Problemi moderni della scienza e dell'educazione. Cosa significano i livelli di Ki67 nel cancro al seno? Indice di proliferazione ki 67

Valore prognostico e predittivo del Ki-67 nel cancro al seno triplo negativo
Fonte: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5058740/

Questo studio aveva lo scopo di indagare il ruolo prognostico del Ki-67 nell'ulteriore classificazione del cancro al seno triplo negativo (TNBC) e verificare se un'elevata espressione di Ki67 potesse predire il beneficio del carboplatino. Da gennaio 2004 a dicembre 2012, 363 pazienti che lavorano per TNBC sono stati identificati attraverso un database clinico istituzionale. Dopo un follow-up mediano di 34 mesi (5,2-120,0 mesi), 62 pazienti (17,1%) hanno avuto recidive e 33 pazienti (9,1%) sono morte di cancro al seno. All'analisi univariata, un elevato indice Ki-67, dimensioni maggiori del tumore e coinvolgimento dei linfonodi sono stati associati a una sopravvivenza libera da malattia (DFS) e a una sopravvivenza globale (OS) più brevi. Nell'analisi multivariata, un Ki-67 elevato è un fattore di rischio indipendente per la DFS (hazard ratio, RR: 2,835, intervallo di confidenza al 95%, IC al 95%: 1,586-5,068, P

Il cancro al seno triplo negativo (TNBC) è un sottogruppo di cancro al seno privo di espressione del recettore degli estrogeni (ER) e del recettore del progesterone (PR), nonché dell'amplificazione del recettore 2 del fattore di crescita epiteliale umano (HER2). Da un punto di vista istologico, il TNBC è uno stato immunoistochimico (IHC) comune per una serie di tumori con presentazioni cliniche eterogenee. Uno studio recente ha identificato sei sottotipi di TNBC che mostrano profili unici. Data la diversità biologica del TNBC, è necessario identificare sottotipi con prognosi migliore, che possano essere utilizzati per la terapia adiuvante intensiva, nonché per quelli che richiedono regimi più aggressivi.

L’attività tumorale, un’importante funzione cellulare, è strettamente correlata al comportamento del tumore nel cancro al seno. Sono stati sviluppati vari metodi per valutare i tassi di proliferazione, tra cui la conta mitotica, la valutazione della frazione cellulare nella fase S del ciclo cellulare e la determinazione IHC degli antigeni associati alla proliferazione. Ki-67 è uno degli antigeni di proliferazione IHC più utilizzati ed è stato convalidato come fattore prognostico e prognostico indipendente per il cancro al seno in fase iniziale. Secondo l'International Expert Consensus di San Gallo, il valore Ki-67 è un parametro importante nella sottoclassificazione dei tumori del lume nel sottogruppo Luminal A con buona prognosi e nel sottogruppo Luminal B con prognosi sfavorevole. Sebbene il valore prognostico del livello di Ki-67 nel TNBC non sia ancora chiaro.

Il trattamento per il TNBC è stato impegnativo. Si ritiene generalmente che il TNBC presenti un comportamento clinico più aggressivo e un rischio più elevato di recidiva e mortalità del tumore rispetto alle sue controparti senza intervento. Inoltre, la mancanza di bersagli molecolari ben definiti peggiora la situazione e l’unica strategia di trattamento sono gli agenti citotossici. Il sale di platino è uno dei nuovi agenti nel trattamento del TNBC. Molti ricercatori hanno studiato il ruolo del cisplatino e del carboplatino per il trattamento del TNBC in ambito neoadiuvante e metastatico, mentre l’aggiunta del carboplatino nella malattia in stadio iniziale manca ancora di prove evidenti. Una domanda importante è se tutti i pazienti con TNBC debbano essere esposti al carboplatino, con i suoi effetti tossici e l’alto tasso di interruzione; oppure tutti i pazienti con TNBC riceveranno risultati simili dal sale di platino.

Lo scopo di questo studio era di indagare il ruolo del Ki-67 nell'ulteriore classificazione del TNBC in sottotipi con prognosi diversa e se il livello di espressione del Ki-67 potesse predire il beneficio del TNBC dal carboplatino nel contesto adiuvante.

Lo studio ha incluso 363 pazienti con TNBC. L'età media era di 55 anni (range 23-86). Duecentosettantacinque pazienti (75,8%) sono state sottoposte a mastectomia; 324 (89,3%) pazienti hanno ricevuto la chemioterapia. I regimi chemioterapici includevano EC (epirubicina 100 mg/m2 IV giorno 1, ciclofosfamide 600 mg/m2 IV giorno 1, ciclicamente ogni 21 giorni per 4 cicli), EC-T (epirubicina 100 mg/m2 IV giorno 1, ciclofosfamide 600 mg/m2 m2 IV giorno 1, ciclicamente ogni 21 giorni per 4 cicli, seguito da docetaxel 100 mg/m2 IV giorno 1, ciclicamente ogni 21 giorni per 4 cicli), TEC (docetaxel 75 mg/m2 IV giorno 1, epirubicina 75 mg/m2 IV giorno 1, ciclofosfamide 600 mg/m2 IV giorno 1, ciclico ogni 21 giorni per 6 cicli), TC (docetaxel 75 mg/m2 IV giorno 1, ciclofosfamide 600 mg/m2 IV giorno 1, ciclico ogni 21 giorni per 4 cicli) , EC-wPCb (epirubicina 100 mg/m2 IV giorno 1, ciclofosfamide 600 mg/m2 IV giorno 1, ciclico ogni 21 giorni per 4 cicli seguito da paclitaxel 75 mg/m2 IV giorno 1, carboplatino area 2 0 sotto la curva, ciclico settimanalmente per 12 cicli) e wPCb (paclitaxel 75 mg/m2 IV giorno 1, carboplatino area 2 0 sotto la curva, ciclico settimanalmente per 12 cicli). Regimi contenenti sia un'antraciclina che taxani sono stati utilizzati in 177 pazienti (48,8%) e 58 (16,0%) pazienti hanno ricevuto un regime contenente platino. Centosettantuno pazienti (47,1%) hanno ricevuto radioterapia.

