введении плазмы проблемой является превышение объема, особенно если животное страдает тяжелым vWDи нуждается в многочисленных переливаниях.

Заготовленная или замороженная плазма
Заготовленная плазма - это плазма, которая отделена от эритроцитов по прошествии более чем 6 часов после взятия крови. При замерзании эта плазма называется замороженной плазмой. В ней отмечается дефицит факторов V и VIII и vWF, но присутствуют остальные факторы коагуляции (включая фактор IX). Такая плазма обычно не применяется при лечении различных коагулопатий.

Криопреципитат
Во время медленном оттаивания свежезамороженной плазмы (при 4°С) образуется преципитат, который называется криопреципитатом (СР). Большая часть фактора VIII, фибриногена и vWFплазмы содержится в СР. Обычно он занимает лишь одну десятую объема первоначальной плазмы. Оставшаяся часть плазмы называется плазмой без заморозки, или холодной надосадочной жидкостью. Холодная надосадочная жидкость продолжает содержать большую часть других активных факторов коагуляции и протеинов плазмы. Криопреципитат и плазма без заморозки могут быть снова заморожены и хранятся в течение года. По имеющимся данным, концентрация vWFв СР колеблется примерно от четырех раз в первоначальной плазме до двадцати раз в оригинале. В основном осаждаются мультимеры больших размеров. Как медленное (при 4°С), так и быстрое размораживание (при 37°С) замороженного СР приводило к одинаковому уменьшению активности факторов VIII и vWF. Интересно, что снижения активности не наблюдалось при оттаивании криопреципитата после хранения в течение 24 часов при комнатной температуре (Stokol, Parry, 1995). Эти данные явно противоречат человеческому СР, при котором понижение происходит на 54%. Нет данных о лечебной активности СР при хранении его при комнатной температуре, и вызывает некоторое беспокойство, что СР, возможно, неэффективен invivo.Высокий уровень определенного vWFможет быть отражением протеолиза, вызванного условиями, влиявшими на СР. Протеолиз расщепляет большие мультимеры на малые фрагменты, способствуя быстрому их обнаружению при использовании антигенного анализа. Хотя они отмечены в анализе invitro,неизвестно, каким образом их эффективность invivoвлияет на остановку кровотечения. Рекомендуется вводить 1 Е криопреципитата (криопреципитат, образованный из 150 мл плазмы) на 10 кг веса тела. Криопреципитат можно получить из имеющихся в продаже банков крови для животных.

Болезнь Виллебранда (von Willebrand disease, vWD) – одно из наиболее распространенных наследственных заболеваний, связанных с проблемами свертывания крови. Симптомы заболевания схожи с гемофилией, в связи с чем болезнь Виллебранда иногда называют псевдогемофилией.

Наиболее характерным и специфическим симптомом vWD являются кровотечения из слизистых полости рта, носа, внутренних органов. Проявление vWD может иметь разные степени тяжести в зависимости от индивидуальных особенностей собаки. В легкой форме заболевание характеризуется умеренно выраженными кровотечениями, в более серьезных случаях – обширными и крайне тяжелыми.

Причина заболевания – количественный дефицит и/или качественные нарушения фактора Виллебранда, мультимерного гликопротеина, необходимого для адгезии тромбоцитов на коллагене в местах повреждения сосудистой стенки. Данный фактор также связывается с фактор свертывания VIII и защищает его от протеолиза. Как правило, vWD имеет наследственный характер, но также встречаются и приобретенные формы.

Наиболее распространенным и при этом менее тяжелым по симптоматике является первый тип vWD, встречающийся у большой группы пород: бассет хаунд, бернский зенненхунд, доберман, доберман пинчер, керри блю терьер, миниатюрный шнауцер, немецкая овчарка, пудель, ротвейлер, такса, папильон, золотистый ретривер и т.д.

Тип наследования vWD I-го типа: аутосомно-доминантный с неполной пенетрантностью. Это означает, что одного мутантного аллеля может быть достаточно для развития заболевания, но не у всех собак с одной или двумя копиями мутантного аллеля болезнь будет развиваться. Носители и гомозиготы по мутации будут передавать аллель заболевания потомству.

Молекулярная причина vWD I-го типа – мутация c.7437G>A гена фактора Виллебранда vWF. Данная мутация приводит к снижению количества нормального фактора до 10-20% от нормы, хотя, как оказывается, для некоторых собак, в связи с индивидуальными особенностями, этого количества бывает достаточно для практически бессимптомного протекания vWD.

ДНК-тестирование:

Для проведения генетического теста требуется проба крови или буккального эпителия (мазок из ротовой полости). При тестировании анализируется мутация c.7437G>A, приводящая к развитию заболевания. В тесте выявляют дефектную (мутантную) копию гена и нормальную копию гена. Результат теста – это определение генотипа, которое позволяет разделить животных на три группы: здоровые (гомозиготы по нормальной копии гена), носители (гетерозиготы) и больные (гомозиготы по мутации).

