Treponema pallido e sifilide. Diagnosi microscopica della microbiologia della sifilide Treponema pallidum

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Il treponema pallido (Treponema pallidum) è l'agente eziologico della sifilide. Questa malattia venerea è nota fin dall'antichità, ma il suo agente eziologico fu scoperto solo nel 1905 dagli scienziati austriaci E. Hoffman e F. Schaudin. Si chiamava spirocheta pallida (pallidum).

Avendo un corpo a spirale molto sottile, i treponemi pallidi penetrano facilmente attraverso le mucose e la pelle danneggiata nel corpo umano più spesso attraverso il contatto sessuale, anche in forma perversa, molto meno spesso per contatto o direttamente con il sangue. I treponemi pallidi colpiscono le mucose, la pelle e gli organi interni. Dopo un periodo di riproduzione, il sifiloma primario (ulcera "dura") si forma nel sito di introduzione dei patogeni della sifilide. Il decorso della malattia è ondulato e graduale.

Specifici dopo il corso manifesto scompaiono spontaneamente, per poi riapparire, cambiando colore. La durata del decorso ricorrente della malattia dura circa 2 anni ed è il segno più importante della sifilide precoce. La sifilide, priva di epitelio, contiene un gran numero di treponema pallido. Nel corso degli anni, l'infettività dei pazienti con sifilide diminuisce.

Il treponema pallido appartiene all'ordine Spirochaetales, famiglia Spirochaetaceae, genere Treponema. Le spirochete hanno una struttura e una morfologia uniche. Sono ampiamente distribuiti in natura. Questi sono batteri sottili, piuttosto lunghi, flessibili e mobili. Quattro sottospecie di Treponema pallidum sono patogene per l'uomo:

  • Treponema pallidum pallidum provoca la sifilide.
  • Treponema pallidum pertenue è la causa della framboesia (sifilide non venerea, granuloma tropicale).
  • Treponema carateum causa la malattia della pinta.
  • Treponema pallidum endemicum è la causa della sifilide endemica (sifilide non venerea dell'infanzia, bejel).

Le malattie causate da treponemi patogeni hanno un decorso ondulatorio cronico. La sifilide è onnipresente, mentre pinta, framboesia e bejel si trovano solo nei paesi tropicali e hanno un decorso benigno.

Riso. 1. Vista del treponema pallido al microscopio elettronico.

Stabilità dei patogeni nell'ambiente

  • Il treponema pallido è resistente alle basse temperature. Può resistere al congelamento fino a un anno. I ceppi patogeni di agenti patogeni vengono conservati in un ambiente privo di ossigeno a basse temperature (20 - 70 ° C) o essiccati da uno stato congelato.
  • I treponemi mantengono la loro virulenza sugli oggetti ambientali fino a quando non si seccano. A temperature fino a 42 ° C, l'attività dei batteri aumenta prima e poi muoiono. Riscaldati a 60°C i treponemi mantengono la loro attività per 15 minuti. Per più di 3 giorni, gli agenti causali della sifilide conservano le loro proprietà patogene nel materiale cadaverico.
  • Al di fuori del corpo umano, i batteri muoiono rapidamente. Ad una temperatura di 100°C, muoiono all'istante. I treponemi pallidi sono sensibili ai disinfettanti e ad alcuni antibiotici.

Riso. 2. Viene utilizzata una reazione di immunofluorescenza per rilevare i batteri.

Gli agenti causali della sifilide nel corpo del paziente

Durante questo periodo, i batteri si trovano nelle lesioni e nel fluido tissutale a forma di spirale e il paziente stesso diventa un distributore di infezione. I pazienti sono particolarmente contagiosi nel periodo secondario, il periodo della sifilide ricorrente. I periodi di remissione della malattia sono associati al fatto che la maggior parte del treponema si trova a livello intracellulare (nei fagociti). In questo stato, i batteri non sono in grado di moltiplicarsi e diffondersi in tutto il corpo.

I treponemi pallidi sono in grado di nascondersi dagli effetti negativi dei fattori ambientali, trasformandosi in forme L e cisti, il che spiega il decorso cronico della malattia. Nelle fasi successive della sifilide, l'infettività dei pazienti è minima. Il numero totale di agenti patogeni è ridotto. La risposta del corpo all'infezione è indebolita.

Riso. 3. Microscopia di uno striscio preparato mediante argentatura. Gli agenti causali della sifilide sono di colore scuro. Le cellule dei tessuti infetti sono colorate di giallo.

Caratteristica dell'eccitatore: struttura esterna

Il treponema pallido in apparenza ricorda un cavatappi. Ha 8-14 riccioli di uguali dimensioni, la cui altezza diminuisce alle estremità. La forma a spirale del patogeno persiste in tutti i casi e in qualsiasi condizione. La lunghezza del microrganismo va da 5 a 15 micron, la larghezza è di 0,2 micron.

Riso. 4. Nella foto, l'agente eziologico della sifilide Treponema pallidum (vista al microscopio elettronico).

Formazioni "fine".

Le estremità della maggior parte dei treponemi sono appuntite. Hanno escrescenze a forma di disco ( blefaroplasti) con allegato ad essi per un importo di 10 - 11 fibrille.

Le fibrille si estendono lungo il corpo del treponema e lo avvolgono, conferendo ai batteri una forma a spirale. Da ciascuna estremità partono 2 fasci indipendenti di fibrille. Si trovano sotto la parete esterna, passando sopra la membrana citoplasmatica. Le fibrille sono state trovate anche sotto la membrana citoplasmatica. Sono più sottili e più numerosi. Le fibrille del fascio esterno forniscono movimento al treponema, sono spesse il doppio. Sono lunghi tubi costituiti dalla proteina flagelina, che è abbastanza resistente all'azione di numerosi enzimi. Le fibrille dello strato interno svolgono il ruolo di un'impalcatura.

Ad un'estremità del batterio ci sono due formazioni arrotondate ( corpo spugnoso). Fornisce la penetrazione attiva dei batteri nelle cellule ospiti.

I treponemi pallidi possono eseguire movimenti traslazionali (avanti e indietro), rotazionali, di flessione, ondulatori (convulsivi) ed elicoidali.