Dei 363 tumori tripli negativi, 317 (87,3%) sono stati identificati istologicamente come carcinomi duttali invasivi, 17 (4,7%) come carcinomi apocrini, 9 (2,5%) come carcinomi midollari, 7 (1,9%) come carcinomi metaplastici, 2 ( 0,6%) come carcinomi lobulari invasivi, 3 (0,8%) come carcinomi neuroendocrini, 3 (0,8%) come carcinomi papillari invasivi, 2 (0,6%) come carcinoma adenocistico, 1 (0,3%) come carcinoma mioepiteliale, 1 (0,3%) come tumore filloide maligno e 1 (0,3%) come carcinoma mucinoso.

Il livello medio di espressione del Ki-67 era del 40%. Con il 40% come cut-off dell'indice Ki-67, 196 pazienti (54,0%) sono stati classificati come bassa espressione di Ki-67 e 167 pazienti (46,0%) come alta espressione. Le caratteristiche dei pazienti in associazione ai livelli di espressione di Ki-67 sono descritte nella Tabella 1. Livelli elevati di espressione di Ki-67 nei TNBC erano più prevalenti negli IDC rispetto ai non IDC (p

Dopo un follow-up mediano di 34,0 mesi (5,2-120,0 mesi), sono stati osservati 62 primi eventi (17,1%), 24 (12,2%) nel gruppo a basso Ki-67 e 38 (22,8%) in quello ad alto livello. espressione (X2 = 11,372, p = 0,001). I primi 62 eventi includevano 53 recidive con 30 recidive locoregionali e 44 metastasi a distanza e altri 9 eventi con 6 tumori al seno controlaterali. Tutte le lesioni locali ricorrenti e le lesioni mammarie controlaterali sono state dimostrate utilizzando l'aspirazione con ago sottile o la biopsia con ago. Trentatré pazienti (9,1%) sono morti durante il follow-up e i pazienti con elevata espressione di Ki-67 hanno avuto un tasso di mortalità più elevato (13,2% vs 5,6%, X2 = 13,368, p

(A) La DFS a 3 anni era significativamente migliore nel gruppo con Ki-67 basso rispetto al gruppo con Ki-67 alto (90,8% contro 78,4% log-rank p = 0,001) e (B). Una OS a 3 anni più scarsa è stata riscontrata anche nel gruppo con Ki-67 elevato (98,0% vs 90,4% log p = 0,000).

All'analisi univariata, solo un'elevata espressione di Ki-67, dimensioni maggiori del tumore e positività dei linfonodi sono stati associati a DFS e OS più brevi, mentre altre caratteristiche clinico-patologiche come età, sottotipo istologico e grado del tumore non hanno influenzato la prognosi. Nell'analisi multivariata, Ki-67 è un fattore prognostico indipendente per la DFS (hazard ratio, RR: 2,835, intervallo di confidenza al 95%, IC al 95%: 1,586-5,068, P

Analizzando la DFS a 3 anni in base alla distribuzione del Ki-67, l'analisi STEPP ha mostrato un possibile effetto benefico del carboplatino in pazienti con tumori altamente proliferativi (Ki-67> 40%) (Figura 2A). La Figura 2B e la Figura 2C presentano la proporzione osservata di DFS, rispettivamente, per i pazienti con Ki-67 “alto” e “basso”, stratificati per gruppo di trattamento. Nelle pazienti con carcinoma mammario con basso Ki-67, l'uso di carboplatino aggiunge poco, se non nulla, alla DFS a 3 anni (HR: 0,608, IC 95%: 0,176-2,103). Tuttavia, i pazienti nel gruppo con Ki-67 elevato sembrano avere tassi di DFS a 3 anni notevolmente migliori quando trattati con carboplatino (HR: 0,478, IC 95%: 0,279-0,819). L'interazione tra Ki-67 e il trattamento non era statisticamente significativa (p = 0,346).

(A) Disegno dell'effetto sottopopolazione (STEPP) della sopravvivenza libera da malattia a 3 anni. (B) Sopravvivenza libera da malattia nel gruppo con Ki-67 elevato (Ki-67 >40%) secondo il trattamento con carboplatino. (C) Sopravvivenza libera da malattia nel gruppo con basso Ki-67 (Ki-67 ≤ 40%) secondo il trattamento con carboplatino. Sono stati riportati i valori p e i rapporti di rischio (HR) del test a rango singolo (carboplatino vs. non carboplatino).

