Анализ на определение группы крови RapidVet-H. Универсальная группа крови у собак. Чем можно заменить донорскую кровь для животных

В повседневную практику современных ветеринарных клиник прочно вошла и стала обычным делом процедура переливания крови - гемотрансфузия. Травмы, огнестрельные ранения, операционные и послеродовые кровотечения, тяжелые желудочно-кишечные кровотечения, отравления, последствия тяжело перенесенного пироплазмоза и множество других заболеваний, сопровождающихся анемией (малокровием) - все это состояния, которые без переливания крови могут закончиться летально. И до недавнего времени так оно и было. Став ежедневной рутинной процедурой, переливание крови спасло жизнь сотням животных. Но для того, чтобы, в случае необходимости, гемотрансфузия была проведена грамотно, без осложнений, связанных с переливанием несовместимой крови, каждый владелец собаки должен знать группу крови своего питомца.

Не секрет, что первое переливание крови в жизни собаки переносится легко в подавляющем большинстве случаев и не приводит к анафилактическим реакциям. Но, начиная со второго переливания, уже необходимо использовать донорскую кровь, совпадающую по основным, наиболее критичным факторам. Учитывая довольно широкое распространение гемотрансфузии на сегодняшний день, все чаще в клинику попадают животные, которые уже имеют в своем анамнезе переливания крови. А владельцам обязательно нужно помнить, что вторая и все последующие гемотрансфузии в жизни Вашего питомца уже будут небезопасны без определения группы крови.

Что же такое группа крови у собаки?

Начнем с того, что такое групповой антиген? Это вещество, а точнее - белок, который присутствует в крови данного организма (на поверхности каждого эритроцита), и который при попадании в другой организм воспринимается им как «чужой». При этом происходит иммунный ответ с выработкой антител. При повторном попадании «чужой» крови иммунный ответ настолько силен, что возникает прямая угроза здоровью и даже жизни пациента.

Группы крови людей и группы крови у собак - это не совсем одно и то же. У людей выделяют два основных (и несколько дополнительных, встречающихся редко) групповых антигена: А и В. Кроме того, у людей определяют еще резус-фактор, который тоже обладает антигенными свойствами, и который в крови человека либо есть, либо нет. Таким образом, у людей основных групп крови четыре: 0(I), А(II), В(III), АВ(IV), каждая из которых может быть резус-положительной или резус-отрицательной.

У собак резус-фактора нет, а групповых антигенов известно уже более десятка. Их фактическое число и роль в организме собаки, антигенные возможности и биологические свойства еще долго будут предметом изучения специалистов.

На сегодняшний день для известных групповых антигенов собак принято международное обозначение: DEA - Dog Erythrocyte Antigen. Отдельные антигены (или групповые факторы) обозначают цифрами: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5 и т.д.

ДЛЯ УСПЕШНОЙ ГЕМОТРАНСФУЗИИ ВАЖНО ЗНАТЬ ФАКТОР DEA 1.1 !

Именно DEA 1.1 обладает сильнейшими антигенными свойствами, так как способен вызывать мощные иммунные реакции. Остальные групповые факторы собак на практике не ведут, в случае несовместимости, к таким тяжелым клиническим осложнениям.

Наша лаборатория имеет возможность определять фактор DEA 1.1. Он или есть в крови собаки (собака DEA 1.1 - положительная), или его нет (DEA 1.1 - отрицательная). Согласно европейской статистике, около 45% собак являются DEA 1.1 - положительными, остальные - отрицательными.

Собаки, положительные по DEA 1.1, являются универсальными реципиентами , то есть им можно переливать кровь любой другой собаки, но в идеале, от собаки DEA 1.1 + (уточним, что собака-донор должна быть абсолютно здоровой, и не иметь в анамнезе переливаний крови). Собака DEA 1.1 + может быть донором только для такой же, DEA 1.1 - положительной собаки.

Собаки, отрицательные по DEA 1.1, являются универсальными донорами , то есть их кровь можно переливать другим собакам, а им самим только такую же, DEA 1.1 - отрицательную кровь. Но опять же, в идеале, переливать кровь лучше от положительной собаки - положительной и от отрицательной - отрицательной.

Что будет, если отрицательной собаке перелить положительную кровь? Изначально в крови такой собаки антител к фактору DEA 1.1 нет, поэтому первое переливание практически всегда проходит успешно, без клинически выраженных иммунных реакций. Но такая собака на всю жизнь остается чувствительной к данному, чужому для нее, веществу, так как в ее крови образовалась «армия» соответствующих антител. Повторное переливание крови, если оно проводится наугад, без учета группы крови, может оказаться для этой собаки смертельным. И, кроме того, если такая собака - сука, то владельцам следует избегать вязок с DEA 1.1 - положительными кобелями, ведь часть ее потомства окажется положительными. А так как антитела матери легко проникают через плацентарный барьер к плодам, а также содержатся в молозиве, новорожденные щенки будут страдать гемолитической анемией и могут погибнуть, возможна также внутриутробная гибель плодов.

Итак, в определении группы крови нуждается каждая собака! И то, какой у нее фактор DEA 1.1: положительный или отрицательный, должно быть указано в ветеринарном паспорте. Ответственные владельцы собак беспокоятся о будущих потребностях своего питомца заранее!

Владельцы собак, отрицательных по DEA 1.1, помните: ваша собака может стать настоящим героем-спасителем для чьего-то любимца, ведь она - универсальный донор!

George Lubas DVM Университет Пизы, Италия

Джордж Любас является доцентом по Сравнительной клинической гематологии Института специальной Патологии и Ветеринарной Клинической Медицины Университета Пизы, Италия.

Резюме

• Собаки редко обладают высоким титром естественно возникающих антител против эритроцитов.
• Реакции на первое переливание крови у собаки являются редкими.
• Доноры крови для собак должны по меньшей мере иметь негативную реакцию на DEA 1 антиген.
• Кошки с группой крови В встречаются редко, но они очень часто имеют высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену.
• Несовместимые трансфузии у кошек могут вызвать острые реакции.
• При трансфузиях у кошек очень важно определить группы крови и выполнить перекрестные пробы на совместимость.

Введение

Лечение переливанием крови в ветеринарии за последние годы пережило быстрый рост, особенно у домашних животных, и некоторые исследования документально подтвердили его пользу при ряде гематологических заболеваний. Много обзоров было опубликовано по смежным темам: таким как группы крови у собак и кошек, иммуногематологичсские характеристики как у собак, так и у кошек: показания к переливанию крови; этические и клинические исследования, касающиеся животных-доноров; производство и хранение препаратов крови (1,3, 4, 6, 7) .

Иммуногематологические особенности у собак

С тех пор как в 50-х годах были опубликованы первые исследования в этой области, у собак было определено несколько групп крови. Номенклатура групп крови отражает расхождение мнений нескольких авторов, участвовавших в этих исследованиях, и в настоящее время равнозначно применяются две различные классификации:

• DEA = Эритроцитарный Антиген Собаки (напр. DEA 1).
• Заглавная буква для системы и строчная отдельная буква для фактора (напр.. Са). Иногда прибавляется номер для подтипа (напр., Аа1).

Антигены различных групп крови распознаются специфическими антителами в результате прямых или непрямых реакции (т. с. антиглобулинового теста) агглютинации и гемолиза. Некоторые из этих реакций могут проходить только при определенных температурах (напр., 4°С, 25°С или 37°С). Распределение различных групп крови по породам не изучено в деталях, хотя и сообщалось, что грейхаунды имели очень низкую частоту проявления антигенов DEA 1.1 и 1.2 (2, 6, 9) (Таблица 1).

ТАБЛИЦА 1. Характеристики групп крови у собак

Выбранный метод; (+) = альтернативный метод; - = нет реакции.