Riso. 5. La foto mostra un pallido treponema (forma culturale).

Riso. 6. La foto mostra treponemi pallidi con un ingrandimento di 3000 volte (microscopia in campo oscuro). Questo tipo di studio consente di registrare la forma e il movimento dei batteri viventi.

La struttura interna del treponema pallido (ultrastruttura)

"caso" di mucoproteine

Il corpo del batterio è circondato da una sostanza mucosa priva di struttura (microcapsula). Questa sostanza mucopolisaccaridica protegge i treponemi dai fagociti e dagli anticorpi. La sostanza capsulare è prodotta dal treponema stesso.

membrana citoplasmatica

La membrana citoplasmatica dei batteri svolge una serie di funzioni vitali: trasporto, protezione, è il sito di localizzazione di antigeni ed enzimi, partecipa attivamente alla divisione cellulare, alla L-trasformazione e alla sporulazione. La membrana citoplasmatica ha una struttura a tre strati. Il suo strato interno forma numerose escrescenze nel cilindro protoplasmatico, grazie al quale viene effettuato un trasferimento attivo di nutrienti dall'esterno. L'attività vitale dei batteri dipende dallo stato della membrana citoplasmatica.

Cilindro protoplasmatico

Il cilindro protoplasmatico si trova sotto la parete esterna. La struttura del citoplasma dei treponemi pallidi è finemente granulare. I granuli di ribosomi e molte strutture lamellari sono immersi nello ialoplasma trasparente. I ribosomi forniscono la sintesi proteica in una cellula batterica. Il citoplasma contiene anche un nucleotide che non ha una membrana restrittiva. Si estende lungo l'intera lunghezza del cilindro protoplasmatico.

mesosomi

I mesosomi sono derivati ​​della membrana citoplasmatica. Occupano la metà o l'intero asse del diametro del treponema. I mesosomi forniscono energia alla cellula batterica nei punti di maggiore crescita durante la sporulazione e la divisione. La loro funzione è simile ai mitocondri. I mesosomi differiscono nella natura della struttura, ma il loro numero è sempre molto elevato.

Riso. 7. Ultrastruttura del treponema pallido. Guaina mucoproteica in cima, poi una parete cellulare a tre strati, all'interno - una membrana citoplasmatica e un cilindro con un nucleotide, mesosomi, ribosomi e altre inclusioni. La foto mostra chiaramente le fibrille che corrono lungo il corpo del batterio.

Riproduzione di treponema pallido

La riproduzione degli agenti causali della sifilide avviene per divisione trasversale. La divisione cellulare batterica dura circa 33 ore e avviene solo a una temperatura di circa 37 °C. A volte i treponemi pallidi sono divisi in più parti contemporaneamente.

Riso. 8. La foto mostra treponema pallido.

Forme di esistenza di agenti causativi di sifilide

In condizioni sfavorevoli (esposizione ad antibiotici, anticorpi, fattori ambientali fisici e chimici, esaurimento del mezzo nutritivo), i batteri si trasformano in forme L, si disintegrano in grani, formano cisti e forme coccali. In tali forme, il treponema può esistere a lungo nel corpo del paziente e quindi invertire, causando una ricaduta della sifilide.

I treponemi pallidi a forma di L sono in grado di penetrare nel corpo umano anche in assenza di danni alla pelle e alle mucose, passare attraverso i filtri utilizzati nel trattamento della pelle.

In caso di infezione da cisti batteriche, vi è un allungamento del periodo di incubazione, l'emergere di forme latenti della malattia e lo sviluppo di resistenza ai farmaci antibatterici.

cisti

Condizioni di esistenza sfavorevoli portano al fatto che il treponema pallido si trasforma in una cisti. Si arriccia in una palla e attorno ad essa si forma un guscio trasparente senza struttura (guaina), a volte costituito da più strati. Tutti gli elementi morfologici dell'agente patogeno sono preservati. L'esistenza di cisti dormienti spiega l'esistenza di forme nascoste della malattia, un decorso lungo e lento e la resistenza ai farmaci antibatterici. Con il progredire della malattia, il numero di cisti aumenta. I ricercatori hanno dimostrato che la formazione di cisti è una reazione protettiva che garantisce la sopravvivenza e la riproduzione dei patogeni della sifilide.

Forme a L

I treponemi vengono convertiti in forme L sotto l'influenza di una serie di fattori. I treponemi acquisiscono una forma sferica, a causa del blocco della sintesi, la parete cellulare si assottiglia, la riproduzione si interrompe, ma la crescita e l'intensità della sintesi del DNA rimangono. Nel citoplasma delle forme L di batteri viene determinato un nucleotide gigante, all'interno del quale è presente un gran numero di filamenti contenenti DNA.

  • Le forme a spirale di treponema pallido predominano nelle prime fasi della sifilide. Durante questo periodo, i batteri si trovano in modo extracellulare, dividendosi intensamente, il che li rende vulnerabili all'azione degli antibiotici.
  • Nel periodo secondario della sifilide ricorrente, i treponemi si trovano non solo extracellularmente, ma anche all'interno dei fagociti, si trova un gran numero di cisti più resistenti al trattamento.
  • Nelle fasi successive della malattia, vi è una significativa diminuzione delle forme a spirale del treponema, un aumento del numero di cisti e forme a L. Il numero totale di agenti patogeni è ridotto. La reazione del corpo è indebolita.

Riso. 9. I batteri sono chiaramente visibili negli strisci preparati mediante impregnazione d'argento (tecnica Levaditi).

Treponemi pallidi al microscopio

Il citoplasma dei patogeni della sifilide contiene un gran numero di componenti idrofobici, motivo per cui sono scarsamente colorati con coloranti all'anilina. Secondo il metodo Romanovsky-Giemsa, i batteri sono colorati di un rosa pallido, per il quale hanno ricevuto il nome di "treponema pallido".