Il TNBC è un gruppo di tumori con una prognosi sfavorevole a causa della biologia tumorale aggressiva e della mancanza di agenti mirati. Una migliore comprensione del suo comportamento biologico è essenziale per migliorare i risultati per i pazienti con TNBC. In questo studio, abbiamo esaminato retrospettivamente 363 pazienti per analizzare la correlazione del livello di espressione di Ki-67 con le caratteristiche clinicopatologiche e la prognosi del TNBC. Tutti i pazienti provenienti da un singolo centro hanno assicurato che la qualità del test dei biomarcatori patologici e la decisione terapeutica erano sostanzialmente stabili.

L'uso del Ki-67 come marcatore prognostico nel cancro al seno è stato ampiamente studiato, ma solo pochi studi lo hanno esaminato nel sottogruppo triplo negativo. Alcuni ricercatori hanno esaminato il valore prognostico del K-67 in un'intera coorte di tumori al seno, ma il numero di casi in TNBC e Her2+ era piuttosto piccolo e questo potrebbe limitare la capacità del Ki-67 di identificare sottoclassi clinicamente distinte. Uno studio di coorte coreano ha dimostrato che un'elevata protezione del Ki-67 (≥ 10%) era significativamente associata a una scarsa sopravvivenza libera da recidiva e a una sopravvivenza globale nel TNBC, nonostante un tasso di risposta patologica completa (pCR) più elevato, Munzone et al. ha riferito che l'indice di etichettatura Ki-67 era associato a diversi sottogruppi di prognosi nel TNBC negativo-negativo con un valore limite del 35%. Coerentemente con questi risultati, il nostro studio ha dimostrato che un’elevata espressione di Ki-67 (>40%) era significativamente correlata con una prognosi peggiore nei pazienti con TNBC, indipendentemente dalle dimensioni del tumore e dallo stato dei linfonodi.

La misurazione del Ki-67 mediante IHC è un metodo economico adatto per un uso diffuso nella pratica clinica. Il gruppo di lavoro internazionale sul cancro al seno Ki-67 ha proposto raccomandazioni per l’analisi, la segnalazione e l’uso di questo marcatore potenzialmente importante sulla base dei dati disponibili. Questo studio ha seguito rigorosamente le linee guida per garantirne il valore. In un altro studio retrospettivo del nostro centro, un'elevata espressione di Ki-67 era correlata alla recidiva precoce nel carcinoma mammario Luminal B/Her2 negativo con un valore limite del 30%. Ciò potrebbe riflettere la stabilità e l’affidabilità del test Ki-67 in un singolo centro.

I punti di cut-off dell’indice Ki-67 utilizzati negli studi clinici e negli studi variavano ampiamente, dal 10% al 61%. Poiché i valori basali di Ki-67 per i tumori tripli negativi e HER2-positivi sono molto più alti rispetto ai tumori luminali, la scelta del cut-off del Ki-67 potrebbe essere più ovvia se fosse considerata di conseguenza in ciascun sottogruppo. In questo studio, abbiamo scelto come valore limite il Ki-67 mediano, che è stato ampiamente utilizzato in altri studi. A causa della variabilità tra osservatori e tra laboratori, sono necessarie molte più prove per stabilire un punto di cut-off Ki-67 appropriato per il TNBC.

Il tempo di follow-up del nostro studio è relativamente breve. Tuttavia, nonostante un follow-up medio di 34 mesi, il livello di espressione di Ki-67 mostra il suo valore prognostico indipendente nel TNBC. Ciò potrebbe essere dovuto alla replicazione precoce del TNBC durante i primi tre anni di follow-up. In questo studio, il 94,3% (50/53) delle recidive si è verificato entro i primi tre anni dopo l’intervento chirurgico.

La chiave per utilizzare il regime di platino sarebbe selezionare il paziente giusto. Esiste un'associazione ben descritta tra le mutazioni TNBC e BRCA della linea germinale. Studi neoadiuvanti hanno mostrato tassi elevati di pCR tra i tumori al seno associati a BRCA1 trattati con cisplatino. Tuttavia, l’applicazione clinica di routine dei test genetici BRCA deve ancora affrontare alcune sfide. Sebbene il test Ki-67 sia più conveniente ed economico e possa essere una buona alternativa.

Nello studio clinico GeparSixto, l’aggiunta di carboplatino neoadiuvante a un regime taxano-antraciclina ha aumentato significativamente il tasso di pCR dei pazienti con TNBC. L'analisi dei sottogruppi ha mostrato che la probabilità di radioaddizione a favore del carboplatino nel gruppo ad alto Ki-67 (>20%) era 1,40 (IC 95%: 0,968-2,02), che era superiore a quella del gruppo a basso Ki-67 (OR: 1,09, 95 %IC: 0,490 -2,4). Allo stesso modo, il nostro studio ha mostrato un possibile effetto benefico del carboplatino in pazienti con tumori altamente proliferativi (Ki-67 > 40%) nel contesto adiuvante. Ma questa tendenza resta da testare in ulteriori studi prospettici e ben bilanciati con campioni di dimensioni più ampie.