Очень немногие группы крови определены как значимые для лечения трансфузией, хотя группы DEA 1.1, 1.2 и 7 являются наиболее распространенными антигенными факторами. У собак, как признано, естественно возникающие антитела являются очень редкими и, если они присутствуют в сыворотке, то в низких титрах или вступают в реакцию при температурах, отличных от температуры тела. На самом деле только около 15% собак демонстрируют естественно возникающие антитела к DEA 3, 4, 5 и 7. Появление таких естественно возникающих антител не следует путать с приобретенными антителами к группам крови. Первые нс связаны с каким-либо проявлением иммуностимуляции, в то время как при последних имеется мощная иммунная реакция, вызванная, например, переливанием несовместимой крови (2,6,9).

Именно вследствие этих иммуногематологических особенностей крайне редко встречается реакция на первую трансфузию при переливании собаке несовместимой крови (2,3,6,9).

Иммуногематологические особенности у кошек

Главная группа крови у кошек обозначается как АВ и состоит из трех типов крови. Ее серологические и антигенные характеристики показаны в Таблице 2 . Недавно была определена биохимическая структура групповых антигенов кошачьей крови. Они представляют собой гликолипиды и гликопротеины, которые отличаются компонентом нейраминовой кислоты (6-8).

ТАБЛИЦА 2. Характеристики системы группы крови АВ у кошки (2, 3, 7, 8)

Группа крови (фенотип) А- В- никогда не был найден.
пол. = положительная; отр. = отрицательная

Группа крови А представлена в основном в популяциях домашних коротко- и жесткошерстных кошек. Эти кошки очень редко имеют в своей сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител. Напротив, кошки с группой крови В встречаются редко, зато очень часто имеют в сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену. Заметные различия в частоте этих групп крови могут возникать в популяциях породистых кошек, где на распределение групп крови повлияли методы селективного разведения пород (Таблицы 3 и 4) (6-8).

ТАБЛИЦА 3. Система группы крови АВ у домашних короткошерстных и длинношерстных кошек (8)

* Включают процент кошек А+ В+: Голландия =1%, Австралия =0,4% Япония =9,7%.

Есть и практические последствия этих иммуногематологических особенностей у кошек: если переливается перекрестно-совместимая кровь, продолжительность жизни эритроцитов у реципиента составляет около 4-5 недель. Если же используется несовместимая кровь, то продолжительность жизни эритроцитов может упасть от нескольких часов до нескольких дней. Кроме того, несовместимые трансфузии могут вызвать острую реакцию, особенно тяжелую, если эритроциты группы крови А вводятся кошкам группы крови В даже в первый раз (6-8).

Общие показания к переливанию крови

Переливание крови может быть полезным при некоторых гематологических заболеваниях. Основные показания, в порядке значимости и современного применения, следующие (3,4, 6-8):

• Острая кровопотеря.
• Острая гемолитическая анемия.
• Невосстанавливающаяся анемия с гематокритом (PCV) между 12 и 15%.
• Наследственная или приобретенная коагулопатия
• Тромбоцитопения/патия
• Лейкопения
• Гипопротеинемия (при ограничениях для применения плазмы).

Параметры, которые подтверждают необходимость срочной трансфузии (3,4,6-8):

• Быстрое уменьшение циркулирующего объема (< 30%)
• PCV менее чем 20% или 15% (соответственно для собаки и кошки)
• Непрерывное кровотечение или гемолиз
• Плохая реакция на традиционное лечение
• Бледные слизистые оболочки
• Повышенное время заполнения капилляров (> 2 секунд).
• Тахикардия
• Тахипноэ

При оценке потребности в трансфузии клиницист должен принимать во внимание некоторые другие факторы (3,4,6-8):

• Степень анемии и скорость кровопотери.
• Реакцию костного мозга, определенную посредством подсчета ретикулоцитов в мазках периферической крови или аспиратах костного мозга.
• Причину анемии, которая дала бы ценные прогностические указания.

При ветеринарии необходимо также принимать в расчет этику и закон о защите донора, оснащение соответствующими инструментами для сбора и введения крови. В конце концов не следует пренебрегать и экономическими соображениями относительно применяемых веществ и профессионального надзора над их введением (3, 6-S).

Совсем недавно более пристальное внимание стали уделять аутологичной трансфузии. Эта процедура исключает любую опасность неблагоприятной иммуногематологической реакции или передачи заболевания и может быть использована во время большой полостной операции. Кровь извлекается из полостей тела и повторно вводится в кровеносную систему с помощью соответствующих фильтровальных устройств. Также возможно взять кровь за 2-3 недели до ожидаемой операции, хранить ее соответствующим образом и, если это необходимо, вводить ее по ходу операции (3, 6,7).

Выбор донора и сбор крови

Собака-донор должна соответствовать следующим требованиям (1,3, 5-7):

• Вес свыше 25 кг.
• Возраст от 2 до 8 лет.
• Спокойный характер.
• PCV выше40%.
• Регулярная вакцинация против основных инфекционных болезней, таких, как чума, инфекционный гепатит, лептоспироз, парвовирусная инфекция и бешенство.
• Клинически здорова (рекомендуется полный подсчет форменных элементов крови и исследование ее биохимического профиля).
• Контроль на некоторые инфекционные заболевания в зависимости от географической местности (бабезиоз, лейшманиоз, эрлихиоз, боррелиоз, бруцеллез и дирофиляриатоз).
• Исключаются группы крови DEA 1.1,1.2 (А) или DEA 7 (Тг), хотя есть сомнение, является ли DEA 7 значимым в реакциях на трансфузию.
• Не должно быть естественно возникающих изоантител к эритроцитам в сыворотке.
• Собаке должна быть сделана обычная коагулограмма, потому что донорская кровь может стать источником тромбоцитов и факторов коагуляции.

Кровь обычно берется из яремной вены асептическим способом (место взятия крови должно быть выстрижено и хирургически обработано). Взятое количество не должно превышать 20 мл/кг при максимальной частоте 1 раз в три недели. Постоянным донорам следует давать добавку железа в виде 10 мг/кг сульфата железа ежедневно. Рекомендуется применять коммерческие наборы для взятия крови, такие как пластиковые мешки из поливинилхлорида (PVC), предварительно наполненные цитратом фосфата декстрозы и аденином (CPDA-1) в соотношении 14 мл антикоагулянта на 100 мл крови. Кровь может храниться до 35 дней, если содержится при 4-6°С, или из нее могут быть приготовлены некоторые препараты крови. Сбор крови обычно производят непосредственным наполнением донорского мешка. При этом следят за равномерным смешиванием ее с антикоагулянтом. Ускоренное наполнение может быть достигнуто помещением мешка в вакуумную камеру (1, 3, 5-7).

Кошка-донор должна иметь следующие характеристики (3, 6-8):

• Вес между 5 и 7 кг.
• Возраст от 2 до 8 лет.
• Кастрированная и со спокойным характером.
• PCV выше35%.
• Регулярно вакцинированная (кальцивироз, вирус герпеса панлейкопения, хламидиоз и бешенство).
• Клинически здоровая и протестированная на Haemobartonellafelis и на вирусы лейкоза (FeLV), иммунодефицита (FIV) и инфекционного перитонита (FIP).

Рисунок 1 Набор инструментов для взятия и хранения крови человека, который может быть приспособлен и для собак. Он включает (1) входную трубку с иглой (обычно 18G), которая ведет к (2) мешку объемом 250 мл для цельной крови, обработанной 35 мл CPDA-1 в качестве антикоагулянта. Этот мешок имеет 2 выходных отверстия (3), (4) несколько алюминиевых герметизирующих колец, чтобы закрывать проводящую систему; (5) многофункциональный зажим, который дает возможность удалять кровь из донорской системы, герметик для обжатия алюминиевых колец и режущий инструмент, чтобы разрезать систему между герметиками; (6) стандартный набор для введения крови с наконечником для облегчения проникновения в мешок с кровью, фильтр для сгустков (обычно с порами 170-230 им в диаметре), капельницу, проводящую систему реципиента с адаптером иглы и зажимом для контроля потока.