  • I treponemi sono chiaramente visibili mediante microscopia a contrasto di fase (campo oscuro). In uno striscio appena preparato con agenti patogeni vivi in ​​un campo scuro, sono visibili batteri a forma di spirale che si curvano dolcemente. Dalle spirochete saprofitiche, che si trovano nella cavità orale e sulle mucose degli organi genitali, i treponemi pallidi si differenziano per l'uniformità dei riccioli, sono più sottili, eseguono movimenti ondulatori lisci e sono in grado di piegarsi ad angolo.
  • I batteri sono chiaramente visibili negli strisci preparati mediante impregnazione d'argento (tecnica Levaditi). I treponemi sono colorati di nero e sono chiaramente visibili sullo sfondo delle cellule colorate di giallo dei tessuti in esame. L'argento si deposita sulle cellule batteriche, aumentandone il diametro.
  • L'immunofluorescenza viene utilizzata per rilevare i batteri. I batteri in uno striscio trattato con siero luminescente brillano sotto i raggi ultravioletti di un microscopio a fluorescenza.

Riso. 10. La foto mostra il treponema pallido al microscopio: impregnazione d'argento (foto a sinistra), microscopia in campo oscuro (foto al centro), reazione di immunofluorescenza (foto a destra).

Proprietà culturali di agenti causativi di sifilide

I treponemi pallidi sono anaerobi obbligati: vivono e crescono in assenza di ossigeno molecolare. I batteri praticamente non crescono su mezzi nutritivi artificiali. Per la loro coltivazione vengono utilizzati terreni contenenti siero di cavallo e di coniglio, sui quali i treponemi pallidi crescono lentamente e perdono le loro proprietà virulente. La crescita avviene a una temperatura di 35 0 C. Le colonie di agenti causali della sifilide compaiono in 3-5 (su alcuni terreni in 7-9) giorni.

Riso. 11. Nella foto, la crescita delle colonie di pallido treponema.

Proprietà biochimiche del treponema pallido

Le proprietà biochimiche degli agenti causali della sifilide sono state poco studiate. Un certo numero di ceppi produce idrogeno solforato e indolo. Alcuni ceppi liquefanno la gelatina, altri liquefanno glucosio, saccarosio, galattosio e maltosio per formare acido. Alcuni ceppi decompongono solo il glucosio. Diversi ceppi di agenti patogeni sottopongono gli eritrociti umani all'emolisi.

Riso. 12. Nella foto ci sono treponemi pallidi. Visualizza in un microscopio elettronico.

ConferenzaN19. Spirochete (treponema, borrelia, leptospira).

Le spirochete sono batteri sottili, avvolti a spirale da poche a diverse centinaia di micrometri di lunghezza, mobili, gram-negativi, chemioorganotrofi. Esistono tre tipi principali di movimenti: rotazione rapida attorno all'asse longitudinale, flessione, cavatappi (elicoidale). I rappresentanti dei generi Treponema, Borrelia, Leptospira e Spirillum sono di importanza medica.

Genere Treponema .

Il genere è rappresentato da batteri a forma di spirale strettamente attorcigliati lunghi 5-20 µm. La specie patogena per l'uomo più nota è T. pallidum (treponema pallido), la sottospecie T. pallidum pallidum è l'agente eziologico sifilide.

I treponemi patogeni si differenziano per la patogenicità per vari tipi di animali da laboratorio, la capacità di fermentare il mannitolo, utilizzare il lattato e formare metaboliti specifici.

"Lues Venerae" - "piaga dell'amore" - uno dei nomi della sifilide (lues).

Morfologia.

L'agente eziologico della sifilide ha una forma a spirale con riccioli della stessa altezza (più di 10). La natura della mobilità è costituita da movimenti elicoidali e di flessione fluidi (treponema - dal latino - un filo di flessione). Secondo Romanovsky - Giemsa è dipinta in un colore rosa pallido (pallidum - dal lat. - pallido). Facilmente identificabile mediante microscopia in campo oscuro e dopo impregnazione d'argento.

Il treponema pallido è estremamente esigente per le condizioni di coltivazione e non è in grado di crescere a lungo sui terreni nutritivi. Ha un tasso di riproduzione molto lento. In condizioni di laboratorio può essere coltivato sui conigli, infettandoli per via intratesticolare (orchite con accumulo di treponema). Le proprietà biochimiche sono scarsamente studiate a causa di problemi di coltivazione e non sono praticamente utilizzate per caratterizzare T.pallidum.

caratteristiche antigeniche.

I treponemi hanno antigeni cross-reattivi con altre spirochete (borrelia, leptospira). A causa della presenza di fosfolipidi (cardiolipina, ecc.) Nelle pareti cellulari dei treponemi pallidi, simili alle cellule dei mammiferi, in risposta a questi antigeni, il corpo produce non solo specifico per l'agente eziologico della sifilide, ma anche cross-reattivo a cardiolipina e altri fosfolipidi dei tessuti umani e dei cosiddetti animali Wassermann anticorpi. Sono rilevati in CSC con antigene cardiolipina (da cuori di animali). Anticorpi specifici contro l'agente eziologico della sifilide vengono rilevati in RNIF e immunoblot.

L'antigene Wasserman è un fosfolipide che fa parte delle membrane mitocondriali (cardiolipina). Si ottiene dal miocardio bovino, un tessuto ricco di mitocondri. A causa della comunanza antigenica con i fosfolipidi tissutali, gli anticorpi anti-treponem cardiolipina reagiscono con la cardiolipina tissutale (mitocondriale). I veri autoanticorpi contro la cardiolipina tissutale si formano nella "sindrome antimitocondriale (antifosfolipidica)", causando reazioni positive di Wasserman (falso positivo - in relazione all'agente eziologico della sifilide) nelle collagenosi (lupus eritematoso sistemico, artrite reumatoide), lebbra e altre gravi infezioni associato a danno tissutale, con anemia emolitica, tossicodipendenza.

caratteristiche patogene.

Lo sviluppo della sifilide è determinato da due meccanismi principali: una tendenza alla generalizzazione (elevata invasività) e l'attivazione periodica di un agente patogeno che persiste a lungo nel corpo ("uscita da un'imboscata").

A causa dell'instabilità dell'agente patogeno nell'ambiente esterno, l'infezione avviene per contatto diretto (nella stragrande maggioranza dei casi, sessualmente). Penetrando attraverso le mucose e le lesioni cutanee minori, l'agente patogeno penetra rapidamente nei tessuti, si diffonde linfogenamente e poi ematogenamente (generalizzazione).