Una possibile limitazione di questo studio potrebbe essere correlata all’eterogeneità della terapia adiuvante, poiché non tutti i pazienti hanno ricevuto lo stesso regime. Tuttavia, possiamo stimare che tra i pazienti sottoposti a chemioterapia, la maggioranza (72,5%) ha ricevuto un regime contenente un'antraciclina e più della metà di essi (55,6%) ha ricevuto regimi contenenti sia un'antraciclina che taxani.

In conclusione, il TNBC sembra essere un gruppo eterogeneo con esiti clinici variabili. Il TNBC con un alto potenziale di diffusione dovrebbe essere monitorato più frequentemente per tre anni e potrebbe essere un candidato per ulteriori trattamenti postoperatori con meccanismi diversi, come il carboplatino.

Abbiamo raccolto informazioni su pazienti con cancro al seno consecutivi sottoposti a intervento chirurgico al torace tra gennaio 2004 e dicembre 2012 presso l'ospedale Ruijing di Shanghai attraverso il database del cancro al seno del Comprehensive Breast Health Center. Il protocollo è stato approvato dai comitati etici dell'ospedale Ruijin di Shanghai e tutti i pazienti hanno fornito il proprio consenso informato scritto al partecipante a questo studio prima che venissero raccolti i dati clinici e patologici.

Un totale di 363 pazienti con TNBC sono stati studiati retrospettivamente. Dati basali tra cui età, caratteristiche del tumore (dimensione del tumore, metastasi linfonodali, metastasi a distanza, grado del tumore, stadio patologico, espressione di ER/PR/HER2 e tipo istologico) e informazioni chirurgiche. Le decisioni terapeutiche per ciascun paziente sono state prese nel corso di un incontro multidisciplinare quotidiano a cui hanno partecipato chirurghi, oncologi medici, radioterapisti e patologi.

I tumori sono stati classificati istologicamente secondo la classificazione dei tumori dell’Organizzazione Mondiale della Sanità. Il grado istologico è stato valutato secondo il sistema di punteggio Elston ed Ellis. La colorazione IHC per ER, PR, HER2 e Ki-67 è stata eseguita di routine utilizzando il sistema Ventana BenchMark XT (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ). La colorazione IHC è stata eseguita su sezioni da 4 μm di sezioni di tessuto incluse in paraffina (FFPE) con anticorpi primari contro ER (SP1, 1:100, Dako, Danimarca), PR (PgR 636, 1:100, Dako, Danimarca), HER2 ( 4B5, Roche, Svizzera), K-67 (MIB-1, 1: 100, Dako, Danimarca). L'espressione IHC HER2 è stata valutata come segue: 0 (colorazione della membrana assente o debole), 1+ (colorazione della membrana debole in >10% delle cellule tumorali, colorazione della membrana incompleta), 2+ (colorazione della membrana debole o moderata in >10% delle cellule tumorali cellule) e 3+ (colorazione uniforme e intensa della membrana di >30% delle cellule tumorali invasive). Il test di ibridazione in situ fluorescente (FISH) per l'amplificazione del gene HER2 veniva generalmente sequenziato quando HER2 era IHC 2+. La FISH è stata eseguita utilizzando il kit PathVysion HER-2 DNA FISH (Vysis Inc, Downers Grove, IL) secondo le istruzioni del produttore.

Tutti i vetrini istologici e tumorali IHC sono stati valutati da due patologi. I punteggi istologici e tutte le caratteristiche biologiche sono stati valutati sulla base di componenti invasivi.

Il valore limite per la positività ER e la positività PR era pari all'1% di cellule tumorali positive con colorazione nucleare. Positivo per HER2 era il guadagno IHC HER2 3+ o il FISH (rapporto HER2/CEP17 ≥ 2,0 o numero medio di copie HER2 ≥ 6,0 segnali/cellula). L'indice Ki-67 è stato espresso come percentuale di cellule con colorazione nucleare positiva tra almeno 1000 cellule invasive nell'area reclutata. L'intensità della colorazione non aveva importanza.

La recidiva del cancro al seno è stata definita come la prima recidiva invasiva dimostrata della mammella locale/controlaterale, regionale o a distanza in qualsiasi sito. La sopravvivenza libera da malattia (DFS) è stata definita come l'intervallo tra la data dell'intervento chirurgico primario e la prima recidiva, il secondo tumore mammario invasivo primario o la morte attribuibile a qualsiasi causa. La sopravvivenza globale (OS) è stata definita come il tempo trascorso dalla data dell'intervento chirurgico primario al momento della morte, indipendentemente dal fatto che fosse correlato o meno al cancro al seno.

Tutti i valori p inferiori a 0,05 sono stati considerati statisticamente significativi. Tutti i test statistici erano a due code, con intervalli di confidenza del 95%. Il test Chi-quadrato è stato utilizzato per le variabili categorizzate (test esatto di Fisher quando il test Chi-quadrato non era disponibile). Le curve di sopravvivenza sono state costruite utilizzando il metodo Kaplan-Meier. Il test dei ranghi logaritmici è stato utilizzato per determinare le associazioni tra variabili individuali e sopravvivenza, il modello di regressione logistica per esaminare l'associazione delle caratteristiche del tumore con il livello di espressione di Ki-67 e l'analisi di regressione dei rischi proporzionali di Cox per identificare fattori prognostici significativi nel TNBC. Le analisi statistiche sono state eseguite nella versione SPSS 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).