Определение группы крови кошек-доноров позволяет, когда кровь необходима, быстро и правильно выбрать донора, если известна группа крови больного.

С целью обеспечения необходимой фиксации перед взятием крови кошку-донора подвергают анестезии или воздействуют на нее седативными препаратами. Во время взятия крови следует постоянно контролировать PCV, а кошка должна получать физиологический раствор в количествах в 2-3 раза больше объема взятой крови, который вводится либо внутривенно, либо внутрибрюшинно. Каждые 3 недели может быть взято до 11 мл крови на килограмм веса кошки-донора. Если собранная кровь должна быть немедленно перелита больному, рекомендуется использовать большие шприцы, содержащие одну часть 3,8% раствора цитрата натрия на 9 частей крови. Свертывания крови можно избежать путем обработки шприца 15 IU/ml гепарином. Однако, гепарин вызывает агрегацию тромбоцитов и подавляет факторы коагуляции (Рисунок 2) . В случае длительного хранения наилучшим антикоагулянтом, как описано выше, является CPDA-1 (3,6-8).

Рисунок 2 Взятие крови при помощи 50 мл шприца с добавленным антикоагулянтом (в данном случае CPDA-1) через иглу-бабочку 21G из яремной вены кошки, находящейся под воздействием седативных веществ.

Возможности получения донорской крови

Существует по меньшей мере три разных пути получения доноров и соответственно донорской крови. Принятый подход будет зависеть от индивидуальных потребностей каждой ветеринарной практики (5,6,7). Следует помнить, однако, что использование животных в качестве доноров связано с этическими проблемами как для клинициста, так и для владельца животного, и на самом деле во многих странах является незаконным.

Доноры в закрытой колонии

Преимущества:

• Клинические. Легко выбрать донора, поскольку они имеют известный тип крови.
• Заболевание. Животные полностью лишены возможности заболеть инфекционными болезнями, передаваемыми с кровью.
• Отсутствие стресса. Животные испытывают минимальный стресс и беспокойство во время процедуры взятия крови, поскольку они привыкли к этому процессу.

Недостатки:

• Этические. Животные используются исключительно с целью взятия крови. Забота о животном может быть направлена только на поддержание его здоровья и ограничена тем периодом, в который оно может быть использовано как донор. После этого срока должна быть сделана любая попытка для помещения его в приют для животных.
• Финансовые. Значительные суммы тратятся на содержание и уход за донорами.

Общественные доноры

Местные владельцы животных предлагают своих любимцев для донорства на добровольной основе.

Преимущества:

• Хозяева животных принимают непосредственное участие в программе.
• У животных определяется тип крови, осуществляется ветеринарный контроль, включая обследования на заболевания, передаваемые с кровью.
• Взятия крови являются менее частыми (раз в 2-3 месяца).

Недостатки:

• Повышенная опасность переносимых с кровью инфекционных болезней, если кровь не проверяется при каждой сдаче.
• Значительно повышаются расходы и происходят задержки в получении подходящей крови. Конечный продукт имеет укороченный срок хранения и является более дорогим.
• Доноры потенциально могут испытывать неблагоприятные ощущения или стресс от процедуры взятия крови.

Доноры из ветеринарной клиники

Многие практикующие врачи выбрали путь содержания животных-доноров, часто принадлежащих персоналу клиники, непосредственно в клинике или рядом с ней. Преимущества и недостатки этого подхода схожи с уже подчеркнутыми выше для общественных доноров. Кроме того, животные, постоянно находящиеся в клинике, имеют повышенный риск приобретения больничных инфекций. Зато кровь, собранная от этих доноров, почти всегда используется как свежая или консервированная цельная кровь, а не как ее обработанные компоненты.

Приготовление и применение цельной крови и препаратов крови

В ветеринарии, в отличие от человеческой медицины, методы трансфузии и приготовления препаратов крови не развивались столь интенсивно и переливание цельной крови пока еще остается основным, принятым всюду методом. Однако, если у собак нередко примененяются препараты крови, то у кошек имеются ограничения, вызванные малым объемом крови, которая может быть собрана (1, 3-7). Производство компонентов крови ограничено необходимостью работы в асептических условиях и доступностью специализированного оборудования:

• Рефрижераторной центрифуги.
• Экстрактора плазмы.
• Рефрижератора с постоянной температурой 4-6С.
• Низкотемпературной камеры хранения с температурой ниже -20С.
• Других запасных средств - таких как мешки для транспортировки плазмы (сухой), экстракторные пробирки, зажимы и герметики.

Цельная кровь

Свежая цельная кровь - самый легкий путь получения материала, пригодного для трансфузии. Поэтому она имеет самый широкий спектр клинического применения и показана при всех типах анемии, наследственной или приобретенной коагулопатии и нарушениях функции тромбоцитов. Поскольку цельная кровь является первичным источником трансфузии при очень небольшой практике для собак и предпочтительна для кошек, это делает излишним производство других препаратов из собранной крови.

Применение консервированной (до 30-35 дней) цельной крови, если она собрана с CPDA-1, ограничивается всеми типами анемии и не пригодно при гемостатической болезни (1,3-7).

Консервированные эритроциты

Консервированные эритроциты (PRBCs) содержат большое количество клеточной жидкости, остающейся в первичном мешке для крови после того, как около 80% плазмы и CPDA-1 были асептически введены в мешок для транспортировки. Их приготавливают, помещая мешок в рефрижераторную центрифугу на 15 минут, при скорости вращения 5.000 g и температуре около 3-6°С. Герметично закрытые в мешке PRBCs сохраняют охлажденными при 3-6°С и применяют, пока не истечет срок годности (около 30 дней), не наступит обесцвечивание или какая-либо аномалия. Перед переливанием мешок необходимо согреть. Если для облегчения переливания потребуется развести содержимое, то следует добавить только хлористый натрий. PRBCs показаны для пополнения запаса эритроцитов (как, например, при состояниях хронической анемии) и особенно в ситуациях, когда у больного возникает риск перегрузки дополнительным объемом жидкости. PRBCs можно использовать в комбинации с кристаллоидами для лечения острой кровопотери.

Плазма

Плазма представляет собой супернатант, и, как и PRBCs, готовится центрифугированием цельной крови собаки. Если плазму готовят с помощью рефрижераторной центрифуги, разделяют в течение б часов сбора и немедленно замораживают (-18°С или менее), то ее называют Свежезамороженной Плазмой (FFP) и используют для восстановления факторов свертывания, включая нестойкие компоненты. Срок хранения составляет 1 год при -40°С без утраты активности факторов свертывания. Плазму следует оттаивать при 30-37°С и вводить как можно скорее после оттаивания. Та плазма, которая была получена более чем через 6 часов после взятия крови или Свежезамороженная Плазма, неиспользованная в течение 24 часов после оттаивания или 1 года хранения, маркируется как Замороженная Плазма (FP). Она все еще обладает некоторыми факторами коагуляционной активности (напр., Фактором IX), но в основном используется как источник альбумина. Криопреципитат (СР) может быть приготовлен из FPP. Процедура состоит из продолжительного оттаивания, после чего супернатант удаляется в отдельный мешок. СР - компонент крови, богатый фибриногеном и FVIII, очень полезный для лечения гемофилии А и болезни фон Виллебранда. Остаточная плазма применяется и при других коагулопатиях, за исключением упомянутых выше, и в качестве источника альбумина (1,3-7) . В общем, плазма может быть получена и из цельной крови с CPDA-1 до истечения срока годности, но этот продукт имеет очень ограниченное применение и пригоден только в качестве источника альбумина.