I primi segni della malattia ( sifilide primaria) avviene dopo un periodo di incubazione (in media da 3 a 4 settimane). Nel sito di introduzione (invasione primaria), l'agente patogeno si moltiplica e si verifica chancre- un nodulo denso, indolore, rossastro che si trasforma in un'ulcera. Allo stesso tempo, a seguito della penetrazione del treponema nei linfonodi, si sviluppa linfoadenite regionale e inoltre - poliadenite. La generalizzazione dell'infezione si verifica anche prima della comparsa di sifiloma e linfoadenite, ad es. la sifilide è una malattia sistemica fin dall'inizio.

Dopo che la clinica della sifilide primaria si è attenuata, dopo un po 'di tempo (da diverse settimane a diversi mesi), si verifica una ricaduta dell'infezione associata alla replicazione multiorgano dei treponemi ( sifilide secondaria). Ci sono lesioni della pelle e delle mucose (sifilidi secondarie, che contengono un gran numero di treponema), lesioni di organi interni, linfonodi, ossa, articolazioni e molti altri. Data la varietà delle lesioni, la sifilide secondaria è chiamata il "grande imbroglione".

Dopo la sifilide secondaria, alcuni pazienti sviluppano nuovamente la sifilide latente (l'agente patogeno rimane sottoterra per anni), che nella metà dei portatori può trasformarsi in sifilide terziaria. È caratterizzato dalla formazione di focolai di infiammazione granulomatosa - gomma contenente poco treponema (praticamente non contagioso). Il decadimento della gomma porta alla distruzione delle ossa e dei tessuti molli e al danneggiamento degli organi vitali. A differenza della sifilide primaria e secondaria, la sifilide terziaria è un processo cronico che non finisce mai da solo.

Poco si sa sui fattori di patogenicità del T. pallidum e sui meccanismi che gli consentono di eludere per lungo tempo la sorveglianza immunologica. È incoraggiante che questo patogeno mantenga un'elevata sensibilità agli antibiotici. La sifilide moderna risponde ancora bene al trattamento se il processo non raggiunge lesioni organiche irreversibili.

Diagnostica di laboratorio.

Nella sifilide primaria e secondaria, l'agente patogeno può essere rilevato nelle lesioni mediante microscopia. Più ottimale per il rilevamento del treponema pallido microscopia in campo oscuro e ad immunoluminescenza. Con il primo metodo è necessario escludere possibili artefatti (fili di fibrina, ad esempio), la presenza di treponemi saprofiti. T. rifrangente colonizza gli organi genitali esterni, è caratterizzato da elevata mobilità e assenza di movimenti di flessione. T. denticola colonizza la cavità orale, i suoi riccioli sono più corti e diretti ad un angolo più acuto. Si trova anche nella cavità orale umana T. vincentii, che in associazione con altri microrganismi può causare angina necrotica ulcerosa.

Oltre all'agente eziologico della sifilide, esistono treponemi di altre sottospecie di T. pallidum, geneticamente e antigenicamente molto simili, che provocano lesioni umane in paesi con clima caldo ( framboesia, bergel, pinta).

Se colorato secondo Romanovsky - Giemsa, T.pallidum è colorato di rosa, i treponemi non patogeni sono blu o viola, T.refringens è colorato di rosso con fucsina. La diagnostica fluorescente è ampiamente utilizzata per rilevare il treponema in vari materiali clinici. Tra i metodi per rilevare l'agente patogeno, la PCR ha la massima sensibilità e sufficiente specificità.

Metodi diagnostici di base - sierologico, cioè. rilevamento di anticorpi sierici. Applicare RSK con cardiolipina e antigene treponemico, test di flocculazione (test di microagglutinazione per anticorpi cardiolipina), RNGA. Test più specifici e sensibili sono i test basati su immunofluorescenza indiretta (RIF), reazione di immobilizzazione del treponema pallido, ELISA basato su proteine ​​ricombinanti del treponema.

Nella sierodiagnosi della sifilide è necessario tener conto della sieronegatività della sifilide primaria nelle prime settimane di malattia. È necessaria una combinazione di metodi basati sulla rilevazione di anticorpi contro gli antigeni della cardiolipina e del treponema. I test della cardiolipina diventano rapidamente sieronegativi dopo l'eliminazione del patogeno (dopo alcuni mesi), gli anticorpi antitreponemici persistono molto più a lungo. Essenziale per determinare l'attività del processo è la definizione antitreponemicoIgM- anticorpi(quando viene rilevata la sifilide congenita, soprattutto perché gli anticorpi IgM non attraversano la placenta dalla madre al feto; nello studio del liquido cerebrospinale - per la diagnosi di neurosifilide, ecc.).

Trattamento.

Penicilline depositate più spesso usate con azione prolungata, con intolleranza - macrolidi, tetracicline, cefalosporine.

Non esiste una prevenzione specifica.

Morfologia e classificazione.

Spirale, con fino a 10 grandi riccioli di forma irregolare, batteri gram-negativi con una natura rotazionale-traslazionale dei movimenti. Anaerobi, che spesso richiedono terreni di coltura complessi.

Borrelia patogeno per l'uomo sono agenti patogeni febbri ricorrenti (febbri ricorrenti) o borreliosi. B. ricorrenze trasmesso all'uomo dai pidocchi, provoca febbre epidemica o schifosa ricorrente. Le restanti borreliosi umane sono divise in due gruppi indipendenti: la borreliosi trasmessa da zecche argas (AKB), causata da più di 12 specie di borreliosi, e la borreliosi trasmessa da zecche ixodid (IBD), causata da B.burgdorferi sensu stricto, B.garinii , B.afzelii e alcuni altri.

Gli AKB sono associati agli acari argas del genere Ornithodorus, che vivono nelle regioni tropicali e subtropicali dell'Africa, dell'Asia e dell'America, e sono caratterizzati da ricorrenti attacchi di febbre (come nella malaria). L'ITB è causato da zecche del genere Ixodes (gruppo I.ricinus / I.persulcatus), distribuite principalmente nella zona forestale dell'Eurasia e dell'America.

beni culturali.