Болезнь Виллебранда - наследственное заболевание, характеризующиеся нарушением свертываемости крови, спонтанными кровотечениями. При данной патологии наблюдается недостаточность фактора Виллебранда, который участвует в адгезии (склеивании) тромбоцитов и защищает фактор VIII от протеолиза.

Болезнь Виллебранда регистрируется у собак многих пород (более 50 пород собак), но особенно предрасположены доберманы, шотландские терьеры, эрдельтерьеры, золотистые ретриверы, немецкие овчарки, манчестерские терьеры.

Признаки

Носители заболевания долгое время могут оставаться бессимптомными, однако при легком травмировании или плановом хирургическом вмешательстве типично возникновение аномального кровотечения или геморрагии (подкожного кровоизлияния). Менее распространенным признаком является спонтанное кровотечение из носовых ходов или при мочеиспускании. У многих собак клинические признаки не проявляются в течение жизни.

Описание патологии

Болезнь Виллебранда характеризуется дефицитом фактора Виллебранда, белка крови, который отвечает за прикрепление тромбоцитов к коллагену. Таким образом, при снижении его концентрации становится невозможным образование тромбов - сгустков крови, останавливающих кровотечение. Однако болезнь Виллебранда относится к числу трудно диагностируемых патологий, поскольку не все собаки с низким уровнем фактора в крови предрасположены к возникновению спонтанного кровотечения.

Болезнь Виллебранда классифицируется согласно типу и наличию различных компонентов, входящих в состав фактора (они называются мультимерами).

1 тип. Присутствуют все мультимеры, концентрация их значительно ниже нормы.Типичные симптомы - спонтанное кровотечение из носовых ходов, ротовой полости, мочевыводящих путей. Также аномально длительное кровотечение при проведении стандартных операций, таких как чистка зубов, купирование хвоста, ушей, кастрация, стерилизация. Предрасположенные породы: доберман, пемброк вельш-корги, эрдельтерьер.

2 тип. Характеризуется отсутствием больших мультимеров, отвечающих за процесс склеивания тромбоцитов. У пациентов наблюдаются тяжелые формы нарушения свертывания крови, сильные кровопотери. Заболевание регистрируется у немецких короткошерстных пойнтеров.

3 тип. Самый тяжелый тип заболевания. Фактор Виллебранда полностью отсутствует. Типичная клиническая картина - массивная кровопотеря. Предрасположены шотландский терьер, чесапик-бей ретривер.

Диагностика

Самый простой тест на свертываемость проводится путем короткого надрезания слизистой на губе пациента. Однако стоит помнить, что ряд других заболеваний также может влиять на полученный результат.

Более точная диагностика - выявление антител к фактору Виллебранда в крови пациента.

Лечение

Заключается в введении пациенту плазмы крови с большим количеством необходимого белка перед проведением хирургического вмешательства, либо после травмы, спровоцировавшей кровотечение. При тяжелой кровопотере показано переливание крови .

Также возможно применение препарата десмопрессин. Он увеличивает концентрацию фактора Виллебранда, доступного для процесса тромбообразования. Препарат можно вводить превентивно, перед плановым хирургическим вмешательством.

Иногда десмопрессин вводится донорам, перед забором у них цельной крови. Это улучшает биодоступность фактора Виллебранда в полученном материале, однако не все собаки хорошо реагируют на десмопрессин.

Прогноз

В 1996 году ученые генетической лаборатории VetGen, США, в сотрудничестве с Университетом штата Мичиган, гордо объявили об открытии мутации, которая вызывает болезнь Виллебранда типа I у собак.

Болезнь Виллебранда типа I наиболее распространена у собак, порядка 95% всех случаем заболевания. Она характеризуется аномально низкой продукцией белка в крови, который называется фактором Виллебранда и играет ключевую роль в сложном процессе свёртывания, возникающем при повреждении кровеносного сосуда. Течение болезни Виллебранда типа I у собак, предрасположенных к этому заболеванию пород, происходит в лёгкой форме, в отличие от тяжёлой формы болезни Виллебранда типа III, которая встречается у шотландских терьеров и шотландских овчарок.

У собак, у которых встречается тяжёлая формы болезни, болезнь Виллебранда типа III, фактор Виллебранда вообще не обнаруживается в крови.

• для заводчиков породы
• для будущих владельцев породы
• для ветеринарных специалистов

Проведение ДНК теста позволяет принимать обоснованные решения по искоренению гена заболевания фон Виллебранда при разведении собак.

Болезнь фон Виллебранда (Von Willebrand"s Disease) является самым часто встречающимся нарушением свёртываемости у собак.