Тромбоциты

Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) готовится в течение 6 часов после взятия крови путем мягкого центрифугирования (т. е. 2.000 g в течение 3 минут) резервуара цельной крови, собранной с CPDA-1. Супернатант переносят в дополнительный мешок, используя экстрактор плазмы. Срок хранения - до 3-х дней при 3-6°С и постоянном встряхивании (1,3-7).

Подбор донора - реципиента по группам крови (совместимость)

Окончательную уверенность в том, что эритроциты донора действительно подходят реципиенту и впоследствии будут эффективно выполнять функцию переносчика кислорода в организме могут дать только результаты перекрестной пробы. Эта процедура состоит из двух этапов (3, 4, 6-8).

Большая перекрестная проба

Эритроциты донора (промытые три раза и взвешенные в 3-5% физ. растворе) приводятся в контакт с гепаринизированной плазмой или сывороткой крови реципиента (одна или две капли каждая). Более быстрая версия пробы, использующая мазки крови, менее пригодна, так как только сыворотка или плазма с высоким титром антиэритроцитарных антител будет демонстрировать агглютинацию или гемолиз (видимый уже через несколько минут) (Рисунок 3). При выполнении в лабораторных пробирках или на хороших платах тест занимает больше времени, зато позволяет определить низкий титр антиэритроцитарных антител при агглютинации или гемолизе (Рисунок 4-6). Такие реакции указывают на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Рисунок 3 Метод приготовления четких слайдов, использованный для тестирования совместимости крови. Одна капля (50-100 мкл) сыворотки или гепаринизированной плазмы и одна капля 3-5% суспензии эритроцитов в физ. растворе помещаются на каждое предметное стекло. На слайде 1 можно видеть гемагглютинацию, на слайде 2 - отрицательную или контрольную реакцию и на слайде 3 - гемолиз.

Рисунок 4 Пробирочный метод для тестирования совместимости крови. Две капли (100-200 ил) сыворотки или гепаринизированной плазмы и две капли 3-5% эритроцитарной суспензии в физ. растворе поменяются в каждую пробирку. Гемагглютинация может быть видна в пробирке 1, отрицательная или контрольная реакция - в пробирке 2, и гемолиз - в пробирке 3.

Рисунок 5 Метод микротитровальных плат,использованный длятестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемагглютинацию.25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Микротитровальную плату затем помещают в термостат при 37С и результат реакции виден через 15 и 30 минут. Плата слегка наклоняется, позволяя небольшой массе осажденных на дне лунки эритроцитов подойти к "линии", указывающей на отрицательную реакцию (номера лунок А2; В1, 2, 3, 4, 5; Cl, 2, 3, 4. 5, 6, 7; D7). Положительные реакции наблюдают в тех лунках, где небольшая масса осадка эритроцитов в "полулунной "форме (агрегат) видна на нижней стороне лунки (номера лунок А), 3, 4, 5. 6, 7; В6, 7; DI, 2, 3, 4, 5, 6).

Рисунок 6 Метод микротитровальных плат, использованный для тестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемолиз. 25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Температура инкубации и время чтения реакции, как на Рисунке 5. Отрицательные реакции наблюдаются в лунках, где пока еще может быть видна осажденная эритроцитарная масса (номера лунок А1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; С4, 5; D4, 5, 6, 7). Положительные реакции можно наблюдать в лунках с одинаковым розовым окрашиванием, где эритроцитарная масса исчезала вследствие гемолиза (номера лунок В1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; Cl, 2, 3, 6, 7; DI, 2, 3).

Малая перекрестная проба

Она идентична большой перекрестной пробе, но при проведении теста используются эритроциты от реципиента и сыворотка или гепаринизированная плазма от донора. В этой пробе та же иммунологическая позитивная реакция указывает на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Перекрестная проба для собак, если позволяет время, должна быть выполнена при трех различных температурах 4°С, 25°С и 37°С или, по крайней мере, при 25°С. При проведении пробы в лабораторных пробирках мягкое центрифугирование (т. е. 1.000 g в течение 2 минут) после контакта промытых эритроцитов с сывороткой крови поможет демонстрации гемолиза (3, 4, 6, 7). Эта перекрестная проба обязательна для всех собак, которым ранее делали переливание, и для каждой кошки. Даже если группа крови реципиента и/или донора-кошки уже известна как АВ, здесь могут быть естественные или иммунные антитела, связанные с другими факторами группы крови, которые не были до сих пор хорошо определены у кошек (3,4,6-8).

Процедура переливания крови

Введение цельной крови или PRBCs реципиенту осуществляется внутривенным путем через мозговую либо яремную вены, при этом используют 20G иглу-бабочку или венозный катетер. Предварительно кровь должна быть согрета до комнатной температуры, которая не должна превышать 37С (Рисунок 7). Применение перистальтических насосов не рекомендуется из-за возможности чрезмерного гемолиза. Следует использовать для подачи крови набор с фильтром для профилактики введения мелких сгустков. Если рецепиент очень мал в размере или демонстрирует значительную гипотонию, то кровь можно также вводить через костный мозг в проксимальный конец бедренной или плечевой кости, где она абсорбируется со скоростью приблизительно одна капля в минуту (1,3, 6-8) (Рисунок 8).

Рисунок 7 Собака, получающая трансфузию крови через мозговую вену.

Рисунок 8 Внутрикостная трансфузия крови у кошки, находящейся под действием седативных препаратов. Используется тот же участок, что и при биопсии костного мозга

Скорость внутривенной трансфузии цельной крови или PRBCs должна зависеть от клинического состояния реципиента. В первые 30 минут скорость вливания должна быть около 0,25 мл/кг; нормоволемическим больным кровь следует вводить со скоростью, не превышающей 5 мл крови на кг веса тела (ВТ) каждый час. Этот объем можно осторожно повышать: у гиповолемических особей - до 20 мл/кг ВТ/час; в то время как у больных, страдающих сердечно - сосудистой недостаточностью, отток следует снижать до 0,5-1,0 мл/кг ВТ/час (1,3, 4, 6-8).

Количество крови (мл), которое нужно перелить больному, может быть рассчитано по следующей формуле:

где К является коэффициентом, связанным с объемом крови для каждого вида (88 для собак и 66 для кошек), ВТ - вес тела (в килограммах реципиента), и PCV донора определяется из расчета объема антикоагулянта. Для собак вместо примененного PCV в вышеупомянутой формуле можно ввести значение гемоглобина (Hgb) - в этом случае величина К снижается до 70. Проще говоря, введение 2 мл цельной крови или 1 мл PRBCs на кг ВТ повышает PCV реципиента на 1% (1, 3,4, 6-8).

Переливают различные виды препаратов плазмы, предварительно согретых до 37°С в водяной бане, используя комплект с проточным фильтром. В общем, окончательная дозировка составляет 6-10 мл/кг/час. При активном кровотечении, вызванном недостаточностью функции свертывания, предлагается 6-10 мл/кг ВТ FFP 2-3 раза в день в течение 3-5 дней, пока продолжается кровотечение. СР следует вводить в течение 6 часов со скоростью 12-20 мл/кг ВТ каждые 10-12 часов до полной остановки кровотечения (1, 3, 4, 6-8).