L'interazione tra l'uso di carboplatino e K-67 è stata valutata graficamente utilizzando la metodologia Pattern of Pattern of Surpopulation (STEPP). In breve, il metodo STEPP utilizza un approccio a finestra scorrevole per definire più sottopopolazioni di pazienti sovrapposte secondo una covariata continua, come Ki-67, e calcola gli effetti del trattamento risultanti stimati in ciascuna sottopopolazione. L'analisi STEPP è stata eseguita con il software R (http://cran.r-project.org/) con il pacchetto “STEPP”.

Questa ricerca è stata finanziata dalla National Science Foundation of China 81572581. I finanziatori non hanno avuto alcun ruolo nella progettazione dello studio, nella raccolta e analisi dei dati, nella decisione di pubblicare o nella preparazione del manoscritto. Questa indagine è stata presentata come discussione poster al Congresso EMSO Asia 2015, 18-21 dicembre 2015, Singapore.

Oppure la ghiandola mammaria è una malattia terribile e per qualche motivo mortale, che è al secondo posto nel numero di casi in entrambi i sessi.

Secondo le caratteristiche fisiologiche, il cancro si manifesta più spesso nelle donne, con un tasso di mortalità nelle fasi finali che raggiunge il 90%.

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Definizione

La principale difficoltà nel trattamento del cancro risiede nella sua “invisibilità”: nei primi stadi - fino a 2 - è quasi impossibile da rilevare, poiché lo sviluppo della malattia avviene senza sintomi particolari.

Si osserva una condizione dolorosa, a volte si può sentire uno strano nodulo al petto o appare una secrezione specifica dal capezzolo, si può anche avere la febbre o sentirsi deboli, ma pochi malati prestano attenzione a questi sintomi.

Quando agli stadi 2-3-4 diventa impossibile non notare il tumore, diventa più difficile curarlo, e diminuisce anche la percentuale dei guariti: al terzo stadio la percentuale è del 75-90%, al quarto scende al 10%.

È importante sapere: Per individuare il cancro nelle fasi iniziali, è necessario sottoporsi a controlli regolari da parte di un mammologo, soprattutto per le donne a rischio.

L'esame regolare del seno e la sua radiografia aiuteranno a notare il nodulo in tempo e a condurre ulteriori test. In caso di dubbio, il medico dovrebbe condurre un esame per i marcatori tumorali.

Si tratta di sostanze speciali che l'organismo produce nel tentativo di proteggersi dal cancro. Una piccola quantità di essi è sempre presente nel corpo e il superamento della norma nella maggior parte dei casi indica la presenza di cancro. Ciò aiuta a rilevare precocemente la presenza di un tumore maligno e ad iniziare immediatamente il trattamento.

Marcatore tumorale

Per determinare il cancro al seno vengono utilizzati diversi marcatori tumorali, tra i quali è particolarmente utile il marcatore ki-67.

Questa sostanza può comparire in diversi tipi di tumori, ma più spesso appare nel cancro al seno e al cervello. Il Ki-67 è espresso nelle cellule durante la divisione, ma non si osserva nello stato di riposo.

Poiché una delle caratteristiche principali del cancro è la sua rapida crescita e divisione cellulare, rilevare il marcatore ki-67 è abbastanza semplice. L’indice ki-67 è il rapporto tra le cellule attualmente in divisione e tutte le cellule tumorali.

In questo caso la sostanza aiuta non solo a individuare un tumore, ma anche a fare una piccola prognosi: se l'indice è inferiore al 10%, la prognosi di sopravvivenza arriva fino al 95%; se questo numero viene superato, il tasso di sopravvivenza diminuisce fino a 80%.

Nota: Un mammologo non dovrebbe limitarsi solo alla determinazione del ki-67: per una prognosi più accurata e una determinazione della natura del cancro, è necessario condurre ulteriori studi su altri marcatori tumorali.

Allo stesso tempo, i tumori con un indice elevato rispondono meglio al trattamento aggressivo e forte, in cui l'effetto si verifica sulle cellule in divisione, il che aumenta l'efficacia del trattamento. D’altro canto, livelli aumentati di ki-67 possono portare alla formazione di metastasi e ricadute.

Per ottenere la sostanza, il medico preleva un campione da un tumore sospetto e lo esamina. Per una determinazione più accurata, il campione viene prelevato 2-3 volte con un intervallo di diversi giorni. Se il livello aumenta, ciò indica lo sviluppo di cellule tumorali.

Successivamente, il mammologo può iniziare a selezionare il trattamento appropriato. I marcatori tumorali ki-67 sono estremamente utili: aiutano i medici a identificare il cancro al seno nelle fasi iniziali e iniziare a combatterlo. La sostanza stessa indica anche alcune caratteristiche dello sviluppo di un tumore maligno, di cui i mammologi tengono conto per selezionare il trattamento.

Tutta la verità sul trattamento del cancro al seno nel seguente video:

Studio immunoistochimico standardizzato: stato dei recettori nel cancro al seno (PR, ER, ki67, Her2 neu). Questa operazione viene eseguita solo se è presente un microvetrino già pronto su un vetrino e un campione di tessuto in un blocco di paraffina.