I rappresentanti di questo genere sono esigenti per le condizioni di coltivazione, in particolare Borrelia del gruppo IKB. Richiedono condizioni anaerobiche facoltative, temperatura più 33 gradi Celsius, terreni speciali (BSK-2) contenenti terreno 199, glucosio, albumina, cisteina, siero di coniglio, gelatina e altri componenti.

proprietà antigeniche.

Hanno antigeni cross-reattivi con altre spirochete, antigeni specifici per genere e specie. Allocare antigeni flagellina H- (flagellati) (hanno bassa specificità) e antigeni proteici di superficie (OspA, OspC, più specifici, utilizzati per l'identificazione interspecifica e intraspecifica).

La patogenesi delle lesioni.

Dopo aver succhiato la zecca, la Borrelia con la saliva entra nel macroorganismo, si moltiplica alla porta d'ingresso dell'infezione, interessando la cute (eritema) e i linfonodi più vicini (fase adattamento primario). Superate le barriere cutanee e linfatiche, la Borrelia entra nel flusso sanguigno, provocando la spirochetemia, manifestata da una sindrome tossica generale (stadio diffusione primaria). Con il progredire del processo, la Borrelia penetra nelle barriere del tessuto ematoso (anche attraverso la barriera emato-encefalica) e causa danni a vari organi e sistemi. In alcuni casi, l'infezione diventa cronica, causando danni al sistema nervoso e cardiovascolare, al sistema muscolo-scheletrico, lesioni cutanee secondarie, ecc. manifestazioni neurologiche, per esempio).

Epidemiologia.

L'ITB è un'infezione focale naturale trasmissibile obbligata, distribuita principalmente nella zona a clima temperato dell'emisfero settentrionale, nella zona del paesaggio forestale e associata alla suzione delle zecche del genere Ixodes. I focolai ITB sono spesso associati a focolai di encefalite da zecche, poiché hanno gli stessi vettori in Eurasia: zecche I. reticulatus (zecca della taiga) e I. ricinus (zecca della foresta europea).

Diagnostica di laboratorio.

Borrelia può essere isolata utilizzando il terreno BSK2 in pazienti da focolai di lesioni cutanee, da sangue e liquido cerebrospinale (nelle forme meningee), nello studio di portatori (inclusi quelli prelevati dall'uomo) e di ospiti a sangue caldo (il più alto tasso di inoculazione è dalla vescica) in focolai naturali.

La Borrelia può essere rilevata nelle zecche ixodidi mediante microscopia ottica (colorazione Romanovsky-Giemsa), microscopia in campo oscuro e fluorescente e PCR.

Il metodo principale della diagnostica sierologica è la reazione dell'immunofluorescenza indiretta (RNIF) con l'antigene corpuscolare di B.afzelii, che consente di rilevare gli anticorpi contro la Borrelia del gruppo IKB.

Trattamento.

Applicare la terapia preventiva (con risultati positivi dello studio della zecca succhiata) e il trattamento di pazienti con ITB con tetracicline, penicilline e cefalosporine. Non sono state sviluppate misure preventive specifiche.

Genere Leptospira

Morfologia.

Proprietà culturali e biochimiche.

Chemoorganotrofi, aerobi. I Leptospira sono tipici idrofili, persistono a lungo in substrati umidi, acqua e terreno umido. La temperatura ottimale va da più 28 a 30 gradi Celsius, pH 7,2 - 7,4. Coltivato principalmente su terreno liquido con l'aggiunta di siero di sangue di coniglio (tersky medium).

proprietà antigeniche.

Le leptospira patogene sulla base delle proprietà antigeniche sono suddivise in sierogruppi e sierotipi.

Caratteristiche ecologiche - epidemiologiche.

I principali serbatoi di infezione sono animali selvaggi, principalmente roditori e insettivori (focolai naturali, spesso associati ad habitat vicino all'acqua), così come animali da fattoria e domestici(suini, bovini, cani). Negli animali, la leptospira persiste a lungo nei reni e viene espulsa a lungo nell'ambiente esterno con l'urina. Una persona viene infettata in focolai naturali (più spesso durante i lavori agricoli) e in focolai domestici (più spesso focolai di balneazione o casi di leptospirosi causati professionalmente). Ratti e cani grigi svolgono un ruolo significativo nell'infezione. Esistono connessioni tra alcune leptospire serovar e alcune specie animali (ad esempio, L.canicola - cani).

La patogenesi delle lesioni.

La leptospira entra nel corpo attraverso le mucose o il danno (microtrauma) della pelle. La leptospira patogena, a causa della mobilità attiva, supera le barriere protettive, penetra nel sangue (leptospiremia) ed entra in vari organi, principalmente reni e fegato. Di particolare importanza sono lesioni endoteliali capillari con emorragie di varia gravità fino alla sindrome emorragica, danno al fegato con lo sviluppo di ittero associato a danni agli epatociti ed emolisi dei globuli rossi, danno ai reni, principalmente l'epitelio dei tubuli renali, sostanza corticale e sottocorticale con sviluppo di insufficienza renale (anuria, uremia), manifestazioni meningee.

Diagnostica di laboratorio.

Il metodo principale della diagnostica microscopica è la microscopia in campo oscuro.

L'isolamento dell'agente patogeno viene effettuato mediante colture sul terreno Tersky, saggio biologico su criceti dorati. Esaminare l'urina, il sangue, il liquido cerebrospinale, lo strato corticale del rene.

Il principale metodo di diagnostica sierologica è la reazione di agglutinazione-lisi (RAL) con un set di colture di Leptospira dei principali sierogruppi. Il metodo è specifico, ma richiede tempo, poiché è necessario mantenere un set diagnostico di leptospire, agglutinare i sieri studiati con leptospire di tutti i principali sierogruppi, seguiti dalla microscopia in campo oscuro. Con un risultato positivo, si osserva la leptospira che si attacca sotto forma di ragni o palline, seguita dalla lisi. Attualmente, l'ELISA è utilizzato anche per la sierodiagnosi.

Trattamento.

Vengono utilizzati antibiotici (penicilline, tetracicline).