Реакции на трансфузию

Осложнения трансфузии могут быть классифицированы как острые или замедленные и иммунные или неиммунные, но есть различия и между видами (3, 4, 6, 7). У собак, - из-за того, что они имеют низкое количество естественно возникающих антител, - острые реакции на трансфузию обычно вызваны сенсибилизацией вследствие ранее проведенной несовместимой трансфузии, особенно когда в реакции участвует DEA 1 антиген. На самом деле у реципиента, сенсибилизированного к DBA 1, трансфузированные эритроциты с позитивной реакцией на DEA 1 имеют очень короткое время циркуляции, исчезая из кровообращения примерно через 10 минут (3, 4, 6, 7).

У кошки кровь, несовместимая с АВ, вызывает серьезные гемолитические реакции из-за естественного появления аллоантител. Из-за более высокого титра антител к А-антигену у кошек типа В по сравнению с антителами к В-антигену у кошек типа А, трансфузии, несовместимые по АВ, вызывают более тяжелые реакции у кошек типа В, чем у кошек типа А (3, 4, 6-8).

У обоих видов острая иммунная реакция на трансфузию приводит к гемоглобинемии, гемоглобинурии, лейкоцитозу со сдвигом влево и к эритрофагоцитозу. Клинические проявления болезни: беспокойство, гипотония, слюнотечение, рвота, недержание кала и мочи и лихорадка. Шок, крапивница и смерть возникают намного реже. У здоровых собак были случаи обратимой нефропатии, у больных же собак результатом трансфузии может быть диссеминированная внутрисосудистая коагуляция и олигурическая почечная недостаточность. Подход к лечению последствий трансфузии в основном схож с лечением шока большим количеством кристаллоидных жидкостей, глюкокортикоидов и поддержанием экскреции мочи. Замедленная иммунная реакция на трансфузию, вызванная введеннием несовместимых RBCs (эритроцитов), индуцирует медленный гемолиз, приводящий к билирубинемии,билирубинурии и необъяснимому снижению PCV после трансфузии (3,4, 6, 7).

Острые неиммунологические реакции характеризуются главным образом лихорадкой. Они могут возникать вследствие бактериальной контаминации крови или реакции между антигеном и антителом, вовлекающей лимфоциты, гранулоциты или тромбоциты. Эта реакция может быть самокупирующейся или ее можно вылечить просто жаропонижающими или антибактериальными препаратами. Иногда возникает реакция типа крапивницы с эритемой, сыпью и зудом вследствие аллергической реакции на растворимый фактор в донорской крови (например, IgE или биоактивные амины) (Рисунок 9). В этом случае рекомендуется применять антигистаминные препараты. Возбуждение, рвота, кашель, тахикардия, одышка и цианоз - все это клинические признаки повышенной нагрузки на кровообращение, чего можно избежать соблюдением рекомендаций врача относительно дозы вводимой крови, медленным введением ее и применением консервированных эритроцитов (3, 4, 6, 7).

Рисунок 9 Собака с симптомами крапивницы (припухшие губы, отек век и отечные бляшки на коже).

Однако, при трансфузии могут возникнуть и случайные малые осложнения. Например, случается интоксикация от цитрата, если большие количества консервированной крови вводятся быстро или обычно, но больному животному с нарушенной функцией печени. Иногда от хелации кальция возникает гипокальциемия, ее можно вылечить замедлением скорости вливания или, по необходимости, медленным внутривенным введением глюконата кальция. Гиперкалиемия, которая, как сообщалось, возникает после переливания крови у людей, не появляется у собак и кошек; потому что их эритроциты имеют более низкое содержание калия (3, 4, 6, 7).

Группы крови и изоэритролиз новорожденных

Знание групп крови сделало возможным диагностику и профилактику феномена неонатального изоэритролиза -очень важного заболевания новорожденных, особенно у кошек. Неонатальный изоэритролиз, наряду с другими возможными причинами, рассматривают как ответственный за “Синдром Анемичного Котенка” - основную проблему в некоторых колониях кошек, вызванную высокой частотой группы крови В. Изоэритролиз новорожденных возникает, когда котята с группой крови А сосут молозиво у кошки с группой крови В, которая была спарена с котом группы крови А. Естественно возникающие антитела к А-анигену концентрируются в молозиве кошек группы крови В, и, поглощаемые котятами, абсорбируются и вступают в связь с их эритроцитами. Клинические симптомы включают анорексию, задержку роста, билирубинурию, желтуху, анемию и даже смерть, часто через несколько дней. Изоэритролиз новорожденных теперь может быть диагностирован у котят (Проба Кумбса, вероятно, окажется положительной) и вылечен всего лишь тем, чтобы в первые 24 часа после рождения отдать их на кормление другой кормящей кошке без специфических антител, направленных против эритроцитарных антигенов. Этого заболевания можно избежать и гемотипированием кошек до спаривания (3, 4, 6-8).

Изоэритролиз новорожденных случается и у собак, но гораздо реже по сравнению с кошками из-за отсутствия естественно возникающих изоантител в высоких титрах. Изоэритролиз новорожденных может возникать у щенков, рожденных от суки, которая до этого получила при трансфузии несовместимую кровь, содержащую DBA 1 антиген. Патогенез, симптомы и профилактические меры -те же, что и у кошек (3, 4, 6, 7).

Заключение

Относительная простота систем групп крови у собак и низкая частота естественно возникающих изоантител у этого вида позволили ветеринарным врачам почти игнорировать несовместимость групп крови у больных, особенно при первой трансфузии. Желателен более тщательный выбор донора крови, который должен иметь отрицательную реакцию по меньшей мере на DEA 1. У кошки ситуация совсем другая, и неблагоприятные реакции могут возникнуть даже при первой трансфузии. Поэтому в лечении кошек важно определить группы крови и провести перекрестные пробы.

Другая проблема возникает при выборе донора, особенно из-за опасности передачи реципиенту разных болезней. Усилия исследователей направлены на производство безопасных препаратов крови и ее компонентов. В будущем для ветеринарного врача станут более доступными другие препараты и методы - такие, как аутотрансфузия, рекомбинантный FVIII, эритропоиэтин или другие факторы, стимулирующие колонии костного мозга, а также синтетические носители кислорода.

WALTHAM FOCUS VOL 6 NO 4 1996

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Authement, J. M., Wolfsheimer, К. J. and Catchings, S. (1987). Canine blood component therapy: product preparation, storage, and administration. Journal of the American Animal Hospital Association, 23: 483^93.

2. Bell, К. (1983). The blood groups of domestic mammals. Agar, N. S. and Board, P. G. (eds). Red Blood Cells of Domestic Mammals. Elsevier Science Publishers, Amsterdam, pp. 163-164.

3. Chabanne, L., Peyronnet, L., Fournel, C., Meyer, F. and Rigal, D. (1994). I gruppi sanguigni dei carnivori domestici. Trasfusioni e malattie emolitiche neonatali. Summa, 11: 5-17.

4. Cotter, S. M. (1991). Comparative transfusion medicine. Advances in Veterinary Science and Comparative Medicine, 36. Academic Press, San Diego, p. 343.

5. Dodds, W. J. (1993). Update on animal blood banking services. Veterinary Practice Staff, 5: 2-7.

6. Hohenhaus, A. E. (1992). Transfusion medicine. Problems in Veterinary Medicine, 4. J. B. Lippincott, Philadelphia, p. 670.

7. Kristensen, A. T. and Feldman, B. F. (1995). Blood banking and transfusion medicine. Ettinger, S. J. and Feldman, E. C. (eds). Textbook of Veterinary Internal Medicine. Diseases of the Dog and Cat. W. B. Saunders, Philadelphia, pp. 347-360.

8. Lubas, G. and Continanza, R. (1993). Recenti acquisizioni sulle caratteristiche immunoematologiche del gatto e relative applicazioni nella clinica. Veterinaria, 7: 5-11.