Это заболевание развивается при наличии в крови дефектного фактора Виллебранда или его дефицита в крови.

Фактор Виллебранда, это крупный мультимерный (разноразмерный) белок, синтезирующийся эндотелиальными клетками и мегакариоцитами. Фактор Виллебранда необходим для нормальной адгезии тромбоцитов. Мультимеры фактора Виллебранда разного размера (мелкие, средние и крупные) циркулируют в плазме. Самые крупные мультимеры белка гемостатически наиболее активны и первыми откладываются в тельцах Вейбеля-Палада в эндотелиальных клетках сосудов. Фактор Виллебранда также действует как переносчик фактора свертывания VIII (FVIII-C), обеспечивая стабильность FVIII-C в циркуляции путём предотвращения протеазоопосредованной деградации.

Болезнь фон Виллебранда делится на 3 типа на основании наличия качественных или количественных дефектов фактора Виллебранда.

Болезнь фон Виллебранда типа 1 объединяет пациентов, у которых наблюдается аномально низкие концентрации структурно нормального фактора Виллебранда. Это самый часто встречающийся тип болезни фон Виллебранда у собак (более 95% от всех случаев).

Тип 2 объединяет пациентов со структурным нарушением фактора Виллебранда. Тип 2 редко встречается у собак.

Тип 3 (который также часто называют "тяжелый тип 1") объединяет пациентов, у которых не обнаруживается Фактор Виллебранда. Этот тип также редко встречается у собак.

Практически все случаи болезни фон Виллебрандта у собак относятся к типу 1. Только у немецких короткошерстных пойнтеров и немецких жесткошерстных пойнтеров был описан тип 2. Болезнь фон Виллебранда 3 типа была описана у скотч-терьеров, шелти, голландских койкерхондье и чесапик бэй ретриверов.

Общие клинические признаки включают кровотечения на слизистой, изначально проявляющиеся как кровоточивость десен, носовое кровотечение, а также гематурия. Также частыми проявлениями являются длительное кровотечение при купировании хвоста, купировании ушей или стрижке когтей. Фактор Виллебранда циркулирует как комплекс с фактором VIII-C, белком, дефицит которого наблюдается при гемофилии A. Активность фактора VIII-C обычно сильно снижена при тяжёлых формах болезни фон Виллебранда, однако в большинстве случаев болезни фон Виллебранда у собак снижение активности фактора VIII-C является лёгким или умеренным, и результаты тестов на коагуляцию, таких как активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) и активированное время свертывания (АВС), находятся в пределах нормы. Поскольку Фактор Виллебранда важен при регуляции адгезии тромбоцитов к субэндотелиальным поверхностям, клиническая картина является классической для симптомов, наблюдаемых при тромбоцитарных заболеваниях (кровоизлияния на слизистой или коже).

Собак, у которых проявляется геморрагический диатез при отсутствии аномалий скрининговых тестов на коагуляцию или тромбоцитопении, следует тестировать на болезнь фон Виллебранда.

Болезнь фон Виллебрандта у различных пород собак

Порода собак

Свободны от носительства

Носители

Больные собаки

Бернский зенненхунд

Доберман

Манчестер-терьер

Вельш-корги пемброк

Независимая ветеринарная лаборатория ПОИСК предлагает генетический тест на болезнь фон Виллебранда 1 типа.

1. Окончательный результат исследования: Тест будет однозначно классифицировать собак предрасположенных пород на носителей, больных и свободных от мутации животных.
2. Тест проводится однократно: В лаборатории проводится исследование мутации ДНК, каждая собака должна быть проверена только один раз в своей жизни.
3. Простота при отборе материала и отправке: просто сделать мазок с внутренней стороны щеки собаки с помощью цитощетки. Соскоб нужно повторить дважды, затем цитощетку направить в лабораторию с курьером или почтой.

Материал для исследования: буккальный эпителий, а также кровь, отобранная в пробирку с К3ЭДТА.

Тест предназначен для собак следующих пород: бернский зенненхунд, котон де тулеар (мадагаскарский бишон), доберман пинчер, дрентская куропаточная собака, немецкий пинчер, керри-блю-терьер, манчестерский терьер, папильон, вельш корги пемброк, пудель, стабихун.

Тест однозначно определяет собак вышеуказанных пород как больных, носителей и здоровых. Хотя у носителей и проявляется некоторое снижение количества фактора Виллебранда в плазме, этого недостаточно, чтобы у собаки развивалась характерная клиническая картина. Также следует отметить, что статус «больной», полученный в результате проведения данного теста, означает, что у животного присутствует две мутантные аллели, но само заболевание клинически проявляется не всегда. В случае болезни Виллебранда 1 типа «больные» животные очевидно имеют риск развития заболевания, но у них могут наблюдаться, а могут и не наблюдаться, тяжелые случаи кровотечений.

Бернский зенненхунд