Sinonimi russo

Studio IHC (RE, RP, Her2/neu, Ki-67), analisi immunoistochimica dello stato dei recettori del cancro al seno.

Sinonimi inglesi

Test IHC (immunoistochimica) per lo stato dei recettori del cancro al seno (ER, PR, HER2, Ki67), sovraespressione di HER2 mediante IHC, recettori degli estrogeni, recettori del progesterone, stato ER e PR, stato dei recettori degli estrogeni e del progesterone.

Metodo di ricerca

Metodo immunoistochimico.

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Blocco di paraffina con biopsia della formazione del seno. Il tessuto del tumore primario può essere ottenuto mediante biopsia con ago centrale, nonché mediante chirurgia incisionale ed escissionale. Per identificare le metastasi, è possibile sottoporre a biopsia il tessuto della parete toracica, dei linfonodi regionali o di organi distanti.

Informazioni generali sullo studio

I principi e le strategie moderne per il trattamento del cancro al seno si basano, tra le altre cose, sui risultati della valutazione dello stato dei recettori e del potenziale proliferativo delle cellule tumorali. Le cellule tumorali hanno la capacità di produrre e posizionare sulla loro superficie speciali proteine ​​​​-recettori, la cui stimolazione porta all'inizio della divisione cellulare e alla crescita del tumore. Tali recettori sono in grado di legarsi a sostanze normalmente presenti nell'organismo e inizialmente non hanno nulla a che fare con lo sviluppo di una neoplasia maligna. Secondo le attuali linee guida cliniche, per il cancro al seno è importante la presenza dei seguenti recettori sulle cellule tumorali, le cui varie combinazioni sono chiamate stato recettoriale:

Recettori per gli ormoni: estrogeni e progesterone ( Ehm,PR). Una percentuale significativa dei tumori al seno è ormono-dipendente, ovvero la loro crescita è supportata e stimolata da estrogeni e progesterone. I tumori con uno stato positivo dei recettori ormonali rispondono bene alla terapia con analoghi dell'ormone (tamoxifene), che bloccano i recettori corrispondenti - si legano a loro, ma non causano l'attivazione dei processi intracellulari e impediscono al recettore di contattare successivamente l'ormone. Pertanto, lo studio della produzione di ER e PR da parte di un tumore consente di determinare la sua sensibilità a questi farmaci.

Recettore del secondo tipo per il fattore di crescita epidermico umano (recettore del fattore di crescita epidermico umano 2 - HER2/neu). Nelle cellule di alcuni tumori al seno si verifica un aumento della produzione di questa proteina recettore che, combinata con un fattore di crescita naturale, innesca il processo di divisione della cellula tumorale. Il numero complessivo di pazienti con carcinoma mammario HER2-positivo varia dal 15% al ​​20%. La determinazione di HER2/neu non ha solo significato prognostico (tali tumori di solito progrediscono più rapidamente e hanno uno sviluppo clinico più aggressivo), ma consente anche di valutare la possibilità di utilizzare farmaci mirati - anticorpi monoclonali contro il recettore HER2 - trastuzumab (Herceptin), lapatinib, pertuzumab. Inoltre, i tumori HER2-positivi sono resistenti al tamoxifene.

L'attività proliferativa è un indicatore della capacità delle cellule tumorali di subire una divisione illimitata, che è il fattore principale nell'aggressività biologica del tumore. Il processo di divisione è accompagnato dalla comparsa di alcune proteine ​​nella cellula, una delle quali è Ki-67. Non viene prodotto nelle cellule a riposo, il che rende possibile utilizzarlo come indicatore dell'attività proliferativa del tumore. La determinazione del livello di Ki-67 ha un importante significato prognostico, poiché i tumori provenienti dalle cellule meno mature e differenziate hanno la maggiore attività proliferativa.

Tutti i marcatori di cui sopra possono essere rilevati mediante esame immunoistochimico di una biopsia o di materiale tumorale chirurgico. Per l'analisi, dal blocco di paraffina finito vengono tagliate sezioni sottili utilizzando uno speciale microcoltello, che vengono poi fissate su vetrini e colorate con coloranti di routine per consentire di distinguere le cellule tra loro e dalla sostanza intercellulare. Quindi le sezioni del vetrino vengono colorate con soluzioni di anticorpi marcati con etichette fluorescenti specifiche per uno dei recettori studiati. Se il recettore desiderato è presente nella cellula tumorale, gli anticorpi si legano ad esso e quando si osserva il vetro sotto un microscopio speciale, si può vedere la fluorescenza, che indicherà un risultato positivo del test. Inoltre, osservando una sezione, il morfologo potrà vedere che il marcatore colorato si trova nel nucleo, nella sostanza cellulare o sulla membrana delle cellule tumorali. Il numero di soluzioni anticorpali utilizzate corrisponde al numero di marcatori esaminati nel campione. Il grado di fluorescenza e la percentuale di cellule che la contengono costituiscono la base per l'interpretazione dei risultati dell'analisi immunoistochimica e sono descritti più dettagliatamente nella sezione corrispondente.

A cosa serve la ricerca?