9. Swisher, S. N. and Young, L. E. (1961). The blood grouping systems of dogs. Physiology Reviews,

Наследуется группа крови от родителей. Группы крови показывают генетические маркеры на поверхности эритроцитов (красные клетки крови). Чужие маркеры эритроцитов иммунная система способна распознать и выработать против них антитела. В итоге развивается гемолитическая реакция, то есть происходит разрушение эритроцитов крови. Это, как правило, приводит к неутешительным последствиям.

В обычной повседневной практике современной ветеринарной клиники привычным делом стала процедура переливания крови - гемотрансфузия. Операционные и послеродовые кровотечения, огнестрельные ранения, травмы, отравления, сложные желудочно-кишечные кровотечения, последствия тяжело перенесенного пироплазмоза и другие разные заболевания, которые сопровождаются малокровием (анемией) - это все обстоятельства, которые могут даже привести к летальному исходу, если не сделать переливание крови. Так и было до недавних пор. Став обычной, привычной процедурой, переливание крови уберегло жизнь не одной сотне животных. Каждый хозяин собаки обязан знать группу крови своего питомца, чтобы, если понадобится, гемотрансфузию выполнили квалифицированно, без проблем, связанных с переливанием несовместимой крови.

В большинстве случаев, первое в жизни переливание крови собака переносит достаточно легко, и анафилактическая реакция не происходит. При следующем переливании важно воспользоваться кровью донора, которая совпадает по существенным, самым критичным факторам. Если учесть, что на сегодняшний день переливание крови - это процедура распространенная, то часто в клинику попадают собаки, которым уже выполняли гемотрансфузию. Хозяевам обязательно нужно знать, что второе и следующие переливания крови уже будут опасны без определения группы крови вашего пса.

Группа крови у собаки - это что?

Давайте выясним, что такое групповой антиген. Это белок, присутствующий в крови определенного организма на поверхности каждого эритроцита, который воспринимается как «чужой», когда попадает в другой организм. При этом совершается иммунная отдача с производительностью антител. Явная опасность здоровью и даже жизни питомца появляется при повторном переливании «чужой» крови.

Группа крови у людей и собак - это не совсем одно и то же. У людей можно выделить 2 основных групповых антигена: А и В, и несколько дополнительных, которые редко встречаются. Более того, у людей есть еще и резус-фактор, который тоже имеет антигенные свойства, и который либо присутствует, либо отсутствует в крови человека. Получается, что у людей существует основных четыре группы крови: 0(I), А(II), В(III), АВ(IV), и любая может быть либо резус-положительной, либо резус-отрицательной.

У собак насчитывают более десятка групповых антигенов, но резус-фактора нет. Еще долго будут специалисты изучать возможности и биологические свойства антигенов, их фактическое число и роль в организме собаки.
Для общепризнанных групповых антигенов собак сегодня утверждено международное определение: DEA – Dog Erythrocyte Antigen. Так отмечают цифрами групповые факторы или индивидуальные антигены: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5, 6, 7 и т. д.
Для благополучного переливания крови необходимо знать фактор DEA 1.1!
DEA 1.1 способен активизировать внушительные иммунные реакции, так как обладает мощными антигенными свойствами. Как показывает практика, в случае несовместимости, к тяжелым клиническим осложнениям другие групповые факторы не ведут.
Есть лаборатории, которые имеют возможность определять фактор DEA 1.1. Если он есть в крови, то собака DEA 1.1 - положительная, если его нет, то DEA 1.1 - отрицательная. В соответствии с европейской статистикой, приблизительно 45% собак DEA 1.1 - положительные, остальные - отрицательные.

Собаки, которые по DEA 1.1 положительные - это универсальные реципиенты, им можно переливать кровь любого другого пса, но при условии, что собака-донор абсолютно здорова, и в анамнезе не имеет гемотрансфузии. Животное DEA 1.1 + может являться донором только для такой же, DEA 1.1 положительной собаки.

Собаки, которые отрицательные по DEA 1.1 - это универсальные доноры. Это значит, что другим собакам можно переливать их кровь, но самим им можно переливать только такую же, DEA 1.1 отрицательную.

Но, идеальный вариант - это когда положительной собаке переливают кровь от DEA 1.1 положительной, а отрицательной по DEA 1.1 - от отрицательной.

Что произойдет, если собаке с отрицательным DEA 1.1 перелить кровь положительную? Изначально антител к фактору DEA 1.1 нет в крови такой собаки, поэтому на практике всегда первое переливание проходит благополучно. Но чувствительность у этой собаки к не ее веществу, а у нее в крови образовалась «армия» соответствующих антител, останется на всю жизнь. И, если повторное переливание крови проводится наугад, то есть не учитывается группа крови, оно может оказаться летальным для этой собаки. Более того, если такая собака - сука, то не стоит вязать собаку с кобелями DEA 1.1 положительными, так как некоторые из щенков будут DEA 1.1 положительными. При этом возможна гибель плода еще внутри утробы, так как антитела матери свободно просачиваются к плоду через плацентарный барьер. Вдобавок ко всему антитела содержатся в молозиве и новорожденные щенки будут страдать гемолитической анемией, и даже могут погибнуть.

Терапевтическое введение компонентов крови

Введение компонентов крови часто необходимо как дополнительное лечение щенков и котят. Обычно

используется цельная кровь, эритроцитарная масса и плазма. Показаниями для использования свежей цельной крови являются геморрагический шок, анемия, сильное травматическое кровотечение, патология крови (тромбоцитопения или плохая свертываемость крови) и неиммунная гемолитическая анемия. Исключая кровотечения, во всех остальных случаях правильно сохраненная цельная кровь может быть заменой свежей цельной крови. Обычное лечение большинства анемий у котят и щенков также может быть дополнено переливанием эритроцитарной массы. Плазма в основном используется для улучшения свертываемости крови и при сильном дефиците белка.

Сбор цельной крови

Самым безопасным и доступным местом для забора цельной крови является яремная вена. Количество крови, которое может быть безопасно собрано через яремную вену от донора собаки или кошки, составляет свыше 22 мл/кг веса тела каждые 2 недели. Доноры могут находиться под действием седативных препаратов, а место сбора хирургически подготовлено. Контейнер для крови должен быть расположен выше пластикового аппарата по переливанию крови и может быть перемещен только после введения иглы в вену. Игла должна быть чистой, чтобы обеспечивать хороший кровяной поток и минимизировать активацию тромбоцитов, свертываемость и загрязнение тканей. Когда полный объем крови собран, трубка отсоединяется перед извлечением иглы из вены. Прямое давление должно прикладываться к месту сбора еще в течение 5-10 минут для гемостаза.

Кровь лучше всего собирать в пластиковые мешки с растворами цитрата-фосфата аденина (ЦФА) или ацид-цитрата глюкозы (АЦГ). Отношение объема антикоагулянтов (ЦФА и АЦГ) к объему крови составляет 1:7 для сохранения всех компонентов (в ЦФА собачья и кошачья кровь сохраняются 28 дней при температуре 28° С, а в АЦГ - 21 день при той же температуре). Если кровь переливается непосредственно после сбора, то добавляются разбавленные 1:10 антикоагулянты. Если используется гепарин, то 625 единиц гепарина добавляют на каждые 50 мл собранной крови. Для удобства последующих процедур кровь собирают в пластиковые мешки в количестве 450 мл ЦФА или АЦГ-антикоагулянта, с обязательным перемешиванием. Для контроля за количеством собираемой крови используются тройчатые равновесные или десятичные электронные весы. 1 мл крови весит примерно 1 г, поэтому 450 мл крови весят примерно 450 г плюс вес мешка и антикоагулянтов. После сбора соединительная трубка убирается, а содержимое мешка перемешивается. Затем собранная кровь используется сразу или хранится при соответствующей температуре для последующего применения.