Il treponema è un genere di batteri che unisce numerose specie, di cui la più comune è l'agente eziologico della sifilide - treponema pallidum (treponema pallidum, treponema pallido). Questo genere comprende anche framboesia e pinte. Treponema pallidum è un batterio a forma di spirale della famiglia Spirochaetiaceae (spirochete) che provoca una malattia infettiva a trasmissione sessuale -. La patologia è caratterizzata da un decorso ondulatorio e si manifesta con una clinica caratteristica. L'infezione si verifica principalmente attraverso il contatto sessuale, a causa del quale la sifilide è una IST.

Attualmente, nel mondo è registrato un numero enorme di malattie veneree, che rappresentano una vera minaccia per la vita umana. Treponema pallidum è un microbo pericoloso che causa una malattia sistemica che colpisce la pelle e gli organi interni. Nel sito dell'introduzione della spirocheta si forma un focus patologico primario -. Quindi compaiono eruzioni cutanee sifilitiche sulla pelle, aumentano i linfonodi regionali. In assenza di una terapia adeguata, gli organi interni sono interessati, si sviluppano cambiamenti irreversibili e la morte è possibile.

Treponema pallido

Morfologia

Treponema pallidum è un microrganismo gram-negativo che ha la forma di una sottile spirale, attorcigliata in 8-12 piccoli riccioli. Treponema pallidum ha preso il nome dalla capacità di non percepire i coloranti di laboratorio convenzionali.

La spirocheta è un anaerobio stretto che cresce bene in ambiente anossico. Ma nonostante ciò, la vitalità dei batteri rimane sugli oggetti domestici circostanti per 3 o più giorni. Il treponema ha flagelli e fibrille. Grazie a loro e alle loro stesse contrazioni cellulari, il batterio esegue movimenti traslazionali, rotazionali, di flessione, ondulatori, elicoidali e contrattili. Penetra rapidamente nelle cellule viventi e si moltiplica rapidamente in esse per divisione trasversale.

Il treponema pallido ha una parete cellulare a tre strati, citoplasma e organelli: ribosomi, mesosomi, vacuoli. I ribosomi sintetizzano le proteine ​​e i mesosomi forniscono la respirazione e il metabolismo. Gli enzimi e gli antigeni sono contenuti nella membrana citoplasmatica. Il corpo del batterio è ricoperto da una capsula mucosa priva di struttura che svolge una funzione protettiva.

Proprietà fisiche

I microbi sono resistenti alle basse temperature e sensibili a quelle alte. Quando riscaldati, muoiono entro 20 minuti, una volta essiccati, entro 15 minuti e quando bolliti, all'istante. Antisettici e disinfettanti distruggono rapidamente il treponema pallido. L'effetto distruttivo sul batterio è esercitato da: ultravioletti, luce, alcool, alcali, aceto, arsenico, mercurio, disinfettanti contenenti cloro. Treponema pallidum è resistente ad alcuni antibiotici.

Il treponema pallido manifesta le sue proprietà patogene in un ambiente umido e caldo. Nel corpo umano, il luogo preferito della riproduzione sono i linfonodi. Nella fase della sifilide secondaria, i microbi si concentrano nel sangue e mostrano le loro proprietà patogene.

beni culturali

Il Treponema pallidum non cresce su terreni nutritivi artificiali, in colture cellulari ed embrioni di pollo. Viene coltivato nei testicoli di coniglio. In queste cellule il microbo cresce e si moltiplica bene, conservando completamente le sue proprietà e provocando orchite nell'animale.

Esistono mezzi di coltura arricchiti progettati per isolare una cultura pura. I microbi crescono su di loro sotto uno spesso strato di olio di vaselina. In questo modo si ottengono gli anticorpi necessari per l'instaurazione di specifiche reazioni alla sifilide.

I treponemi crescono su agar sangue o siero in un ambiente anossico. Allo stesso tempo, perdono le loro proprietà patogene, ma mantengono le loro proprietà antigeniche. I treponemi patogeni sono in grado di fermentare il mannitolo, utilizzare il lattato e formare metaboliti specifici.

patogenicità

Fattori e componenti di patogenicità e virulenza dei batteri includono:

  1. Proteine ​​di adesione che assicurano la fissazione del microbo sulla cellula ospite,
  2. Miofibrille, che promuovono la penetrazione profonda nel corpo e la migrazione dei batteri nel corpo ospite,
  3. Formazione di forme L,
  4. Lipopolisaccaridi della membrana esterna,
  5. Frammenti di una cellula patogena che penetrano in profondità nei tessuti,
  6. Capacità di penetrare nelle giunzioni intercellulari dell'endotelio,
  7. Variabilità antigenica.

Treponema pallidum ha un effetto tossico diretto sulla sintesi di macromolecole: DNA, RNA e proteine. Gli antigeni di T. pallidum sono utilizzati nel test di Wassermann per la sierodiagnosi della sifilide. In condizioni sfavorevoli, la spirocheta si trasforma in forme L, che forniscono la sua resistenza agli agenti antibatterici e agli anticorpi.

Epidemiologia

La sifilide è una grave antroponosi. L'infezione persiste solo nel corpo umano, che è il suo serbatoio naturale in natura. Le porte d'ingresso dell'infezione sono: epitelio squamoso o cilindrico danneggiato della cavità orale o degli organi genitali.

La diffusione di agenti infettivi si verifica:

  • Sessualmente durante il rapporto attraverso lo sperma,
  • Modo domestico attraverso biancheria, prodotti per l'igiene, accessori cosmetici, con un bacio,
  • Attraverso il percorso verticale da una madre infetta al suo bambino durante il parto, così come attraverso il latte durante l'allattamento,
  • Via transplacentare nella tarda gravidanza
  • Ematogeno per trasfusione di sangue diretta, durante le operazioni, quando si utilizza una comune siringa per tossicodipendenti.

Il rischio di infezione è aumentato tra gli operatori sanitari: dentisti, cosmetologi. L'infezione si verifica durante le manipolazioni mediche e le procedure che danneggiano la pelle. Le persone che sono sessualmente promiscue, hanno diversi partner sessuali e trascurano i metodi contraccettivi di barriera vengono infettate dal treponema pallidum. Affinché si verifichi l'infezione, il paziente deve avere molti batteri nel segreto e il partner deve avere lesioni sulla mucosa.

le prime manifestazioni della malattia

Il paziente è più contagioso durante i periodi di sifilide primaria e secondaria, quando i primi segni della malattia compaiono sulla pelle e sulla mucosa genitale. In questo momento, molte spirochete vengono rilasciate nell'ambiente.