• Determinare lo stato dei recettori ormonali e il grado di attività proliferativa del cancro al seno per valutare la prognosi e personalizzare il trattamento, compresa la determinazione delle indicazioni per una terapia mirata.
• Sulla base dei risultati del rilevamento dei recettori ormonali, viene determinata l'opportunità dell'uso di antiestrogeni e farmaci anti-HER2 mirati al recettore HER2. L'assenza riscontrata di questi marcatori consente di evitare la prescrizione di terapie evidentemente inefficaci. Un elevato indice di attività proliferativa, così come uno stato negativo dei recettori, costituiscono nella maggior parte dei casi un'indicazione per l'aggiunta di farmaci citostatici al trattamento.

Quando è programmato lo studio?

• In presenza di cancro al seno istologicamente verificato - tumori di nuova diagnosi, ricorrenti e metastatici.

Cosa significano i risultati?

Quando si interpretano i risultati della determinazione immunoistochimica stato dei recettori degli ormoni steroidei(estrogeni e progesterone) nei tumori al seno, va valutata non solo la percentuale di cellule colorate con anticorpi, ma anche l'intensità della colorazione. Entrambi questi parametri vengono presi in considerazione nella scala Allred, dove la percentuale di cellule positive viene valutata da 0 a 5 punti, e l'intensità della colorazione da 0 a 3. La somma dei due indicatori costituisce il punteggio finale, che determina la positività del tumore in base allo stato dei recettori: 0-2 negativi, 3-8 positivi. Un punteggio complessivo di 3 su questa scala corrisponde all'1-10% delle cellule colorate ed è il risultato positivo minimo in cui la terapia ormonale può essere efficace.

A volte lo stato del recettore è determinato esclusivamente dalla percentuale di cellule con nuclei colorati. In questi casi, il NCCN raccomanda di considerare positivi tutti i tumori con più dell’1% di cellule positive.

Quando si interpreta la colorazione recettoreHER2/nuovo Viene presa in considerazione solo la colorazione della membrana (colorazione della membrana cellulare), che viene valutata su una scala da 0 a +3:

un risultato pari a 0 e +1 è considerato HER2-negativo;

2 – risultato borderline, in cui, sulla base dei dati di uno studio immunoistochimico, è impossibile giudicare la presenza del recettore HER2-neu sulla superficie delle cellule; è necessario uno studio FISH o CISH;

3 – risultato positivo – la terapia mirata con farmaci anti-HER2 sarà efficace.

Secondo la classificazione di S. Gallen Consensus (2009), viene considerato un basso indice di attività proliferativa Livello Ki-67 meno del 15%, media – 16-30% e alta – più del 30%.

Cosa può influenzare il risultato?

• La qualità dei blocchi di paraffina forniti, l'esperienza e le qualifiche del patologo, poiché il metodo immunoistochimico non è completamente standardizzato e la valutazione dei suoi risultati è in una certa misura soggettiva.
• L'interpretazione dei risultati dello studio deve essere effettuata esclusivamente da un medico della specialità appropriata; i dati forniti sull'efficacia e l'opportunità di prescrivere determinati farmaci, a seconda dei risultati dello studio, hanno carattere puramente consultivo e possono essere rivisti tenendo conto le caratteristiche individuali del paziente.

Note importanti

• Se lo stato del recettore HER2/neu è incerto (risultato dello studio immunoistochimico 2+), si consiglia di eseguire uno studio FISH o CISH, che rivelerà l'iperattivazione del gene che codifica per questo recettore. Se questi studi non sono disponibili, è consentito ripetere lo studio immunoistochimico, ma su un campione diverso di tessuto tumorale.
• Esistono diverse scale per valutare lo stato dei recettori del cancro al seno; il rapporto di laboratorio dovrebbe indicare quale è stata utilizzata per valutare la positività del tumore in questo studio, oltre a fornire una descrizione descrittiva del numero di cellule positive, delle caratteristiche della colorazione delle strutture cellulari e delle caratteristiche morfologiche delle cellule.

Esame istologico del materiale bioptico della formazione del seno

Esame citologico delle punture della ghiandola mammaria

Determinazione dello stato HER2 del tumore mediante FISH

Determinazione dello stato del tumore HER2 mediante CISH

Chi ordina lo studio?

Oncologo, mammologo, oncologo ginecologico.

Letteratura

Dana Carmen Zaha. Importanza dell'immunoistochimica nel cancro al seno. Giornale mondiale di oncologia clinica, 2014; 5(3): 382-392.

Linee guida per la pratica clinica del NCCN in oncologia: cancro al seno. Versione 3.2017 – 10 novembre 2017. Disponibile su www.nccn.org.

Diagnostica clinica di laboratorio: linee guida nazionali: in 2 volumi – T. I/Ed. V. V. Dolgova, V. V. Menshikova. – M.: GEOTAR-Media, 2012. P. 658-660.

V. F. Semiglazov, R. M. Paltuev, V. V. Semiglazov, G. A. Dashyan, T. Yu. Semiglazova, P. V. Krivorotko, K. S. Nikolaev. Raccomandazioni generali per il trattamento del cancro al seno in fase iniziale St. Galle-2015, adattato dagli esperti della Società Russa di Oncomammologi. Tumori dell'apparato riproduttivo femminile, 2015; 3: 43-60.