Если сразу необходимо небольшое количество собранной крови, то в пластиковый шприц объемом 50 мл набирается 7 мл антикоагулянта, а остальной объем заполняется кровью. Кровь из любого открытого резервуара, будь то шприц или пластиковый мешок с уже введенной иглой, должна использоваться в течение 24 часов.

Сбор эритроцитов и плазмы

Сбор эритроцитов требует системы из двух или трех мешков, когда один из них служит для сбора цельной крови, а два других являются дополнительными для эритроцитов. Это позволяет держать собранную кровь закрытой во время сепарации. После сбора цельной крови эритроциты и плазма должны быть отделены от нее. Кровь, собранная в пластиковый мешок с антикоагулянтами, в охладителе, наполненном льдом, отправляется на местное предприятие для переработки. Кровь не должна соприкасаться со льдом. На предприятии по переработке крови мешки с кровью и антикоагулянтами помещаются в центрифугу при температуре 4° С и сепарируются со скоростью 5000 оборотов в минуту в течении 10 минут. Отделенная плазма помещается в дополнительный мешок, а оставшиеся эритроциты маркируются и хранятся 21 день.

Свежезамороженной является плазма, охлажденная в течении 8 часов после сбора крови, она используется в основном для поддержания свертываемости крови (при гемофилии А, болезни Виллибранда, отравлении родентицидом, синдроме диссеминированной внутрисосудистой свертываемости). Она должна быть заморожена и храниться при температуре -70°С для оптимального сохранения фактора свертываемости в течении 1 года или в конвенционном холодильнике 3 месяца. После 1 года хранения плазма не используется для поддержания фактора свертываемости, хотя может применяться для лечения гемофилии В (требуется фактор IX) или отравления родентицидом (требуются факторы II, VII, IX и X), или может храниться еще 5 лет при той же температуре.

Группы крови

Группа крови у собак не играет большой роли при переливании крови от животного с той же группой, но может встречаться несовместимость антигенов плазмы. Группа крови помогает минимизировать угрожающую жизни реакцию при переливании не подходящей крови (табл. 1 и 2). Это особенно важно для кошек, которые в отличии от собак имеют естественные антитела против крови других групп. У животных-доноров необходимо определять группу крови. Знание группы крови также может быть важно для животных, предназначенных для разведения, чтобы предотвратить изоэритролиз (особенно важно для кошек).

Таблица 1 Группы крови у собак

* Собачий эритроцитарныи антиген

Аллоантитела проходят через молозиво в первые 16 часов после рождения котят, и все котята с группой В (в меньшей степени с группой А) имеют эти антитела уже в возрасте нескольких недель. Таким образом, кошки не нуждаются в повышении чувствительности ни при первом переливании крови, ни в период беременности, чтобы развить аллоантитела, и отрицательная реакция может быть при первом переливании или у котят первого помета данной кошки. Возможно рождение котят с группой А от кошки с группой В и кота с группой А. У собак, от суки с эритроцитарным антигеном (СЭА) 1.1 отрицательным и кобеля с СЭА 1.1 положительным могут родиться щенки с СЭА 1.1 положительным. Если такое происходит или суке переливали эритроциты и она чувствительна к СЭА 1.1, антитела к СЭА 1.1 проходят через молозиво. Щенки, нормальные при рождении, могут давать иммунно-промежуточную гемолитическую анемию в возрасте 3-10 дней.

Таблица 2 Группы крови у кошек (noGriot-Wenk and Giger, 1995)

Перекрестные пробы, на совместимость

Дополнительно при определении группы крови у домашних собак и кошек могут выполняться, если возможно, перекрестные пробы на совместимость. Невосприимчивость, выявленная перекрестными пробами, показывает раннюю чувствительность реципиента (у собак) или естественное появление изоантител (особенно важно для кошек). Щенкам и котятам, нуждающимся в повторном переливании крови, необходимо давать кровь от доноров, с которыми у них есть перекрестная совместимость.

Перекрестные пробы выполняют для определения мажорной и минорной совместимости. При тесте на мажорную совместимость главное взаимодействие происходит между донорскими клетками и сывороткой реципиента, когда определяется, имеет ли реципиент антитела на донорские клетки. При тесте на минорную совместимость исследуют взаимодействие клеток реципиента и сыворотки донора, выделяя антитела в донорской сыворотке против клеток реципиента, что имеет меньшее значение. Оба теста проводятся на свежей крови, потому что анти-СЭА антитела фиксируются дополнительно. Переливание крови производится при главной совместимости.

Образцы крови по 5 мл берутся у донора и реципиента, крови позволяют свернуться. После центрифугирования сыворотка помещается в отдельные пробирки, а кровяной сгусток осторожно разбивается и 0,3 мл клеток отделяется от каждого образца и помещается в пробирки, в каждой из которой содержится по 9,7 мл обычного соляного раствора. Клетки должны быть смочены соляным раствором, чтобы удалить плазму и предотвратить образование фибриновых сгустков. После смачивания всплывшую массу удаляют, а оставшиеся клетки помещают в раствор - 0,3 мл клеток на 9,7 мл соляного раствора. Мажорная совместимость проявляется при добавлении 0,1 мл сыворотки реципиента к 0,1 мл суспензии с донорскими клетками, минорная совместимость - при добавлении 0,1 мл донорской сыворотки к 0,1 мл клеток реципиента. Контрольная реакция производится между сывороткой реципиента и смоченными клетками. Каждый тест проводится три раза и выдерживается (инкубируется) по 15 минут: один набор при температуре 37°С, другой при комнатной температуре и третий при температуре 4°С. Инкубация при различных температурах необходима, потому что реакция несовместимости может произойти при разных температурах.

После инкубации каждая пробирка центрифугируется в течение 1 минуты при скорости 280 об/минуту, и всплывшие массы проверяются на гемолиз. Пробирки осторожно встряхиваются, чтобы проверить агглютинацию эритроцитов. Кровь совместимых групп не показывает ни агглютинации, ни гемолиза. Если агглютинация не отмечена, то небольшое количество материала кладется на чистое смотровое стекло для проведения микроскопического анализа. Любая степень агглютинации или гемолиза при мажорной совместимости является показателем несовместимости, и переливание не производится. Если небольшая агглютинация или гемолиз проявляется при минорной совместимости, то переливание возможно в критическом случае.

Назначение компонентов крови

Перед применением сохраняемые компоненты крови должны быть подогреть! до комнатной температуры, чтобы не вызвать гипотермию у реципиента. Для подогрева используется трубка, свернутая спиралью и помещенная в водяную баню с температурой воды 37-38°С. Также контейнер с компонентами крови можно поставить в водяную баню или сухой инкубатор с постоянной температурой, или же замороженная плазма может быть медленно подогрета в конвенционной микроволновой печи. Лишнее тепло не нужно при подогревании компонентов крови, потому что фибриноген осаждается при температуре 50°С, а аутоагглютинация начинается при повышении температуры больше 45°С.

Если компоненты крови открыты или в контейнер уже введена игла, или они подогреты до 10°С или больше, содержимое контейнера должно быть использовано в течении 4 часов в связи с ростом бактерий. Подогретые компоненты крови не могут быть возвращены в хранилище.

Микроволновое размораживание плазмы оказывает на плазменный белок определенное воздействие, поэтому ее предпочтительнее размораживать в водяной бане.

При переливании должны использоваться соответствующие фильтры и оборудование. Фильтры необходимы для задержки кровяных сгустков и лейкоцитно-пластинчатых агрегатов, чтобы не вызвать микроцыфаркты в легких как возможное осложнение при переливании крови. Большинство переливаний крови требуют фильтра с диаметром пор 170 мм. Кровь в шприце также должна проходить через стандартный набор с соединителем Льюера.