Attualmente, un gran numero di pazienti è registrato con ulcere extragenitali localizzate sulla mucosa della bocca, faringe, ano. Hanno eruzioni cutanee localizzate sul viso, sifilide - sui palmi e sulle piante dei piedi. Il periodo terziario della sifilide si è recentemente sviluppato in casi molto rari ed è quasi asintomatico.

Sintomi

L'incubazione è caratterizzata dalla migrazione dei batteri attraverso i vasi linfatici e sanguigni e la loro riproduzione attiva nei linfonodi. La durata del periodo va da 3 settimane a 3 mesi.

La sifilide congenita si sviluppa a seguito dell'infezione intrauterina del feto. Questa grave patologia si manifesta con una caratteristica triade di sintomi in un bambino: sordità congenita, cheratite, denti di Hutchinson.

Diagnostica

La diagnosi di sifilide comprende l'interrogatorio e l'esame del paziente, la raccolta di informazioni anamnestiche, nonché studi clinici, che svolgono un ruolo importante nell'individuazione e nella diagnosi del treponema pallidum.

    • Esame microscopico del biomateriale. La batterioscopia di un'impronta di striscio di un sifiloma o di una biopsia di un linfonodo viene eseguita nelle prime 4 settimane della malattia. Per ottenere uno striscio di alta qualità, la superficie dell'erosione e delle ulcere viene trattata con soluzione salina, viene eseguita una raschiatura e dal materiale risultante viene preparata una preparazione per la microscopia. Lo striscio è macchiato secondo Romanovsky-Giemsa. Treponema ha un colore rosa pallido. I microbi vivi in ​​uno striscio non colorato e non fissato non sono visibili al microscopio ottico. Per rilevarli, viene utilizzata la microscopia a campo oscuro oa contrasto di fase. Per la microscopia in campo oscuro, il materiale viene prelevato da un'ulcera sifilitica ed esaminato in un apparato speciale. Il batterio ha la capacità di rifrangere la luce: al microscopio sembra una striscia bianca a spirale. La microscopia a fluorescenza viene utilizzata anche per rilevare il treponema in vari materiali clinici.

Trattamento

La sifilide è curata da un dermatovenereologo. Seleziona la terapia individualmente, tenendo conto dello stadio, della clinica della malattia e delle caratteristiche del paziente. Il trattamento completo contribuisce al completo recupero, che deve essere confermato dal laboratorio.

Il trattamento della sifilide è etiotropico, finalizzato alla distruzione dell'agente patogeno - treponema pallidum. Ai pazienti vengono prescritte grandi dosi di antibiotici a cui questo microbo è sensibile. Di solito vengono utilizzate penicilline "Benzylpenicillin", tetracicline "Doxycycline", macrolidi "Clarithromycin", "Sumamed", cefalosporine "Cefazolin", fluorochinoloni "Ciprofloxacin". La terapia antibatterica viene continuata per 2 mesi. Vengono curate anche le donne incinte.

Immunostimolazione, terapia vitaminica, fisioterapia completano il trattamento etiotropico e aiutano i pazienti a riprendersi dalla malattia. La terapia preventiva viene effettuata al partner sessuale e alle persone che sono state in contatto con il paziente.

Video: dermatovenereologo sul trattamento della sifilide

Prevenzione

Le misure preventive comprendono l'igiene personale, l'uso di biancheria e stoviglie separate, cosmetici individuali. Si raccomanda immediatamente dopo un rapporto non protetto di trattare i genitali o altre parti del corpo con cui è avvenuto il contatto con una soluzione di clorexidina o albucide. Questi fondi devono essere conservati nel kit di pronto soccorso.

A scopo preventivo, esaminare:

  1. Donatori
  2. donne incinte,
  3. Dipendenti di asili nido, scuole, istituti di ristorazione e medici,
  4. Pazienti ricoverati in ospedale.

La moderna terapia antimicrobica consente di eliminare la patologia e rende favorevole la prognosi della malattia. Solo un dermatovenereologo potrà scegliere il trattamento giusto e sufficiente per lo stadio della malattia. L'automedicazione della sifilide è severamente vietata. La patologia non completamente curata può diventare cronica. Un tale paziente è pericoloso per coloro che lo circondano.

La sifilide è una malattia sociale, il cui trattamento deve essere affrontato in modo serio e responsabile.

Video: la sifilide nel programma Salute

Caratteristiche generali delle spirochete.

Spirochetosi - Questo è un gruppo di malattie infettive causate da batteri a spirale, caratterizzate da intossicazione generale e sviluppo ciclico delle specie.

Tassonomia:

Ordine: Spirochaetales (dal greco speira - ricciolo, chaite - capelli)

Famiglia: Spirochaetaceae, Leptospiraceae

Genere: Spirochaeta Leptospira

Morfologia: microrganismi lunghi, sottili, ricurvi a spirale, dimensioni 0,1-0,3x5-250 micron. La struttura centrale è il cilindro protoplasmatico, che contiene il citoplasma, il nucleoide, i ribosomi 70 S e gli enzimi, circondato da una membrana citoplasmatica e da una parete cellulare. Il cilindro protoplasmatico ha una forma elicoidale permanente dovuta al peptidoglicano, formando vortici primari. Il loro numero, tipo, passo, angolo di inclinazione varia nelle diverse specie. Riccioli secondari derivanti dalla curvatura di tutto il corpo. Un flagello periplasmatico (flagello) si trova attorno al cilindro citoplasmatico a spirale, un'estremità di esso è attaccata a uno dei poli del cilindro protoplasmatico e l'altra a quest'ultimo approssimativamente nel mezzo della cellula, il numero di flagelli è da 2-100 (una metà è attaccata a un palo e l'altra all'altro palo). I flagelli periplasmatici si avvolgono a spirale attorno al cilindro protoplasmatico, formando un filo assiale, sopra il quale è presente una membrana esterna multistrato (il guscio esterno della spirocheta); il flagello si trova tra esso e il cilindro (flagello periplasmico o endoflagello).