È noto che il cancro al seno è una malattia eterogenea. Ciò significa che la stessa manifestazione della malattia può essere causata da mutazioni in geni diversi o da mutazioni diverse all’interno dello stesso gene. Esistono molti sottotipi della malattia, che possono essere determinati mediante test genetici o sulla base di metodi che utilizzano test immunoistochimici.

Nei test multigenici, la proliferazione (crescita cellulare) ha un impatto significativo sulla previsione del rischio di ricaduta della malattia. Oltre alla determinazione dei parametri istologici convenzionali, la valutazione della proliferazione è uno dei fattori più importanti per prendere decisioni terapeutiche nelle pazienti con cancro al seno.

È disponibile un'ampia gamma di metodi per valutare la proliferazione delle cellule tumorali, in particolare il calcolo delle figure mitotiche in segmenti di tessuti colorati, l'analisi della citometria a flusso per determinare la proporzione delle cellule nella fase di crescita del ciclo cellulare, la considerazione della timidina -indice di marcatura degli antigeni nucleari delle cellule proliferanti.

Ki-67 è una proteina nucleare associata alla proliferazione cellulare. È stato originariamente identificato all'inizio degli anni '80 studiando un anticorpo monoclonale di topo diretto contro l'antigene nucleare del linfoma di Hodgkin. Il metodo più comune per analizzare l'antigene Ki-67 è la valutazione immunoistochimica.

È stato dimostrato che l'antigene nucleare Ki-67 viene espresso in determinate fasi del ciclo cellulare. L'espressione genica è il processo di conversione delle informazioni da un gene al prodotto finale: RNA o proteina. Utilizzando la colorazione immunologica con anticorpi monoclonali Ki-67, è possibile stimare la percentuale di crescita della popolazione di cellule tumorali e determinare la prognosi della malattia.

Metodi di rilevamento

Il Ki-67 è un antigene tumorale che si trova nelle cellule in crescita e in divisione, ma è assente durante la fase di riposo della crescita cellulare. Questa caratteristica rende il Ki-67 un buon marcatore tumorale. Il test viene eseguito su un campione di tessuto tumorale per aiutare a prevedere la prognosi della crescita del tumore.

Il test Ki-67 non è raccomandato come obbligatorio per l'esame istologico di un tumore al seno. Ma per le forme aggressive di cancro, un medico può ordinare questo test per vedere l’effetto del Ki-67 sulla crescita del tumore. L'analisi viene effettuata in combinazione con altri studi. Sulla base dei risultati generali di tutti i test ottenuti, viene sviluppato un piano di trattamento.

Un test Ki-67 positivo conferisce un rischio più elevato di recidiva e tassi di sopravvivenza peggiori nelle pazienti con cancro al seno in stadio iniziale. Nel lavoro clinico quotidiano, il Ki-67 è ampiamente utilizzato come fattore aggiuntivo per il processo decisionale sulle strategie di trattamento adiuvante (complementare alla chirurgia e alle radiazioni).

I tumori al seno con punteggi Ki-67 elevati sono composti da cellule che si dividono e crescono rapidamente. I farmaci chemioterapici sono altamente efficaci specificamente per le cellule bersaglio che crescono oltre la velocità normale. Pertanto, i tumori con livelli più elevati di Ki-67 rispondono bene alla chemioterapia. Le informazioni sui livelli di Ki-67 aiuteranno il medico a determinare con maggiore precisione quale trattamento funzionerà meglio in un determinato caso.

La preparazione per l'analisi Ki-67 non richiede condizioni speciali. Per preparare il materiale per l'esame istologico del tessuto mammario vengono utilizzati metodi standard.

Il test viene eseguito mediante colorazione, che misura la percentuale di cellule tumorali positive per Ki-67. Più cellule positive ci sono, più velocemente si dividono e formano nuove cellule.

Quando si esegue l'analisi, vengono utilizzati i seguenti metodi:

Significato del marcatore Ki-67 nel cancro al seno

Nel cancro al seno, un risultato Ki-67 inferiore al 10% è considerato basso, 10-20% borderline e 20% alto.

La tabella 1 mostra i valori medi di Ki-67 in base allo stadio della malattia, alle dimensioni del tumore e ad altri parametri.

Tabella 1 - Valori medi di Ki-67 in base a vari indicatori di malattia

L'assenza di una dinamica positiva dell'indice dei marcatori tumorali durante il trattamento indica un decorso e una prognosi sfavorevoli della malattia.

Ki67 funge da indicatore della prognosi del rischio residuo nei pazienti con cancro al seno trattati con terapia endocrina con letrozolo o tamoxifene. L'uso della terapia endocrina è direttamente correlato ai livelli di Ki-67. Il valore del marcatore tumorale dopo l'assunzione del farmaco è considerato un indice di malattia residua dopo il trattamento.

La dinamica dei cambiamenti nell'indice durante la chemioterapia aiuta a prendere una decisione sulla sua adeguatezza in un caso particolare. Una diminuzione dei livelli di Ki-67 si verifica in ogni caso di chemioterapia neoadiuvante. L'assenza di un calo dei livelli dei marcatori tumorali è foriero di una prognosi sfavorevole della malattia.