Для больших щенков компоненты крови назначаются внутривенно через головную или яремную вены с применением постоянного катетера 20 G. Для маленьких щенков и больших котят используют катетер 22 G, который также вводят в головную или наружную яремную вену. Также маленьким щенкам и котятам можно делать переливание крови в головную и внешнюю яремную вену с использованием набора для переливания крови 23 G. Чтобы снизить вязкость при использовании маленьких игл, компоненты крови можно перемешать с 0,9%-ным раствором NaCI перед или во время переливания. Использование других растворов не рекомендуется. Гипотермичным, дегидратированным щенкам и котятам младше 3 месяцев, которым часто невозможно внутривенное вливание, переливание крови можно осуществлять внутрикостно. Поглощение перелитых компонентов крови происходит очень быстро - примерно 95% за 5 минут.

Перед переливанием должны быть получены все показатели состояния организма - вес тела, температура, пульс, дыхательная частота, цвет слизистых оболочек, общий объем кровяных клеток и концентрация плазменного белка. Начальная скорость при переливании должна составлять 0,25 мл/кг веса тела в течении 30 минут, когда за реципиентом нужно внимательно наблюдать для получения реакции на переливание крови. Благодаря малой начальной скорости переливания, в кровь реципиента проникнет минимальное количество несовместимых компонентов, но их будет достаточно для явной реакции на чужую кровь. Если в течении первых 30 минут никаких проблем не возникло, скорость переливания повышают. Но эта практика не применяется для кошек с кровью группы В, потому что даже 1 мл крови группы А может вызвать смерть. У кошек, породы которых имеют кровь группы В, обязательно должна быть определена группа крови.

Требуемый объем крови обычно переливается за 3 - 4 часа. Это правило достаточно гибко, потому что скорость переливания зависит от физических условий и гидратационного состояния реципиента. Для гиповолемичного реципиента возможна скорость выше 22 мл/кг в час. Перегруженность сосудистой системы, постоянная проблема даже у здоровых реципиентов, может быть осложнена у пациентов с сердечной и почечной недостаточностью. Щенки и котята с сердечной недостаточностью могут не выдержать скорость переливания крови, превышающую 4 мл/кг в час.

Количество необходимой цельной крови определяется просто: 2,2 мл/кг переливаемой цельной крови увеличивают общий клеточный объем на 1%, если объем переливаемой крови составляет 40%. Эритроциты (при гематокрите 60-80%) переливают так же, как и цельную кровь. Эритроциты должны быть растворены в 0,9%-ном растворе NaCI перед переливанием. Для этого в обычный 0,9%-ном раствор NaCI добавляются эритроциты в количестве 0,5-1,0 мл/мл. Количество физиологического раствора определяется по состоянию сосудистой системы и гидратационному статусу реципиента.

Если свежая, свежезамороженная и замороженная плазма назначается пациенту с сильным кровотечением для усиления свертываемости крови, то ее доза составляет 6-10 мл/кг веса тела 2-3 раза в день в течение 3-5 дней, пока кровотечение не остановится.

Осложнения при переливании крови

Хотя осложнения при переливании крови у щенков и котят достаточно редки, но все же случаются. Может быть гемолитическая реакция на несовместимые эритроциты, переливаемые реципиенту, у которого уже есть антитела изначально или они появились после первого переливания. У кошек с группой крови Б, у которых уже есть антитела на группу А, может быть очень сильная гемолитическая реакция уже при первом переливании. Большинство гемолитических реакций у щенков замедленны и проявляются в виде укорочения жизни эритроцитов после переливания и развития положительной реакции на тест Кумбса. Гемолиз также может случиться при переливании перегретых или холодных компонентов крови, параллельном назначении гипотонических растворов, механических повреждениях эритроцитов негодным оборудованием при сборе крови, хранении и переливании или при переливании под давлением через маленькую иглу или катетер, или фильтр.

Нежелательными результатами лейкоцитарной и тромбоцитарной несовместимости, а также белков плазмы являются судороги, неврологические симптомы, рвота и крапивница. Для снижения этих реакций применяется терапевтическая подготовка дифенгидрамид гидрохлоридом в количестве 2 мг/кг веса тела. Лихорадочная реакция бывает довольно редко и достаточно слабая. Септическая реакция при стерильном сборе крови и правильном хранении случается довольно редко.

Немногие знают, что переливание крови проводится не только людям. Эта важная процедура порой спасает жизнь и животным. Если вы со своим питомцем решили сдать кровь, или наоборот вашему питомцу необходимо переливание, у вас наверняка возникнет много вопросов. В этой статье мы постараемся на них ответить.

Опасна ли процедура?

Абсолютно точно можем ответить: нет! Донорство безопасно. Перед манипуляцией врач рассчитывает необходимый объем крови, взятие которого не повлияет на здоровье донора.

У некоторых животных эта процедура все же имеет небольшой риск, так как для взятия необходима и введение седативных препаратов (животное во время процедуры должно лежать спокойно). Однако, беспокоиться не стоит - препараты обладают краткосрочным действием, поэтому риск минимален!

Кошкам пород группы риска по заболеваниям сердечно-сосудистой системы стоит пройти (кардиологическое обследование).

Берется у донора. Если результаты в норме, проводится тест на совместимость крови донора и реципиента. Если кровь совместима - производится забор крови у донора для переливания. Объем забираемой крови у донора составляет около 10% от всего объема циркулирующей крови.

Забор крови производится из вены на грудной, тазовой конечности или из яремной вены. Место забора крови специально подготавливается: выбривается шерсть, и кожа обрабатывается антисептиком. Забор крови происходит в течение 1-2 часов. Продолжительность процедуры зависит от рассчитанного объема крови и переносимости данной процедуры донором. Кровь собирают в специальный контейнер через внутривенный катетер.

При необходимости животное седатируется (вводятся успокоительные препараты).

Есть ли группы крови у питомцев?

Да, у собак и кошек имеются группы крови. У кошек они называются: А, В и АВ. Группа крови определяется тестом.

А у собак в основном проверяют наличие или отсутствие антигена, важного для контроля осложнений при переливании крови.

Помимо этого, перед процедурой проводится тест на совместимость крови. Выполняется это для того, чтобы окончательно убедиться, что кровь питомцев совместима друг с другом.

Нужен ли особый уход в домашних условиях после процедуры?

Нет. Донора просто необходимо покормить и дать отдохнуть. Никаких ограничений физической нагрузки ему не требуется.

Как часто можно сдавать кровь кошкам и собакам?

Ответ на этот вопрос не может быть однозначным. Фиксированным является лишь минимальный интервал времени между взятием крови на донорство. Этот интервал - 3 месяца. В среднем не принесет вреда сдача крови 1-2 раза в год. Естественно, при хорошем самочувствии «хвостика».

Что необходимо для сдачи крови?

Прежде всего, конечно, желание и здоровый, подходящий под требования к донорам питомец. Также нужно:

1. Предоставить документы, подтверждающие наличие ежегодной вакцинации, выполненной в государственной или частной клинике.
2. Иметь с собой порцию корма, воду и миску.
3. Взять поводок, ошейник и намордник (для собак).

Каков размер вознаграждения донора?

Стоимость услуг донора оговаривается индивидуально. Рекомендуемое вознаграждение 1500-2000 рублей, в зависимости от размеров животного.

Чем можно заменить донорскую кровь для животных?

К сожалению, в современной ветеринарной медицине, в отличие от медицины человека, еще не созданы синтетические заменители крови. Большинство препаратов для восполнения компонентов крови не пригодны для животных в силу особой специфичности и способны вызвать у них тяжелую аллергическую реакцию. Именно поэтому нам так важно, чтобы животных-доноров крови становилось все больше. Вот почему так ценно ваше решение принять участие в программе донорства и спасти чью-то жизнь.