Differenze dall'enzoflagella:

    avvolgere costantemente il corpo cellulare;

    completamente situato all'interno della cella;

    si riducono per rotazione intorno al loro asse, traslazionale e flessionale;

    mantenere la mobilità in un mezzo con una viscosità relativamente elevata.

Le spore e le capsule non si formano. In condizioni avverse, formano cisti a seguito del ripiegamento in una palla.

Proprietà tintorie: scarsamente colorato con coloranti anime, ad eccezione di Borrelia, gram-negativo, usa il metodo di argentatura Morozov.

Beni culturali: esigente sui mezzi nutritivi, è necessario aggiungere proteine ​​\u200b\u200bnative, carboidrati, acidi grassi. Secondo il metodo di immagazzinamento dell'energia, si distinguono anaerobi, anaerobi facoltativi, microaerofili e aerobi. La temperatura ottimale per Leptospira e Borrelia è di 28-30 ?C.

Proprietà biochimiche : catalasi-, ureasi-, ossidasi-negativi, reazione di Voiges-Proskauer “-”, non riducono i nitrati.

Resistenza: dipende dal genere e dalla specie.

Ruolo in patologia .

Treponema sono gli agenti causali di sifilide, framboesia, pinta, bejel;

Borrelia– febbre epidemica ed endemica ricorrente da zecche, borreliosi di Lyme;

Leptospira- leptospirosi.

Segni generali di spirochetosi:

    flusso ciclico;

    rilevamento dell'agente patogeno nel sangue e nei tessuti;

    i principali metodi di diagnostica microbiologica: batterioscopici e sierologici.

2. Microbiologia della sifilide.

Sifilide - una malattia venerea infettiva cronica, caratterizzata da un decorso ondulatorio, alternando periodi di attività della manifestazione clinica della malattia a lunghi periodi di latenza.

Storia della scoperta.

L'agente eziologico della sifilide fu identificato nel 1905 da Shaudin e Hoffman e chiamato spirochete pallidum. Wasserman, insieme a Keisser e Brook, ha proposto un test sierologico per la diagnosi della sifilide.

Tassonomia.

Ordine Spirochaetales

Famiglia: Spirochaetaceae

Genere: Treponema

Specie: Treponema pallidum

Morfologia: batteri a forma di spirale di dimensioni 6-14x0,2-0,3 micron, il numero di riccioli primari va da 8 a 12, situati a uguale distanza l'uno dall'altro; tre flagelli periplasmatici si estendono dalle estremità della cellula. Non formano spore o capsule, ma nel corpo di animali da esperimento possono sintetizzare una natura mucopolisaccaridica di una guaina simile a una capsula. In condizioni avverse, possono trasformarsi in cisti, corpi sferici granulari e simili a cisti.

Proprietà tintorie: scarsamente macchiato con coloranti all'anilina, gram-negativi, secondo Romanovsky-Giemsa - in un colore leggermente rosa (pallidum - pallido), eseguire il metodo di argentatura secondo Morozov e contrasto negativo secondo Burri, lo studio più efficace in un buio microscopio a campo o a contrasto di fase.

beni culturali : anaerobi obbligati, chemoorganoeterotrofi, la temperatura ottimale è di 35°C, a temperature superiori a 40°C perdono la loro vitalità. Molto esigente sui mezzi nutritivi; è necessario aggiungere rene, tessuto cerebrale o liquido ascitico. I treponemi cresciuti su terreni nutritivi (ceppi "culturali") diventano più grossolani, più corti, polimorfici, perdono la loro immunogenicità e patogenicità. I treponemi crescono bene senza perdere le loro proprietà immunogeniche e patogene nei testicoli dei conigli, negli embrioni di pollo - ceppi "tessuti", che vengono utilizzati per isolare e studiare l'agente patogeno dai pazienti.

Proprietà biochimiche : inattivo, decompone glucosio, galattosio, saccarosio, maltosio, mannitolo con formazione di acido; formare indolo e idrogeno solforato, liquefare la gelatina; ridurre il nitrato d'argento ad argento metallico, che conferisce ai tessuti un colore nero o marrone scuro.

Struttura antigenica : complesse, proteine ​​della membrana esterna (termolabili, che collassano a 76-80 °C, polisaccaridi (termostabili); lipoproteine, che sono antigeni cross-reattivi comuni all'uomo e al bestiame, ad esempio l'antigene cardiolipina è un estratto di lipoproteine ​​dal cuore di un toro, è utilizzato nelle reazioni sierologiche nella diagnostica.

fattori di patogenicità :

a) tossine:

Endotossina (LPS della parete cellulare);

b) non sono stati rilevati enzimi di patogenicità;

c) componenti strutturali e chimici della cellula:

    motilità dovuta a flagelli;

    adesivi;

    proteine ​​della membrana esterna.

Resistenza: sensibili ai fattori ambientali, ai raggi UV, all'essiccamento, alle alte temperature (a 40°C per 1 ora perdono le loro proprietà patogene, a 48°C muoiono dopo 10 minuti); dez. le soluzioni nelle concentrazioni di lavoro hanno un effetto dannoso; resistono alle basse temperature (al freddo durano fino a 50 giorni, al freddo fino a 1 anno), nel sangue intero e nel siero a 4°C rimangono vitali per 24 ore; sensibile ai sali di metalli pesanti e agli antibiotici (penicillina, eritromicina, carbenicillina, ecc.)

Epidemiologia.

La fonte dell'infezione è una persona malata. Bacteriocarrier nella sifilide non accade.

Modo di trasmissione:

1) contatto: a) diretto; b) indiretto.

2) transplacentare (da madre a neonato);

3) trasfusione.

Cancelli d'ingresso: mucose dei genitali, cavità orale, ecc., Pelle con violazione dell'integrità.

Ruolo e patologie

Solo le persone si ammalano di sifilide. Sperimentalmente, puoi infettare scimmie, conigli, criceti. Nelle scimmie si forma un duro ciclo, nei conigli e nei criceti - un'infezione cronica generalizzata.

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